高效液相色谱法测定氨咖黄敏胶囊的含量

2011-03-06

中国药业 2011年4期

(亚宝药业太原制药有限公司，山西太原 030032)

氨咖黄敏胶囊是治疗感冒的非处方药，属于国家基本药物，国家标准采用滴定法检测其对乙酰氨基酚、咖啡因含量，操作烦琐，影响因素多。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法同时测定产品中2种组分的含量，方法简便、准确，现报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC-2010型高效液相色谱仪;岛津UV-2550型紫外可见分光光度计。对乙酰氨基酚对照品、咖啡因对照品(中国药品生物制品检定所，批号分别为100018-200408，171215-200406);氨咖黄敏胶囊(亚宝药业太原制药有限公司，批号为091109);甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:AgilentC18柱(250 mm ×4.6 mm，0.5 μm);流动相:1%醋酸溶液(用乙二胺调pH至3.7)-甲醇(60∶40);流速:1.0 mL/min;检测波长:272 nm[1-2];柱温:30℃。

2.2 溶液制备

分别精密称取对乙酰氨基酚对照品0.310 3 g、咖啡因对照品37.41 mg，分别置50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。再分别精密量取对乙酰氨基酚对照品贮备液2 mL、咖啡因对照品贮备液1 mL，置同一100 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取本品0.24 g，精密称定，置50 mL量瓶中，加流动相适量，振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2.0 mL，置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。按照处方比例制备不含对乙酰氨基酚、咖啡因的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制备，即得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验:分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定。结果阴性对照品溶液色谱中，在与对乙酰氨基酚、咖啡因色谱峰相同的保留时间处无干扰峰出现，说明处方中其他成分对测定结果无影响。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:分别精密量取对乙酰氨基酚对照品贮备液(含对乙酰氨基酚1.222 g/L)、咖啡因对照品贮备液(含咖啡因 74.82 μg/mL)1.0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0 mL，置同一100 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标进行线性回归，得回归方程，对乙酰氨基酚为 Y=1484746.01X-1091.71，r=1.0000;咖啡因为 Y=3564619.60 X-961.56，r=1.000 0。结果表明对乙酰氨基酚和咖啡因进样量分别在0.122 2～3.055 5 μg和 0.007 482 ～0.187 1 μg 范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验:取同一对照品溶液10 μL，连续进样5次，记录峰面积。结果对乙酰氨基酚和咖啡因 RSD分别为0.34%，0.20%(n=5)，表明进样精密度良好。

重复性试验:取同一批(批号为091109)样品6份，依法制备供试品溶液并测定。结果对乙酰氨基酚平均含量为160.85 mg/g(RSD=0.06%)，咖啡因平均含量为 9.499 mg/g(RSD=0.70%)，表明方法重复性良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别在 0，2，4，5，6 h 时测定峰面积。结果对乙酰氨基酚 RSD=0.24%(n=5)，咖啡因 RSD=0.09%(n=5)，表明供试品溶液在6 h内稳定性良好。

加样回收试验:分别精密称取已知含量的样品(批号为091109)0.120 g，共6份，精密称定，分别置50 mL量瓶中，再分别精密加入对照品溶液(含对乙酰氨基酚 40.54 μg/mL，咖啡因 2.368 μg/mL)0.8，1.0，1.2 mL，每个质量浓度 3 份，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定，结果见表1。