党参药材不同提取方法的比较研究

2012-10-25施志顺孟祥松

药学研究 2012年1期

施志顺，孟祥松，时军

（1.亳州市药品检验所，安徽亳州236800；2.广东药学院中药学院，广东广州510006）

党参为常用补益类中药，味甘、性平，入脾、肺二经，具补中益气、生津和胃之功效，临床常用于气虚证患者［1］.近年来，党参广泛用于冠心病、高血压及功能性子宫出血等症的治疗，在保健食品方面亦有较多应用［2］.然而，现行的2010年版《中国药典》只有显微鉴别和薄层鉴别，缺乏定量的评价方法［3，4］.本文通过比较冷浸法、加热回流法、索氏回流法和超声提取法等提取方法，采用HPLC法测定其中党参炔苷的含量，考察药材中党参炔苷的含量，以期确定党参的提取方法，为党参药材的质量评价提供参考.

1 仪器和试剂

1.1 仪器 Dionex型高效液相色谱系统（P680型泵，PDA－100型检测器，ASI－100自动进样器），Dikma C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），Sartorius BS110S万分之一天平（北京赛多利斯天平有限公司），101A－1电热鼓风烘箱（上海索域）.

1.2 试药党参炔苷对照品（购于本草天工科技有限责任公司，纯度＞98%），乙腈（重庆迪马，色谱纯），水为娃哈哈纯净水.党参药材购于广州清平中药材专业市场，为甘肃产同一批次的优质品.

2 方法与结果

2.1 党参炔苷测定方法的确定［5］取党参炔苷对照品0.008 5g，精密称定，甲醇定容成10mL，即得对照品溶液.以下列色谱条件测定：固定相 Phenomenex Synergi C18柱（4.6 mm×250mm，5μm）；流动相乙腈－水（25∶75）；流速1.0 mL·min－1；检测波长268nm；进样量20μL；理论板数以党参炔苷计不低于3 000.取党参炔苷对照品溶液，精密吸取0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01mL，定容成1mL，得425、340、255、170、85、42.5、34、25.5、17、8.5μg·mL－1系列对照品溶液.吸取上述对照品溶液，分别进样2次，测定峰面积.以对照品质量浓度（μg·mL－1）为横坐标，峰面积A为纵坐标，绘制标准曲线.

回归方程A＝0.124 1C－0.769 1，r＝0.999 8，表明党参炔苷在0.008 5～0.425mg·mL－1范围内进样量与面积呈良好的线性关系.党参炔苷对照品与党参药材样品色谱图见图1.

2.2 提取方法的选择党参主要含有糖类、氨基酸、皂苷、甾醇及多种无机元素，其中党参炔苷为专属性成分.采用冷浸法、回流法、索氏提取及超声法提取，比较党参炔苷的含量，优选提取方法.

2.2.1 冷浸法取党参药材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1 g，精密称定，加入甲醇100mL，冷浸24h过夜，滤过，滤液70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔滤膜滤过，即得.

图1 党参炔苷测定色谱图

2.2.2 加热回流法取党参药材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密称定，加入甲醇50mL热回流2h，滤过，滤渣再加入30mL甲醇热回流1.5h，合并滤液，甲醇定容至100 mL，70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔滤膜滤过，即得.

2.2.3 索氏提取法取党参药材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密称定，用滤纸包好放入索氏提取器，从上端加入甲醇80mL，70℃下恒温提取约5h直到药包周围提取液变为透明，收集好提取液，水浴蒸干，甲醇定容至50mL，蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm滤膜滤过.

2.2.4 超声提取法取党参药材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密称定，加入甲醇50mL超声2h，趁热过滤，收集滤液，放冷补足50mL，精确量取25mL供试品溶液70℃水浴蒸干，最后用甲醇定容至5mL，即得.

2.2.5 不同提取方法的比较取上述4种供试品溶液，进样20μL，按2.1方法进行测定，峰面积定量，计算其中党参炔苷含量，结果见表1.

表1 不同提取方法党参炔苷含量（n＝3）

采用加热回流法提取，测得党参炔苷含量最高（1.013±0.039）mg·g－1，选择该法为党参药材的提取方法.

2.3 提取方法的确定取党参药材，置于烘箱中60℃烘2 h，粉碎成粗粉（20目）.取1g，精密称定，加入甲醇50mL热回流2h，滤过，滤渣再加入30mL甲醇热回流1.5h，合并滤液，甲醇定容至100mL，70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔滤膜滤过，对同一药材进行5次连续提取试验，结果热回流提取工艺党参炔苷平均含量为1.008mg·g－1，RSD为4.50%.含量测定结果见表2.