HPLC法测定盐酸奥洛他定片的有关物质

北京四环科宝制药有限公司（100070）曹相林 陈婧 陈怀鑫

盐酸奥洛他定片可用于过敏性鼻炎及荨麻疹的治疗，可改善皮肤病伴瘙痒症状[1]。盐酸奥洛他定原料有关物质的测定方法在USP34中有收载，我们通过大量实验建立了一种有效控制盐酸奥洛他定片有关物质的方法，并将自拟方法和USP34方法进行对比分析。检测数据显示两种方法均能对各已知杂质进行较好地分离检测，对未知杂质的检测，USP方法相比于自拟方法对有些未知降解产物影响较小，检测出来的杂质个数也较自拟方法少，因此选用自拟方法作为盐酸奥洛他定片的有关物质检测方法，并申请了专利。

1 仪器与试药

岛津LCSolution高效液相色谱仪（日本岛津公司）； CP225D型电子天平（德国赛多利斯公司）；盐酸奥洛他定对照品（批号：101001）常州市亚邦医药研究所有限公司；杂质（E）-异构体（批号：070712）常州市亚邦医药研究所有限公司；杂质B（批号：FOJ016）USP药典委员会；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。

2 HPLC测定方法的建立与验证

2.1色谱条件的建立 参考相关文献，初步确定采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，并进行了如下筛选：①离子对试剂：本品的保留随离子对试剂的浓度增加而增加，但20mmol/L以上时增加不明显。②磷酸盐：本品的保留随磷酸盐浓度的增加而增加，但20mmol/L以上时增加不明显。③pH值：因成离子对，pH值为酸性，3.0与3.5无明显差别。综合上述研究，确立了本品的色谱条件。

2.2检测波长的确定 将盐酸奥洛他定对照品、起始原料及合成中间体溶于流动相进行紫外扫描，结果表明起始原料和中间体均在230nm和275nm处有较大吸收，盐酸奥洛他定在298nm和212nm处有较大吸收，在275nm左右为最小吸收，因此最终选择230nm作为检测波长。

2.3灵敏度试验 通过试验确立了本品的最小检测限为0.4ng，最小定量限为2ng。灵敏度符合要求。

附表1 有关物质色谱条件的对比

附表2 自拟方法和USP方法检测数据对比

附表3 自制样品与原研样品的对比检测

2.4辅料干扰试验 经试验验证选用本HPLC测定方法，空白辅料不干扰样品的杂质检测。

2.5系统适用性 取盐酸奥洛他定对照品、（E）-异构体和杂质B用流动相配制成各约含0.02mg/mL的混合溶液，作为系统适用性溶液，进样检测，（E）-异构体与盐酸奥洛他定的分离度为7.7；杂质B与盐酸奥洛他定的分离度为1.9。

2.6自拟方法与USP方法对比检测 我们分别采用USP34方法和自拟方法检测经强酸、高温、强碱、光照破坏和氧化破坏的原料及制剂样品，结果表明采用自拟方法检测破坏试验的样品，所产生的杂质峰分离度能达到要求，辅料、空白溶剂峰无干扰。对USP34方法和自拟方法的检测数据进行对比可知，两种方法均能对各已知杂质进行较好地分离检测，对未知杂质的检测，USP方法相比于自拟方法对有些未知降解产物响应较小，检测出来的杂质个数也较自拟方法少。USP方法和自拟方法的色谱条件见附表1，制剂样品破坏试验具体数据见附表2。

2.7耐用性 为考察测定条件发生细小变动时，测定结果的承受程度，我们考察了以下因素：色谱仪（岛津SPD-M20A和安捷伦1260）、色谱柱品牌（Agilent和DIKMA）。

取本品研细的粉末适量（约相当于含盐酸奥洛他定5mg），精密称定，加流动相配制成1mL中含盐酸奥洛他定200μg的溶液，过滤，取续滤液作为供试品溶液，按测定法检测，结果表明：色谱仪和色谱柱等有小的变动时，对检测结果无明显影响。

2.8自制样品与原研样品的对比检测 取3批自制样品与协和发酵麒麟株式会社富士工厂生产的原研制剂，采用修订后的有关物质检查方法进行对比检测，数据见附表3。结果表明，三批自制样品的杂质水平优于原研制剂。

3 讨论

本文通过进行流动相的筛选、检测波长的确定、灵敏度试验、辅料干扰试验、系统适用性、耐用性、破坏试验及与美国药典方法的对比检测等相关研究，建立了盐酸奥洛他定片的有关物质测定方法，经验证该方法灵敏度高，快速准确，重现性好，辅料不干扰检测，各杂质的分离度能达到要求，且对本品未知杂质的检出能力优于美国药典方法。本方法可以很好地控制盐酸奥洛他定片的质量。