采用TLC法鉴别参芪苓术合剂中黄芪和黄连

罗 峰

（河南省药品审评认证中心，河南 郑州450000）

参芪苓术合剂是汝州市济仁糖尿病医院在临床经验的基础上研制的医院制剂，由黄芪、黄连、茯苓、白术等11味中药组成.主要功能为益气生津，润燥止渴.对糖尿病引起的口渴引饮，小便频数，神疲气短等有较好的疗效.为了更好地控制其内在质量，经参考有关文献及反复试验，建立了黄芪和黄连的TLC定性鉴别方法，该方法可靠、专属性强，可作为该制剂的质量控制方法.

1 仪器与试药

1.1 仪器 TCQ－250超声波清洗器（北京医用仪器二厂）等.

1.2 对照品与对照药材 黄芪甲苷对照品、盐酸小檗碱对照品、黄连对照药材均购自中国药品生物制品检定所.

1.3 试剂 薄层层析用硅胶G（青岛海洋化工厂），水为纯化水，其余试剂均为分析纯.参芪苓术合剂样品由汝州市济仁糖尿病医院提供，批号为：20110603、20110106、20110309.

2 TLC定性鉴别

2.1 黄芪的 TLC定性鉴别［1，2］取本品30mL，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20mL，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，加在中性氧化铝柱（100～200目，8g，内径10～15mm）上，用水50mL洗脱，弃去水洗液，再用50%乙醇80mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，制成供试品溶液.去除处方中黄芪，将处方中其他药材按比例制成合剂，再按照供试品液的制备方法制备成阴性对照溶液.另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液.照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各10μL、对照品溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（10∶20∶11∶5）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干.喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰.供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；而阴性对照无干扰，见图1.

图1 黄芪的薄层色谱图

2.2 黄连的薄层色谱鉴别［1，2］取本品3mL，蒸干，残渣加甲醇6mL振摇使溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液.将处方中其他所列药材按比例及工艺制备缺黄连的合剂作为阴性样品，同供试品制备得阴性对照溶液.另取黄连对照药材0.25g，加甲醇25mL，超声处理30min，滤过，取滤液作为对照药材溶液.再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液.照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述四种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水（12∶6∶3∶3∶0.6）为展开剂，置用浓氨试液预饱和20min的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视.供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照无干扰，见图2.

图2 黄连的薄层色谱图

3 结果与讨论

3.1 参芪苓术合剂处方中，主要成分为黄芪、黄连，为更好地控制该制剂的质量，建立了对黄芪、黄连的TLC定性鉴别方法.

3.2 由图1、图2可以看出该制剂中各药味的供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点.而所有的阴性样品在此相应的位置上未有斑点显示，表明样品中其他组分对鉴别无干扰，对参芪苓术合剂中黄芪、黄连显示出较好的专一性.

3.3 2.1黄芪的TLC定性鉴别中的供试品溶液的制备：曾选用供试品加三氯甲烷、乙酸乙酯及大孔吸附树脂提取的方法，杂质斑点较正文多，且阴性有干扰.展开剂曾选用乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5∶3∶1∶1），效果不如正文方法.

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：442，570，627，685，1019.

［2］吕武清，龙新华.中成药中的药材薄层色谱鉴别［M］.第1版.北京：人民卫生出版社，1997：469－493.