博落回口服液对仔猪大肠杆菌病腹泻的疗效研究

摘要以丰富的植物博落回为原料，提取其活性成分博落回生物碱后，通过改进生产工艺与添加助溶剂和稳定剂等制成博落回口服液，用以治疗仔猪大肠杆菌性腹泻。选择22～30日龄的梅山仔猪140头，随机分为5组，除健康对照组10头仔猪外，其他仔猪人工接种致病性大肠杆菌O149∶K88ac，20h后用药物博落回口服液实施治疗。药物试验组分为低、中、高剂量组各30头仔猪，分别按每头仔猪2.5、5.0、10.0mL的剂量灌服博落回口服液，药物对照组30头仔猪，用硫酸安普霉素可溶性粉溶于水中灌服，剂量为12.5mg/kg。感染对照组与健康对照组各10头仔猪，不用药。各组均1d给药2次，连用3d，于停药3d后统计疗效。结果表明：博落回口服液中剂量组和药物对照组的治愈率在90.0％以上，博落回口服液中、高剂量组的总有效率均为96.7％，高于药物对照组（93.3%），但差异不显著（P＞0.05）。急性毒性试验结果表明：博落回口服液对大鼠经口染毒LD50大于5g/kg，是非常安全的。试验结果表明：中、高剂量的博落回口服液对仔猪腹泻有较好疗效，通过改进生产工艺和添加助溶剂和稳定剂等在2年期内保持博落回口服液有效成分不变。

关键词博落回口服液；大肠杆菌病；仔猪腹泻；疗效观察

中图分类号S858.28"文献标识码A"文章编号0517-6611（2025）02-0090-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.02.020

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

ObservationontheCurativeEffectofMacleayacordataLiquidonColibacillosisDiarrheaofPiglets

YU Jian-sheng HU Mei-zhong ²

（1.TongrenVocationalandTechnicalCollege，Tongren，Guizhou554300;2.NationalLocalJointEngineeringResearchCenterfortheSeparationandPurificationTechnologyofNationalVeterinaryDrugs，Tongren，Guizhou554300）

AbstractWetakethelocalextremelyrichplantMacleayacordataastherawmaterial，extractitsactiveingredientMacleayacordata，andthenmakeMacleayacordataliquidtotreatpigletcoliformdiarrhea."140Meishanweanedpigletsaged22-30dayswererandomlydividedinto5groups.Except10pigletsinthehealthycontrolgroup，otherpigletswereartificiallyinoculatedwithpathogenicEscherichiacoliO149∶K88ac，andweretreatedwithdrugs20hourslater.""Intheexperiment，30pigletsinthelow，middleandhighdosegroupsweregivenMacleayacordataliquidatadoseof2.5，5.0and10.0mLforeachpiglet，and30pigletsinthedrugcontrolgroupweregivenMacleayacordataliquidatadoseof12.5mg/kgbodyweightdissolvedinwaterwithapramycinsulfatesolublepowder.10pigletsinthecontrolgroupwereinfectedwithoutdrugs.Eachgroupwasadministeredtwiceadayfor3consecutivedays，andtheefficacywascounted3daysafterdrugwithdrawal.Theresultsshowedthatthecurerateofthemiddledosagegroupandthedrugcontrolgroupwas90.0%，andthetotaleffectiverateofthemiddledosagegroupandthehighdosagegroupwas96.7%，higherthanthatofthedrugcontrolgroup（93.3%），butthedifferencewasnotsignificant（Pgt;0.05）.TheacutetoxicitytestshowedthattheoralLD50ofMacleayacordataliquidtoratswasgreaterthan5g/kg，whichisverysafe.TheresultsshowedthatthemediumandhighdosesofMacleayacordataliquidhadagoodeffectonpigletdiarrhea.

KeywordsMacleayacordataliquid;Colibacillosis;Pigletdiarrhea;Observationofcurativeeffect

仔猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一种急性败血性传染病，在我国各地猪场均有发生，是目前严重危害我国养猪业发展的主要传染病之一。在临床上可表现为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病3种类型^［1-3］。仔猪黄痢多见于1～7日龄仔猪发病，仔猪白痢多见于10～30日龄仔猪发病，仔猪水肿病多见于断奶仔猪，都具有较高的发病率和死亡率，特别是以仔猪黄痢严重。为了解决长期使用抗生素、化学合成药物对仔猪大肠杆菌病进行治疗带来的治疗效果降低，药物用量增大，产生耐药性，药物残留超标，影响人类大健康等诸多不良反应，笔者以当地极丰富的天然植物博落回为原料，提取其活性成分博落回生物碱并将其制成博落回口服液，用以治疗仔猪大肠杆菌性腹泻，寻求研发一种新的纯天然“替抗”产品用于防治仔猪大肠杆菌病。

