糖尿病微血管病变同型半胱氨酸检测的临床意义

大连海洋大学（116002） 周晓玲

大连医科大学 胡 宏

本文通过分别测定糖尿病及合并微血管病变症患者血清Hcy水平，探讨血清Hcy与糖尿病及合并微血管病变的相关关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院同期体检健康正常人40例。男24例，女16例。平均（50.4±9.1）岁。无心、脑、肝、肾等重要脏器疾病，无内分泌与其他慢性疾的设为正常对照组。2009～2010年来本院就诊，依据1999年世界卫生组织糖尿病诊断标准确诊为糖尿病的患者65例。男37例，女28例。年龄41～67岁，平均（54.4±6.9）岁。设为糖尿病组。其中糖尿病无并发症31例，入选条件：确诊为糖尿病、眼底荧光造影正常、尿微量白蛋白＜20μg/min，均系我院住院患者，同时排除急慢性肾炎、充血性心力衰竭、发热和泌尿系感染等其他疾病引起的蛋白尿，无心血管病史，正常心电图为无并发症组。糖尿病合并微血管病变34例，其中糖尿病视网膜病变15例，入选条件：按照1976年全国眼底病学组制定的标准诊断确诊为糖尿病视网膜病变，为合并视网膜病变组。糖尿病肾病19例，入选条件：尿微量白蛋白＞300μg/min，为合并肾病组。

1.2 仪器与试剂 日立7600－020全自动生化分析仪、伯乐D－10糖化血红蛋白分析仪。Hcy试剂盒及葡萄糖试剂盒由宁波美康生物科技有限公司提供，微量白蛋白试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司提供，糖化血红蛋白试剂盒由伯乐生命医学产品（上海）有限公司提供。

1.3 研究方法

1.3.1 标本的采集 所有受试者均于受试前3个月未服用维生素B12、维生素B6、叶酸、甲氨蝶呤、异烟肼、青霉胺等与Hcy代谢有关的药物，所有受试者检测前3天限食奶酪、海产品等高蛋氨酸食品。所有受试者均在过夜禁食12小时后，于次日清晨采集肘静脉血6 mL，分成3部分：2 mL置于肝素抗凝管中混匀，30分钟内离心分离血浆，置于－80℃ 冰箱保存，待成批测定Hcy，以减少批间差；2 mL置于肝素抗凝管中混匀，30分钟内离心分离血浆，置于－80℃ 冰箱保存，待成批测定空腹血糖以减少批间差；2 mL置于EDTA－2 K抗凝管中混匀，待成批检测糖化血红蛋白（Hb Alc），以减少批间差。所有受试者均在餐后2小时采集肘静脉血3 mL，置于肝素抗凝管中混匀，30分钟内离心分离血浆，置于－80℃ 冰箱保存，待成批测定餐后2小时血糖，以减少批间差。糖尿病患者同时留取随机尿液，取10 mL置－80℃保存，待成批测定微量白蛋白，减少批间差。

1.3.2 标本的检测 应用酶循环法检测血清Hcy浓度，高效液相色谱法测定糖化血红蛋白（Hb Alc），免疫比浊法测定尿微量白蛋白，氧化酶法测定空腹血糖和餐后2小时血糖。

1.4 统计学处理 数据以（±s）表示，两均数比较用t检验，P＜0.05为差异有显著性。

2 结 果

2.1 Hcy比较 糖尿病组（无并发症组及合并视网膜病变组）的血清Hcy浓度与正常对照组比较明显升高，差异有显著性（P＜0.05）；与糖尿病无并发症组相比，糖尿病微血管病变组血清Hcy浓度明显高于糖尿病无并发症组，差异有显著性（P＜0.05）。见表1。

表1 各组间血清Hcy的比较

2.2 空腹血糖及餐后2小时血糖比较 见表2。

表2 各组间空腹血糖及餐后2小时血糖的比较（mmol/L）

2.3 HbAlc及尿微量白蛋白比较 与正常对照组相比，糖尿病组HbAlc明显升高（P＜0.05）；与糖尿病无并发症组相比，糖尿病微血管病变组尿微量白蛋白明显升高（P＜0.05）；与糖尿病合并视网膜病变组相比，糖尿病合并肾病组尿微量白蛋白明显升高（P＜0.05）。见表3。

