苦檀子药材及饮片质量标准研究

罗洪莲 万红才 段萍 徐作刚 刘晓艳 曾琦 谭敏

基金项目：贵州省食品药品监督管理局项目（ 贵州省中药材、民族药材及饮片质量标准增订；项目编号：DBXZYC52075） 。

作者简介：罗洪莲（1993—），女，布依族，本科，主管药师，研究方向为药品质量分析及药品质量标准研究。E-mail：1025072556@qq.com

通信作者：万红才（1977—），男，汉族，本科，副主任药师，研究方向为药品质量分析及药品质量标准研究。E-mail：397879050@qq.com

【摘  要】  目的：建立苦檀子药材及饮片的质量标准。方法：首先对多批次苦檀子药材及饮片进行性状描述，横截面、粉末显微鉴别，而后以大豆苷元和鱼藤酮为指标对该药材及饮片进行薄层色谱鉴别（TLC），最后测定该药材及饮片的水分、灰分和浸出物。结果：苦檀子药材及饮片的性状和显微特征明显，TLC主斑点清晰，分离度符合要求，可用于鉴别该药材；拟定了苦檀子药材及饮片水分、总灰分、浸出物限量分别为13.0%、3.0%、22.0%。结论：该方法准确可靠，可用于苦檀子药材与饮片的质量控制。

【关键词】  苦檀子；质量标准；薄层色谱法（TLC）；大豆苷元；鱼藤酮

【中图分类号】R282    【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2023）20-0024-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.20.zgmzmjyyzz202320007

Study on Quality Standard of Millettia pachycarpa Benth Seed Medicinal Materials and Decoction Pieces

LUO Honglian  WAN Hongcai*  DUAN Ping  XU Zuogang  LIU Xiaoyan  ZENG Qi  TAN Ming

Qiannan Inspection and Testing Institute， Duyun 558000，China

Abstract：Objective To establish the quality standard of Millettia pachycarpa Benth Seed medicinal materials and its decoction pieces. Methods Firstly properties identification and microscopic identification of the medicinal materials and its decoction pieces were carried out. Then the daidzein and rotenone components were identified by TLC. Finally the moisture， total ash and extract were determined. Results The characters and microscopic characteristics were determined. The TLC spots were clear and the resolution was good， so the TLC can be used to identify the medicine. It is suggested the moisture limit is less than or equal to 13.0%， the total ash limit is less than or equal to 3.0%，the limit of extract is greater than or equal to 22.0%.Conclusion The method is accurate and reliable and can be used to control the quality of Millettia pachycarpa Benth Seed medicinal materials and its decoction pieces.

Keywords：Millettia pachycarpa Benth Seed; Quality Standards; Thin Layer Chromatography（TLC）; Daidzein; Rotenone

苦檀子為豆科植物厚果崖豆藤（Millettia pachycarpa Benth.）的干燥成熟种子，冬季采收，除去果皮后晒干的种子，又名土大风子、冲天子、苦蚕子、猪腰子、日头鸡，为民间常用中药材。苦檀子具有攻毒止痛，消积杀虫，散瘀消肿之功效，常用于疥癣疮癞，痧气腹痛，小儿疳积疼痛，外用治踢打损伤，骨折等［1-4］。经查阅文献，了解到目前国内外对苦檀子研究甚少，需建立新的质量标准对该药材及饮片进行质量把控。研究结合《中国药典》2020年版四部通则的方法，通过观察不同批次该药材及饮片外观性状，药材的切片、粉末显微图片并总结其共性；以大豆苷元和鱼藤酮为对照品对该药材及饮片进行薄层色谱鉴别；测定该药材不同批次的水分、总灰分、浸出物含量测定等项目并制定合理的限度，最后建立苦檀子药材及饮片的质量标准，使该中药材的质量得到有效控制，以保证其药用安全性、有效性及可靠性，也为该中药材的下一步其他研究奠定基础。

1  仪器与材料

DM-2500型生物显微镜（Leica），Las-v3.8型显微照相系统（Leica），XSE105DU型十万分之一电子天平（Mettler Toledo），SK250LHC型超声波清洗器（上海科导），DZF6050型真空干燥箱（上海一恒），SRJX-3-9型马弗炉（上海实验），聚酰胺薄膜（浙江台州市路桥四甲生化塑料厂），大豆苷元对照品（批号：111502-202003，纯度：99.3%，中国食品药品检定研究院），鱼藤酮对照品（批号：G451914，纯度：99.3%，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH），其余试剂均为分析纯，苦檀子药材及饮片样品信息见表1，其原植物及供试品样本均送由贵州中医药大学药学院植物标本鉴定馆魏升华教授鉴定为豆科植物厚果崖豆藤（Millettia pachycarpa Benth.） 及其种子（饮片为本研究组自制）。

2  方法与结果

2.1  性状  本品扁圆略呈肾形或棋子形，长约4 cm，厚约3 cm，表面呈红棕色至黑褐色，有光泽，或带有灰白色的薄膜，有横向裂纹分布，脐点位于中腰凹陷处，子叶2片，肥厚，角质样，易纵裂；近脐点周围有不规则的突起，使子葉纵裂而不平。气微，味淡而后带有窜透性的麻感［3-4］。