博落回，又名号筒杆、山号筒、勃勒回、三钱三、山梧桐等，系罂粟科植物博落回［Macleaya cordata（Willd）R.B］的带根全草入药，广泛分布于长江流域以南各省，特别是云、贵、川较多见，在铜仁地区遍生于荒山野坡，随处可见，并可人工种植^［4-7］。博落回辛、苦、温，有大毒，有驱风解毒，散淤消肿及杀虫驱虫之功用。民间用其治疗痈肿疔毒，恶疮溃疡，烫伤顽癣、风湿痹症、跌打损伤、疥疮等体表疾患，因其大毒，不作内用。现代医学研究表明，博落回的有效药用成分为生物碱，也提取分离出血根碱（Sanguinarine）、白屈菜红碱（Chelerythrine）、博落回碱（Bocconoline）、原阿片碱（Protopine）、小檗碱（Berberine）等^［4-7］。

目前，博落回作为中兽药产品上市的有博落回注射液、博落回散。但博落回注射液使用要固定猪一头一头注射，不但工作量大，而且对猪的刺激性大；而散剂多为混饲给药，肠道吸收慢且不完全，通过混饲给药过程中又易存在拌料不均等问题。同时大多数仔猪在患大肠杆菌病后会出现食欲下降甚至食欲废绝而仅仅只饮水，导致仔猪采食药量不均或不能采食药量，很难发挥药物效果。因此，将其制成口服液饮水饲喂不但使用方便，且吸收快、生物利用度高。由于博落回提取物难溶于水，且水溶液不稳定，致口服液制取难度大，目前研究较少，也缺乏产品上市投入使用。为探讨博落回口服液稳定性，及其对仔猪大肠杆菌病腹泻的疗效，笔者以人工感染大肠杆菌仔猪为病理模型，用有效期2年的博落回口服液实施治疗。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验药物。

博落回口服液，由贵州铜仁职业技术学院民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心提供，主要成分为博落回提取物（生物碱），规格为100mL（100mL：500mg）/瓶，批号20180618。

硫酸安普霉素可溶性粉，由江苏农牧科技职业学院动物药学院提供，规格为1000g∶100g，批号：A201904006。

1.1.2标准菌种及诊断试剂。

猪大肠杆菌O149∶K88ac（以下简称E.coliK88菌株），大肠杆菌标准抗O型血清，均购自中国兽药监察所。

1.1.3接种菌液的配制。

E.coli K88ac菌株取回后在37 ℃迅速解冻，接种于普通肉汤培养基和琼脂板上，于37 ℃培养18 h，调整菌液，使细菌计数活菌数不少于5×108 个/mL，置于4 ℃冰箱保存备用^［1］。

1.1.4实验动物。

1.1.4.1临床实验动物。

兴化市裕顺牧业有限公司提供的22～30日龄体重相当的健康梅山仔猪140头，随机分为5组，药物试验组3组，每组30头，其他健康对照组和感染对照组各10头，未经猪大肠杆菌免疫，饲养条件一致。

1.1.4.2急性毒性实验动物。

清洁级健康Wistar大鼠20只，体重18～20g，雄、雌各半，由扬州大学比较医学中心提供，实验动物生产许可合格证号：SCXK（苏）2017—0007。

1.2试验方法

1.2.1临床试验分组及处理方法。

试验仔猪分组及处理情况见表1。

1.2.2人工感染。

除健康对照组外，其他每组每头仔猪分别内服配制好的E.coliK88菌液1mL（表1）。

1.2.3病因确定。

依据临床症状、病理剖检变化以及实验室检查对发病仔猪的病因进行确诊。

1.2.3.1分离培养。

采取发病仔猪粪便或剖检的仔猪小肠前段内容物，接种于麦康凯和鲜血琼脂平板上，37℃连续培养24h后观察结果。

1.2.3.2血清型鉴定。

大肠杆菌标准抗O型血清凝集试验按照使用说明书操作。

1.2.4治疗。

感染大肠杆菌约20 h后，各感染组陆续发病，病仔猪食欲不振，精神萎靡，排黄色或灰白色稀粪便，腹泻严重。按各试验组、对照组设计好的用药剂量、给药方法进行给药，所有仔猪连续用药3 d，停药后继续观察3 d。用药期间每天观察各组临床症状，做好记录，通过临床症状、病理剖检变化以及细菌培养鉴定等确定死因^{［ 8］}。

1.2.5疗效判定标准。

痊愈：治疗后症状消失，体温、食欲、运动、二便、精神活动等恢复正常^［5，9］。

有效：治疗后症状明显减轻，粪便、精神、饮食欲等均有好转，但在 1个疗程（3 d）内症状未全部消失，继续治疗可进一步好转、痊愈或使用其他药物辅助治愈^［5，9］。

无效：1个疗程（3 d）后症状无明显改变，出现大肠杆菌典型腹泻症状，或症状加剧甚至死亡，可判为无效或死亡^［5，9］。

1.2.6数据处理。

用SPSS18.0统计软件比较分析各组治愈率和总有效率的差异。

1.2.7急性毒性试验。

20只清洁级健康Wistar大鼠，雌、雄各半，分开饲养（每笼5只），禁食12 h后分别称重、编号、经口给药，按最大染毒剂量5 g/kg进行染毒，共灌服1次（约2 mL）。染毒结束后持续观察30 min，并分别于染毒后2 h和4 h各观察1次，之后每天观察1次。连续观察14 d。观察期间动物自由采食和饮水。观察期结束后处死所有存活大鼠，进行眼观病理学检查^［10］。

