左金丸和反左金丸中药药性－证候相关性初步研究＊

崔金刚 黄怡文 金若敏▲ 齐双岩▲ 姜 昕

上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院（上海200437）

中药药性理论是中药作用性质及特征的集中概况，中药的四性是指中药寒热温凉四种不同的药性，在人体中反映了影响其阴阳盛衰、寒热变化作用趋势，在实验中则以治疗不同证候的模型动物来反映和验证中药的药性，那么探求中药复方药性是否也有必要采用这样的方法进行呢？左金丸与反左金丸均由黄连、吴茱萸两味药组成，但两味药用量比例正好相反，影响了复方药物的药性——偏寒与偏热，本实验采用不同证候模型动物观察对小鼠产生的急性毒性及对大鼠胃粘膜损伤的作用，并进一步分析中药药性－证候的相关性。

1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物：KM小鼠，体重18～20g，SD大鼠，体重160～180g，均雌雄各半，清洁级，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物许可证SCXK（沪）2007～0005。饲养于上海中医药大学实验动物中心，实验期间自由饮水、摄食，室内温度控制在22～24℃、通风及湿度良好。

1.1.2 药材及其制备：黄连Coptis chinensis Franch，毛茛科植物，产地：四川，批号：HY10052101；吴茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth，芸 香 科 植 物，产 地：江 西，批 号：2010040345，药物均购于上海雷允上中原分店。

药物制备：左金丸（黄连∶吴茱萸＝6∶1），反左金丸（黄连∶吴茱萸＝1∶6）。取黄连及吴茱萸，水煎两次，每次先以武火煮沸，再以文火加热2h，过滤，合并两次药液，浓缩成1g生药/mL的溶液。置4℃冰箱保存备用。两种药物制备相同。

1.1.3 主要试剂：盐酸（F20061101），乙醚（20100419），75%乙 醇 （20110104），95% 乙 醇 （20100303），无 水 乙 醇（20100610），乌来糖（T20080530），甲醛 （20100304），二甲苯（20100304），均由中国医药集团上海化学试剂有限公司提供。

1.1.4 主要仪器：电子天平 ACS－6A（上海鹰牌衡器仪器有限公司），RM2235轮转式组织切片机（上海徕卡仪器有限公司），BX51/BX52型系统显微镜（日本Olympus光学株式会社）

1.1.5 统计学方法：应用SPSS13.0统计软件。计数资料采用卡方检验和Ridit法进行统计分析。P＜0.05为有显著性差异。

1.2 方 法 1.2.1 对不同证候模型小鼠急性毒性试验：取小鼠60只，雌雄各半，分为胃寒证模型或胃热证模型组，左金丸胃寒证或胃热证组，反左金丸胃寒证或胃热证组。参考文献[1]制备不同证候模型：胃寒证模型组小鼠灌服4℃冰水，胃热证模型组小鼠灌服8%辣椒煎液，均为10mL/kg，1d2次，连续灌服7d后，动物禁食不禁水12h，称重，灌服10mL/kg纯水1h后胃寒证模型组每只灌服3mol/L的NaOH液1.5mL或胃热证模型组每只灌服无水乙醇1mL。于1h后给药组小鼠按体重分别单次灌服左金丸或反左金丸40g生药/kg，模型组小鼠灌服等容量的纯水。严密观察给药或纯水后小鼠出现的各种急性毒性反应症状，如毛色、行为、分泌物、排泄物、动物异常反应的症状，以后连续观察7d，并记录动物死亡情况。

1.2.2 对不同证候模型大鼠胃组织病理形态学的影响：取大鼠62只，雌雄各半，分组同1.2.1。参考文献[1]分别制备不同证候模型：胃寒证模型组大鼠灌服4℃冰水，胃热证模型组大鼠灌服8%辣椒煎液，10mL/kg，1d2次，连续灌服7d后，动物禁食不禁水1d，称重，灌服10mL/kg纯水1h后胃寒证模型组每只灌服3mol/L的NaOH液1.5mL或胃热证模型组每只灌服无水乙醇1mL。于1h后给药组大鼠按体重分别单次灌服左金丸或反左金丸20g生药/kg，模型组灌服等容量的纯水；1h后大鼠腹腔注射25%乌来糖溶液麻醉，取胃组织置于10%中性福尔马林溶液中固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察胃粘膜的病理形态改变。评比标准参照文献[2]以胃粘膜出血、水肿损伤程度设定如下：±为少量损伤；＋为局部损伤；＋＋为较多损伤；＋＋＋为广泛损伤。

2 结 果 2.1 对不同证候模型小鼠急性毒性试验结果显示，胃寒证模型组小鼠表现为毛发竖立，懒动、饮少、大便稀溏、量多，尾部发紫；胃热证模型组小鼠表现为毛发松散，躁动、兴奋、脚张立、大便量少、便质干硬或颗粒状，尾部发紫。给予左金丸后，胃寒证模型与胃热证模型小鼠死亡率均为100%，与模型组比较有极显著性差异（P＜0.01）。给予反左金丸后，反左金丸胃寒证组小鼠死亡1只，与胃寒证模型组比较无显著性差异（P＞0.05）；反左金丸胃热证组小鼠死亡7只，与胃热证模型组比较有显著性差异（P＜0.05）；且反左金丸胃热证组小鼠死亡率高于反左金丸胃寒证组，两者比较，有极显著性差异（P＜0.01），结果见表1。