表3 各组间HbAlc及尿微量白蛋白的比较

3 讨 论

Hcy为血浆中的一种含硫氨基酸，是人体的必需氨基酸之一，是蛋氨酸在体内几乎所有组织中的代谢中间产物，其本身并不参与蛋白质的合成，但参与体内一碳单位的转移。蛋氨酸分子含有S甲基，在蛋氨酸腺苷转移酶的作用下与ATP生成S腺苷蛋氨酸后，可在甲基转移酶的作用下，将甲基转移体内已知的多种具有重要生理活性的物质。S腺苷蛋氨酸则生成S腺苷同型半胱氨酸。后者进一步脱去腺苷，生成Hcy。Hcy有3种代谢途径[1]：1）是重新甲基化形成蛋氨酸（蛋氨酸循环）又称再甲基化途径。2）是转硫化为胱硫醚又称为转硫化途径。3）Hcy在细胞内形成后直接释放到细胞外液的血浆中参加循环。在正常人体内，Hcy的生成和代谢保持着平衡，当这3种代谢途径发生紊乱时，则导致Hcy血症的形成。

近年来研究表明，高Hcy血症是心、脑及外周血管病变的独立危险因素[2]。何美霞[3]等认为，Hcy血症与糖尿病的发生密切相关，Hcy的异常增高，可被认为是糖尿病微血管慢性并发症的重要危险因素。毕其华[4]等研究结果表明，血清Hcy水平与糖尿病及其并发症有相关性。

本研究表明，糖尿病无并发症组Hcy的浓度平均值仍在正常范围但明显高于正常对照组，差异有显著性（P＜0.05），糖尿病微血管病变组Hcy浓度明显高于正常对照组，且其平均值高于正常值（P＜0.05）。与糖尿病无并发症组相比，糖尿病微血管病变组Hcy浓度明显高于糖尿病无并发症组（P＜0.05），其中糖尿病合并视网膜病变组及糖尿病合并肾病组Hcy浓度均明显高于糖尿病无并发症组，提示同型半胱氨酸与糖尿病有相关性，Hcy在糖尿病合并视网膜病变及糖尿病合并肾病的发生可能起一定作用。这与Passaro A[5]等研究结果相符，其通过比较2型糖尿病患者和正常人Hcy浓度，得出2型糖尿病患者Hcy浓度较正常对照者高，且与空腹血糖、HbAlc和糖尿病病程显著相关。陈玲[6]等通过比较糖尿病视网膜病变阳性、阴性组Hcy水平，发现糖尿病视网膜病变阳性组的Hcy值明显高于对照组。Ukinc K[7]等通过观察糖尿病患者的Hcy水平与微量蛋白尿的关系，也认为高Hcy血症与糖尿病肾病变关系密切。

[1] 何美霞，谭焱.2型糖尿病肾病患者血清同型半胱氨酸与尿白蛋白及胰岛素敏感性的关系[J].现代医院，2007，7（10）：27

[2] 毕其华，叶雄伟，胡勤辛，等.血清同型半胱氨酸与糖尿病及其并发症的关系[J].心脑血管病防治，2009，9（3）：208

[3] 陈玲，陆雷群，沈莹.高同型半胱氨酸血症是2型糖尿病微血管病变的危险因子[J].上海医学，2005，28（8）：653

[4] 高凌云，李福平.同型半胱氨酸与血管内皮损伤的研究进展[J].微循环杂志，2001，11（3）：39

[5] Passaro A，D Elia K，Pareschi P L ，et al.Factors influencing plasma homocysteine levels in type 2diabets[J].Diabets Care，2000，23（3）：420

[6] 陈玲，陆雷群，沈莹.高同型半胱氨酸血症是2型糖尿病微血管病变的危险因子[J].上海医学，2005，28（8）：653

[7] Ukinc K，Ersoz H O，Karahan C，et al.Methyltetrahydrofolate reductase C677Tgene mutation and hyperhomocysteinemia as a novel risk factor for diabetic nephropathy[J].Endocrine，2009，36（2）：255