HIV感染者口腔念珠菌负荷及生物型研究

王立华

（华中科技大学同济医学院附属普爱医院 口腔科，湖北 武汉430030）

当前我国的艾滋病毒感染率较高，HIV感染首发症状是口咽部出现念珠菌。我国当前针对HIV有关的空腔念珠菌病方面的研究少，本次研究的目的是探讨HIV感染者口腔念珠菌负荷情况、生物分型及和临床口腔念珠菌临床表现间的关系。

1 资料和方法

1.1 研究对象

2007－2010年武汉市疾病预防控制中心确诊的64例HIV感染者为实验组，男性53例，女性11例，年龄为22－64岁，均龄36.1岁。对照组42例没有全身系统疾病，并且没有空腔黏膜疾病，男性31例，女性12例，年龄为20－56岁，均龄41.2岁。全部研究对象需签订同意书。排除标准：长期或者是2周内使用广谱抗生素、免疫抑制剂患者以及抗真菌类药物；义齿佩戴人员；患者有原发性系统性疾病；妊娠与不配合实验标本采集者。

1.2 试剂

米粉吐温－80琼脂培养基、沙保罗氏琼脂培养基、CHROMagar显色培养基，API 20CAUX酵母菌鉴定系统，质控菌株白色念珠菌ATCC 10231。

1.3 方法

根据Samaranayake等［1］使用漱口法对实验标本采集后，经离心、沉淀重悬后，对其分别接种在CHROMagar显色培养基、沙保罗氏培养基上，温度控制在37℃，经48h培养之后，对菌落进行观察并记录其菌落数、形态以及颜色等等，并继续开展厚壁孢子形成实验，采用API 20CAUX酶母菌鉴定系统对念珠菌生物型加以鉴定。所有的珠菌需要分2次来进行鉴定，由2位实验员记分，并进行核对。结果：按照全部记录数据检查bioMrieux数据库确定念珠菌生物类型。API 20CAUX系统和CHROMagar结果不一致的情况下，使用API 20C AUX结果作为标准，对菌种保存。白色念珠菌菌株ATCC 10231属于质控菌株，将灭菌PBS接种在培养基作为对照。

1.4 统计学方法

使用SPSS17.0统计软件对实验结果作统计学方面的处理。

2 结果

64例HIV感染者中，无任何主诉的患者为10例，有主观症状的患者为54例。临床表现：39例患者在经过临床诊治后确定是口腔念珠菌病（占60.9%），红斑型9例，口角炎症为11例。

64例HIV感染者内，52例（占81.3%）能够分离出念珠菌。42例对照组内，7例（16.6%）念珠菌阳性分离，对照组与实验组阳性分离差别具有统计学方面意义（P＜0.001）。结合口腔念珠菌负荷分析说明，在感染组内的32例念珠菌的负荷为大于5×105CFU／L，临床确诊是口腔念珠菌病，包括急性假膜型19例、口角炎型6例、红斑型7例。健康对照组的所有口腔念珠菌阳性分离唾液念珠菌负荷均小于5×105CFU／L，实验组和对照组间的差异具有统计学方面的意义（P＜0.001）。

52例HIV感染者的口腔念珠菌为阳性，单一菌株共分离出36例，2个菌株分离出13例，大于或者等于3个菌株分离出3例，一共分离出念珠菌74例。经过生物型鉴定之后，热带念珠菌为15株、光滑念珠菌为7株、白色念珠菌为39株、克柔式念珠菌为4株、法式念珠菌为2株、角膜假丝念珠菌1株、近平滑念珠菌1株、别的类型念珠菌为5株。13例患者口腔念珠菌出现但其并没有口腔念珠菌病HIV感染者内，口腔念珠菌为15株，分别是热带念珠菌2株、克柔氏念珠菌1株、白色念珠菌12株。7例对照组共检测口腔念珠菌7株，包含近平滑念珠菌1株、白色念珠菌5株、其他类型念珠菌1株。

3 讨论

经过本次研究发现，除了在临床上被诊断是口腔念珠菌病的HIV感染者以外，共有13例HIV感染者检测出念珠菌，致使实验组的念珠菌阳性分离率达81.3%，对照组念珠菌分离率增加比较明显。此外，本次实验采用的含漱浓缩培养法研究唾液内的念珠菌的符合情况，并且参照Silverman等［2］将5×105CFU／L作为临界参考值，这说明口腔念珠菌负荷大于5×105CFU／L时，患者都出现口腔念珠菌病表现，临床一般是急性假膜性念珠菌病，但慢性萎缩型的念珠菌也占有特定的比例。念珠菌阳性分离中的高负荷情况个体中，念珠菌型除了白色念珠菌、热带念珠菌之外，其他生物类型的也较为常见，说明HIV感染者外，唾液念珠菌分离株生物型有多样化的特点，与Sanchez－Vargar等［3］研究的结果相似，很可能与HIV感染后导致患者免疫力下降，其他的菌株导致疾病出现的风险加大有一定关系。本次研究表明，口腔念珠菌负荷增加和生物分型多样化，是使得感染者口腔微生物特点改变的原因之一，另外，口腔念珠菌也是HIV感染者和广大艾滋病患者早期症状。

［1］Samaranayake LP，MacFarlane TW，Lamey PJ，et al.Acomparison of oral rinse and imprint sampling techniques for the detection of yeast，coliform and Staphylococcus aureus carriage in the oral cavity［J］.J Oral Pathol，2001，15（7）：386.

［2］Silverman S Jr，Gallo JW，Mcknight ML.et al.Clinical characteristics and management responses in 85HIV－infected patients with oral candidiasis［J］.Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radjol Endod ，2005，83（4）：402.

［3］Sanchez－Vargas LO，Ortiz－Lopez NG，Villar M，et al.Point prevalence，micrvbiology and antifungal susceptibility pattems of oral Cundida isolutes colonizing or infecling Mexican HIV／AIDS patients and healthy persons［J］.Rev Lberoam Micol，2005，22（2）：83.