表1 左金丸与反左金丸对不同证候模型小鼠急性毒性的比较研究

2.2 对不同证候模型大鼠胃组织病理形态学的影响

2.2.1 对胃寒证模型大鼠胃组织病理形态学的影响 ：结果显示，光镜下可见胃寒证模型大鼠胃粘膜上皮细胞有不同程度的出血、变性、水肿甚或凝固性坏死，左金丸组大鼠未见对胃粘膜粘细胞有保护作用，反左金丸组部分动物胃粘膜上皮出现少量轻度出血、水肿，损伤程度明显减轻，与胃寒证模型组或与左金丸组比较均有显著性差异（P＜0.05）。结果见表2，图1。

表2 左金丸与反左金丸对胃寒证模型大鼠胃组织病理形态学的影响

图1 左金丸与反左金丸对胃寒证模型大鼠胃组织病理形态学的影响（HE染色，×100）

2.2.2 对胃热证模型大鼠胃组织病理形态学的影响：结果显示，光镜下可见胃热证模型大鼠胃粘膜上皮细胞有不同程度的出血、变性、水肿甚或凝固性坏死，反左金丸组大鼠未见对胃粘膜细胞有保护作用，左金丸组部分动物胃粘膜上皮细胞出现少量轻度出血、水肿，损伤程度明显减轻，胃热证模型组比较有显著性差异（P＜0.05），但与反左金丸组比较无差异（P＞0.05）。结果见表3，图2。

表3 左金丸与反左金丸对胃热证模型大鼠胃组织病理形态学的影响

图2 左金丸与反左金丸对胃热证模型大鼠胃组织病理形态学的影响（HE染色，×100）

3 讨 论 左金丸最早收录于《丹溪心法》，由黄连、吴茱萸按6∶1配比组成，功效：清肝泻火，降逆止呕。黄连苦寒，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，重用黄连清热燥湿，泻火解毒为君药。吴茱萸辛热，有小毒，归肝、脾、胃、肾经，少佐吴茱萸散寒止痛，疏肝下气，燥湿为佐使，二药一主一辅，一寒一热，相反相成，总方以偏寒性为主，主治肝火犯胃，症见嘈杂吞酸，脘痞嗳气，胃脘灼痛等症，是治疗消化系统证属肝气犯胃的要方之一。反左金丸是后世受左金丸启发而创制，由黄连、吴茱萸按1∶6组成，总方以偏热性为主，用于脘痞嘈杂泛酸，又呕吐清水，畏寒，舌苔白滑，偏于胃寒甚者[3]。左金丸和反左金均能治疗呕吐吞酸、嘈杂、胃脘痛等脾胃病症，药味相同，但由于配伍比例不同而引起的寒热偏性不同，其临床相对应的证候也不相同，是“方证相应”的典型例子。根据中医“寒者热之，热者寒之”的理论，只有辨明证候的寒热之性才能起到好的疗效。因此选择此二方作为验证寒热模型的研究药物。

中药药性理论是中药理论的核心之一，中医治病应根据中药药性遣药，若精当，用法准确，对疾病的良好预后起着至关重要的作用；反之，所用中药与疾病证候不符，就不仅达不到治疗目的，而且很有可能出现毒性作用。本实验采用左金丸与反左金丸分别灌服于胃寒证模型小鼠和胃热证模型小鼠，研究结果发现，给予左金丸后，胃寒证模型与胃热证模型小鼠死亡率均为100%，推测可能本次使用左金丸的剂量过大，未能显示出对两种证候模型动物死亡率不同，这有待进一步研究。给予偏热性的反左金丸后，反左金丸胃寒证组小鼠死亡率仅为10%，与模型组动物情况相近，而反左金丸胃热证组小鼠死亡死亡率为70%，且对胃热证模型组小鼠死亡率高于胃寒证模型组（P＜0.01），表明证候模型不同，药性会对小鼠产生的毒性程度不同，胃热证模型灌服热性药物后毒性增大，提示药性－证候－毒性之间存在一定的相关性。

陈艳芬等曾报道，左金丸和反左金丸对于寒、热胃粘膜损伤模型大鼠的保护作用有一定的选择性[4]。但是如果给予大剂量药物，是会出现保护作用还是不良反应呢？本研究结果表明，大剂量左金丸对胃热证模型大鼠的胃组织粘膜有一定的保护作用，但对胃粘膜损伤的胃寒证模型大鼠无明显影响；大剂量反左金丸对胃寒证模型大鼠的胃组织粘膜有一定的保护作用，但对胃粘膜损伤的胃热证模型大鼠也无明显影响；提示两药在该剂量时对胃寒证或胃热证胃溃疡模型并未显示出明显的毒性作用，对模型大鼠的胃组织粘膜的保护作用结果虽与文献报道相近，但本实验研究还发现反左金丸对胃寒证模型大鼠胃组织粘膜的保护作用强于左金丸（P＜0.05）。

4 结 论 本文研究表明复方中药的毒性或药效均可能与药物的药性－证候之间存在一定的相关性，进一步证明了中医理论中“疗寒以热药，疗热以寒药”的科学性，因此，正确地认识中药的药性对指导临床合理用药，不仅可以加强临床用药有效性，对临床用药的安全性也具有十分重要的意义。

[1]陈艳芬，陈蔚文，李茹柳.寒、热型胃黏膜损伤模型的对比和应用研究[J].广东药学院学报，2005，21（3）：290－294.

[2]陈艳芬，陈蔚文，李茹柳.大鼠寒热型胃粘膜损伤模型的研究[J].中药药理与临床，2002，18（2）：44－46.

[3]丁光迪.中药的配伍运用[M].北京：人民卫生出版社，1982：8.

[4]陈艳芬，陈蔚文，李茹柳，等.左金丸与反左金的药效学反应比较研究[J].中国中医基础医学杂志，2002，8（10）：67－69.