2.2  鉴别

2.2.1  显微鉴别  将各批次苦檀子药材及饮片样品横切面和粉末制片，在显微镜下观察，总结出以下显微鉴别特征：本品横切面表皮为1列栅状细胞，外被角质层；营养层由多列切向延长的薄壁细胞组成，内侧细胞呈颓废状；子叶细胞含众多淀粉粒；分泌腔多见，其四周由一层内含棕黄色分泌物的薄壁细胞组成；偶见成束存在的螺纹导管。本品粉末浅黄色至棕黄色，子叶细胞中充满圆形或类圆形淀粉粒；淀粉粒众多，呈圆形、类圆形、盔帽形或不规则形，直径6～105 μm，多为单粒，复粒少见，脐点明显，脐点点状、裂缝状或人字状，有的辐射状开裂，层纹不明显；种皮栅状细胞1列，狭长，稍不平整；偶见黄色至棕黄色色素块；导管多为螺纹，直径10～35 μm。主要的显微特征如图2。

2.2.2  薄层色谱鉴别    取苦檀子药材或饮片粉末约5 g，加石油醚（30～60 ℃）30 mL振荡30 min，离心，除去上清液后挥干。称取脱脂后的苦檀子粉末2.0 g，加甲醇10 mL超声20 min，滤过，取续滤液作为供试品溶液；取大豆苷元对照品和鱼藤酮对照品加甲醇制成浓度分别约为0.5 mg/mL的两种对照品溶液作为对照溶液；照薄层色谱法（中国药典2020年版四部通则0502）［5］试验，吸取上述两种对照品溶液及供试品溶液各1 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以冰乙酸-水（3∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与大豆苷元、鱼藤酮对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，如图3、图4。

2.3  检查  照水分测定法（中国药典2020年版四部通则0832，第二法）［6］和灰分测定法（中国药典2020年版四部通则2302）［7］对以上苦檀子药材及饮片各10批次进行测定，结果见表2。10 批槐枝苦檀子药材样品的水分为7.7%～13.9%，均值10.5%；总灰分为1.7%～3.0%，均值2.2%。10批苦檀子饮片的水分为7.5%～13.7%，均值10.3%；总灰分为1.7%～2.9%，均值2.1%。

2.4  浸出物  取样品粉末，分别以水、60%乙醇溶液、70%乙醇溶液、稀乙醇溶液作为浸出介质，考察冷浸、热浸两种浸出方式，以对浸出介质和提取方式进行优选。热浸法的浸出物含量普遍较冷浸法高，样品在各介质中经热浸提取后的浸出物含量无显著差异，但浸出介质为水或60%乙醇溶液时，不易滤过或滤过时间过长，导致浸出物稳定性差，故采用70%乙醇溶液作为浸出介质的热浸法测定。称取苦檀子药材及饮片粉末样品约0.3 g，照浸出物测定法（中国药典2020年版四部通则2201） ［8］测定浸出物含量，测定结果见表2。10批苦檀子药材及饮片浸出物结果分别在22.5%～30.8%、22.6%～30.9%，均值分别为27.2%、27.4%。

3  讨论

显微鉴别可快速、经济、准确地区分大豆类药材，对于苦檀子的鉴定具有一定的借鉴意义，《中国药典》中显微鉴别法系指用显微镜对药材（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。实验采用苦檀子切片和粉末制片，通过直接观察法和滴加甘油醋酸试液、碘试液、水合氯醛试液等方法观察并总结出以上显微特征，具体操作方法简单、便捷，可有效辨别苦檀子药材及饮片的真伪。

在薄层色谱鉴别法的研究中，经查阅文献了解到苦檀子含较多的黄酮类化合物［2］，其中大豆苷元为主要化学成分，现代药理学研究表明，大豆苷元具有预防心血管类疾病［9-10］，预防骨质疏松［11-12］，抗肿瘤［13］和保护神经［14］等作用，鱼藤酮则为苦檀子标志性成分，故选此两种物质为薄层色谱鉴别指标；针对供试品溶液的制备，本实验小组先用石油醚（30～60 ℃）对样品粉末进行脱脂，此步骤可有效去除部分背景干扰，然后对供试品溶液的提取溶剂（甲醇、60%甲醇、60%乙醇）提取方式（水浴回流、超声）、提取时长（10 min、20 min、30 min）进行了考察，最终采取了背景干扰较小，有效省时的超声提取20 min的方法；然后考察了层析板的选择，展开剂的选择及优化，显色剂的选择等，最终确定了上述薄层鉴别方法。本研究还按照国家药典委员会“中药分析方法验证指导原则实施细则”的相关要求，对上述薄层分析方法进行了温度、湿度及不同厂家薄层板三方面的耐用性考察，实验表明，该方法在低温（4 ℃）、室温（24 ℃）、高温（40 ℃）、低湿度（25%）、中等湿度（50%）高湿度（75%）条件下及选用了浙江台州市路桥四甲生化塑料厂（生产日期：2022年3月14日）及青岛邦凯高新技术材料有限公司（批号：2109023G）两个厂家的聚酰胺薄膜，其斑点均清晰明了，分离度较好，表明该方法耐用性好，专属性强。水分和总灰分是控制中药材及其炮制品质量的基本指标，制定合理的水分限度可保障药材饮片在存放期间不易发霉变质，合理的总灰分限度则是控制药材饮片纯净度的有效方法。由于国内外对苦檀子药材及饮片研究甚少，有效成分尚不清楚，无法建立准确有效的含量测定方法，故选用浸出物测定这一综合性指标来控制药品质量。

根据以上测定结果及《中国药典》2020版四部中药质量标准指导原则（制定限度范围可用测定平均值的80%～120%），建议苦檀子药材及饮片的水分限度不超过13.0%，总灰分限度不超过3.0%，水溶性浸出物限度不得少于22.0%。

综上，研究确定了苦檀子药材及饮片的性状，显微鉴别特征，建立了薄层色谱鉴别法，并对水分、总灰分及浸出物做出合理的限度规定，形成了一个较为完整的质量评价体系，为贵州省地方标准的制定提供了参考依据。

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（收稿日期：2023-02-02  編辑：刘  斌）