2结果与分析

2.1病因的确定

2.1.1临床表现。

药物试验组、药物对照组、感染对照组仔猪口服配制好的E.coliK88菌液1mL（细菌计数活菌数不少于5×108个/mL）约20h后发病，发病仔猪出现腹泻，排灰白色稀粪便，有的仔猪排黄色浆状粪便，部分仔猪粪便混有气泡，有腥臭味，发热，精神不振，食欲降低，病仔猪消痩有脱水现象。

2.1.2剖检变化。

剖检可见仔猪胃扩张，胃黏膜红肿有出血，肠壁薄，肠内充满气体，肠黏膜卡他性出血性炎症，少数有坏死溃疡斑点，其中以十二指肠最为严重。

2.1.3实验室诊断。

2.1.3.1分离培养及镜检。

待检菌在血琼脂平板上产生β溶血环；在麦康凯培养基上形成中等大小，圆形，表面光滑、湿润、边缘整齐的粉红色小菌落。挑取单个红色菌落涂片，革兰氏染色，镜检，可见两端钝圆的中等大肠杆菌，有时近似球形，单独散在，不形成长链条，革兰氏阴性。

2.1.3.2血清型鉴定。

血清型鉴定结果表明，该待检菌株为O149。

经以上试验证明，发病仔猪是由感染E.coliK88引起。

2.2治疗结果

人工感染大肠杆菌仔猪20h左右出现临床症状，对3个试验组和1个药物对照组按试验设计给药（表1），用药后第2～3天，4个给药组仔猪病情好转，腹泻次数减少，粪便颜色逐渐恢复正常，大部分仔猪食欲开始回升，精神状况好转，活动增加，病情逐渐痊愈。而感染对照组病情恶化，病情严重仔猪出现脱水死亡，死亡率20%，其他组无死亡。治疗结果见表2。

博落回口服液中剂量组和药物对照组的治愈率均为90.0％，博落回口服液高、中剂量组的总有效率均为96.7％，高于药物对照组，但二者间差异不显著（P＞0.05）。博落回口服液低剂量组的效果较差，治愈率为70.0％，总有效率为80.0％，两者均显著低于其余各组（P＜0.05）。结果表明，高、中剂量的博落回口服液对仔猪腹泻有较好疗效（表2）。

2.3急性毒性试验结果

大鼠经口染毒剂量达到5g/kg时，观察期内所有大鼠精神状况、活动、食欲等正常，无明显神经症状，外观无异常，至观察期结束时20只均存活（表3），且采食、饮水和排便等都正常，未发现中毒等不良反应。试验结束后剖检存活大鼠，眼观病理学检查均未发现明显可见的病理变化。结果表明，博落回口服液对大鼠的经口染毒LD50大于5g/kg。

3讨论与结论

通过上述试验证明，中剂量的博落回口服液对仔猪大肠杆菌感染的治愈率在90.0％，中、高剂量组总有效率均为96.7％，高于药物对照组，但差异不显著（P＞0.05），且治愈后不复发。该研究结果进一步证明了博落回口服液对仔猪大肠杆菌性腹泻的有效性优于硫酸安普霉素可溶性粉。笔者前期针对仔猪大肠杆菌感染引起自然发病的仔猪白痢开展了博落回注射液和博落回口服液对禽霍乱、仔猪白痢的对比治疗试验，证明博落回口服给药对某些消化道疾病的治疗效果等于或优于注射给药，且饮水给药操作简便，药物直接进入消化道，吸收更快、更完全，生物利用度高，呈现治疗效果也更好，在提取有效成分后制成口服液使用更能发挥出中草药治病作用的多效性、双向性、调节性的整体效应的特色优势^［5］。为了更进一步研究博落回口服液对仔猪大肠杆菌性腹泻的治疗效果，该试验对仔猪采取人工感染致病性大肠杆菌引起发病后使用博落回口服液进行临床治疗试验，其治疗结果再次证明博落回口服液对仔猪大肠杆菌性腹泻有较好的效果。

由于博落回辛、苦、温、有大毒，不作内用^［4］。该研究对博落回口服液开展了急性毒性试验，研究结果表明，博落回口服液对大鼠的经口染毒LD50大于5 g/kg，内服是十分安全的。这应与博落回口服液加工制作过程有关，在提纯博落回生物碱过程中一些不良有害成分被分离掉而去除其毒性。

该试验所用博落回口服液主要有效成分为博落回提取物（生物碱），由于博落回提取物难溶于水，且水容液质量不稳定，易水解失效，从而影响了博落回口服液的治疗效果。笔者通过改进博落回口服液生产工艺，增加助溶剂和稳定剂等，较好地解决了博落回提取物难溶于水和水溶液稳定性差的问题。通过以上试验表明，博落回口服液用于治疗仔猪大肠杆菌性腹泻的效果优于硫酸安普霉素可溶性粉，使用后是安全可靠的，可用于仔猪大肠杆菌性腹泻的治疗，能获得较好的治疗效果。

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