芦笋中硒元素的测定方法探究

于 辉， 吕瑞芳， 秦博文， 陈 超

(承德护理职业学院， 河北 承德 067000)

芦笋(Asparagus officinalis Linn)学名石刁柏，百合科，天门冬属，多年生草本植物，药食两用蔬菜。“味甘、性寒，入肺肾二经”。现代营养学分析，芦笋含有特别丰富的组织蛋白、叶酸、核酸和较多的硒、钼、镁、锰、铜、铁等微量元素，能有效地控制细胞异常生长，促使细胞生长正常化，具有防止细胞癌变的作用，列30种抗癌植物之首，是世人公认的抗癌药物。硒能抑制致癌物的活力，提高机体的免疫力，适量补充硒可提高人体免疫力，预防肿瘤和心血管等疾病的发生［1］。硒的安全和适宜摄入量为50－400μg/d［2］。本文利用氢化物发生原子荧光法测定芦笋中硒，旨在为芦笋的研究开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料:AFS－230型双道原子荧光光度计;断续流动氢化物发生器进样系统;SFG－01B.500黄石市恒丰医疗器械有限公司电热恒温鼓风干燥箱SFG－01B.500;WX－4000温压双控微波消解系统。本法所用试剂均为优级纯;实验用水为超纯水(电阻率为18.3M ·cm)。铁氰化钾溶液(100 g/L):取10.0g铁氰化钾，溶于100 mL超纯水中。载流:10%盐酸溶液，取100mL浓盐酸稀释至1000mL。硼氢化钾溶液(20g·L－1):称取10.0g硼氢化钾溶于500mL 2g·L－1的氢氧化钠溶液中，临用前配制。盐酸(6mol/L):将浓盐酸和水按体积1:1的混合。硒标准溶液:100μg/mL购自国家标准物质研究中心。芦笋:产地，河南。

1.2 方法:取新鲜20.00g芦笋自然风干粉碎经微波消解后冷却，将消解液洗入干净的50 mL小烧杯中，低温蒸发至2.0 mL时，加入6.0 mol/L 的盐酸5.0 mL，继续加热至微沸5min，使六价硒还原为四价硒。冷却后完全转移至25mL容量瓶中，加入5.0mL 10%铁氰化钾，用10%盐酸溶液定容到刻度，摇匀待测。测量条件设定为灯电流:60mA，负高压:300V，原子化器高度8 mm，原子化器温度:200℃，载气流量:500mL/min，屏蔽气流量:1000ml/min，读数方式:峰面积，读数延迟时间2s，读数时间10s，测量方法:标准曲线法。

1.3 样品分析:开机，按1.2设定仪器工作条件，输入样品重量、定容体积等有关参数，原子化器点火，预热30 min。采用断续流动自动进样［3］，依次测定空白、标准溶液、样品的荧光强度，仪器自动计算样品测量结果。

2 结果

2.1 标准曲线的绘制:分别取 0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8mL硒标准溶液，按1.2方法步骤进行处理，冷却后完全转移至100mL容量瓶中，加入5.0mL 10%铁氰化钾，用10%盐酸溶液定容到刻度，制作的标准系列浓度为:0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8μg/mL。

2.2 方法的精密度和准确度:用0.6 μg/mL标准溶液在上述条件下，平行测定11次，经统计测量法计算其相对标准偏差RSD=1.28%。进行加标回收试验，试验结果表明，硒的加标回收率为99.43%。

2.3 样品含量:按1.2设定仪器工作条件，对芦笋样品溶液进行三次平行测定，得到样品溶液硒的浓度为0.456μg/mL，经计算样品含量 0.57μg/g。

3 讨论

微波消解的特点是化学反应快;试剂用量少，空白值较低;样品交叉污染机会少，可避免硒的挥发，回收率高;效率高，操作简单，不污染工作环境;节能，降耗［4］。试验考察了浓硝酸、浓硝酸与过氧化氢、浓硝酸与浓高氯酸不同消解体系以及比例和用量。结果表明，浓硝酸与浓高氯酸(8+2)mL的消化效果最好。在消解过程中，为了避免反应过于激烈，防止压力骤升，采用功率400W，压力400kPa，时间设定为10min。原子化器高度是影响荧光信号的一个重要参数。通过作原子化器的高度与荧光强度的关系试验，表明原子化器的高度为8mm时，荧光强度最好;信噪比最佳，原子化效率最好。对于光电倍增管，负高压越高，测定的灵敏度越好，但负高压过高使信号噪音偏高。通过作 210、240、260、270、280、290、300、310V 条件下，测定 1.0μg/mL硒标准溶液的荧光强度，计算信噪比。负高压在300V时信噪比最大，故负高压为300V。作1.0μg/mL硒标准溶液的灯电流与荧光强度曲线，计算信噪比。灯电流在60－70mA信噪比最好。因此，选择灯电流60mA。硼氢化钾浓度最关键，影响氢化物生成速度，试验表明，当硼氢化钾浓度在20g/L左右变化时，荧光强度趋于恒定，所以用20g/L硼氢化钾进行测定。

在最佳测量条件下，方法的线性范围为0－0.8μg/L，线性方程为:I=57.429C －2.919，线性相关系数 r=0.9998，检出限(3S/N)为0.024μg/mL。可见氢化物发生原子荧光法测定药用植物中的硒是可行的。测定结果表明，鲜芦笋的含硒量达0.57μg/g，比一般蔬菜(0.006－0.237)的含量高几倍甚至几十倍，具有一定保健功能，所含的天门冬酰胺、香豆素、芦丁等有抑制癌细胞、扩张血管、利尿解毒的多种作用，对预防癌症、心脑血管病、高血压、糖尿病、肾病、脂肪肝、皮肤病、支气管病等有一定疗效。营养学家和素食界人士均认为它是健康食品和全面的抗癌中草药。

［1］李冬华，袁瑞荣，孙燕，等.中药芦笋的实验和临床研究 Ⅰ、芦笋抗肿瘤作用和免疫调节功能的初步实验研究［J］.中国临床药理学杂志，1988，4(1):32 －39.

［2］赵向东.硒的饮食推荐量［J］.国外医学地理学分册，1998，19(1):9－11.

［3］卑占宇，杨木华.氢化物发生原子荧光光谱法测定荆芥中汞和砷［J］.理化检验 － 化学分册，2010，46(8):971 －972.

［4］徐桂杰，可成友，边蔷，等.有机样品中硒消解方法的研究进展［J］.山西中药，2009，25(11):49－51.