基于生物信息学技术分析哮喘的差异基因、免疫细胞浸润及中药预测*

宋金香，张念志

1 安徽中医药大学 安徽合肥 230038

2 安徽中医药大学第一附属医院 安徽合肥 230031

支气管哮喘，简称哮喘，是受基因和环境影响的一种呼吸系统常见疾病，也是世界上最常见的慢性病之一。2015 年全球哮喘发病率为16.4%，患病人数约有3.58 亿[1]。中国20 岁以上总患病率为4.2%，患病总人数超过4500 万，由于快速变化的环境、生活方式、人口老龄化等因素，哮喘患病率正在逐渐年上升[2]。而这种慢性疾病经过治疗的症状控制情况，据2017年的一项研究表明，我国城区哮喘总体控制率仅为28.50%[3]。中医学关于哮喘的记载从秦汉《黄帝内经》开始，历朝历代，诸多名医从发病特点、病因病机及治疗等方面对哮喘进行了描述和研究，历史悠久，疗效确切，著作颇丰。现代亦有诸多研究表明，以单一西药治疗作为对照，中西医结合治疗可以进一步加快减轻症状，增强体质、减少复发，提高患者的躯体功能、心理功能和社会功能评分和生活质量[4]。并且通过每次复诊对患者药物的调整和了解患者用药情况，长期持续的关注患者的病情，及时调整用药，在减少激素等西药药量的同时，改善患者情绪，保证药物治疗效果，提高患者依从性大有裨益。可见，中医药治疗哮喘大有可为之处。

随着基因芯片技术的发展，在研究疾病的分子机制、辅助疾病诊断和治疗、筛选开发药物等方面发挥重要作用。本研究借助生物信息学技术分析哮喘差异基因及免疫细胞浸润水平，进一步探讨哮喘发病机制、治疗靶点和生物标志物，并且借助数据库筛选相关治疗中药，为临床用药提供新思路，也为中药治疗哮喘提供理论依据。

资料与方法

1 数据提取

从GEO 数 据 库（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）以“asthma”为关键词检索哮喘相关的基因芯片数据集，并对数据集进行筛选，获得编号为GSE179156 中基因的表达谱数据，该数据集是由O’Beirne SL、 Salit J、Kaner RJ、Crystal RG 等研究者于2021 年7 月21 日上传至GEO 数据库，数据集包括29 个健康者样本、57 个哮喘患者样本，借助GPL570平台，以芯片测序方法获得基因表达谱数据，所有数据均可在线下载。

2 差异基因

GEO2R 是GEO 数据库自带的基于R 语言对基因芯片表达数据进行差异分析的在线程序，可以获得健康者和哮喘患者之间的差异基因。基于R boxplot算法生成箱型图，查看所选样本的值分布，明确样本是否适合做差异分析。获得差异基因后，以条件P 值（P-value）＜0.05，|log2 fold change（log2 FC）|≥1 作为显著差异基因的筛选标准，log2 FC 值正数代表上调、负数代表下调，后对显著差异基因进行数据处理，借助平台注释文件，即GPL570 平台文件，匹配探针的基因名称（gene symbol），删除未匹配到基因名称的探针，对匹配相同基因名称的探针取均值处理，最终显著差异基因结果以火山图展示。借助基因表达谱数据对显著差异基因的表达量数据进行标准化处理，结果以热图展示。

3 富集分析及核心基因

将显著差异基因导入Metascape 数据库（https：//metascape.org/）进行基因本体论（GO）的功能注释富集分析，包括生物进程（BP）、分子功能（MF）、细胞组分（CC）三个部分，以及京都基因和基因组百科全书（KEGG）的通路富集分析，以明确基因的功能及相关通路。借助STRING 数据库（https：//cn.string-db.org/）获得显著差异基因蛋白质相互作用网络，选取置信度＞0.4 的基因导入Cytoscape 软件进行可视化，借助软件内置cytobubba、centisacpe 和MCODE 插件，筛选前10 位显著差异基因作为核心基因，三个结果取并集。

4 免疫浸润分析

CIBERSORT 是基于线性支持向量回归原理推断22 种免疫细胞在基因表达谱数据的含量、比例。借助在线数据平台Sangerbox（http：//sangerbox.com/）中CIBERSORT 反卷积法对 GSE179156 表达谱数据分析22 种免疫细胞浸润组成分析，结果以P＜ 0.05 筛选可信样本。使用Wilcox 检验分析哮喘患者组与健康者组免疫细胞差异性。使用Pearson 相关系数计算，分析免疫细胞间相关性。结果借助Sangerbox 绘图工具进行可视化。

5 中药预测

Coremine Medical 数 据 库（https：//coremine.com/medical/）是由PubGene 公司及其合作者通过文本挖掘，进行聚类，以网络的形式表现各种生物医学术语之间的关系，生物医学术语包括疾病，包括医学主题标题，疾病、中药、基因、症状、生物过程、分子功能、化学以及基因和蛋白质术语等方面。通过核心基因和Coremine Medical 数据库相互映射，以P＜0.05 为条件筛选，与核心基因相关的中药，根据2020 年版《中华人民共和国药典》，规范中药名称、功效、性味、归经等，对预测的中药进行分析。

结 果

1 显著差异基因

对在GEO 数据库中，对GSE179156 数据集的基因表达谱数据进行GEO2R 分析，借助箱式图对表达谱数据初步评估，结果见图1，可见各样本基因表达数据的中位数、上限值、下限值差异不大，具有良好的可比性。以条件：P 值 （P-value）＜0.05，|log2 fold change（log2 FC）|≥1 获得显著差异基因，获得上调基因128 个，下调基因92 个，并以火山图和热图可视化，见图2、图3。

图1 GSE179156 表达谱数据质量分析图

图2 显著差异基因火山图

图3 显著差异基因聚类热图

2 差异基因富集分析

借助Metascape 数据库对差异基因进行富集分析，以P Value＜0.05 为阈值，获得显著富集排名前20的结果，如图4 所示。富集分析结果在相关的生物进程包括：内肽酶活性的负调节、肽酶活性的负调节、水解酶活性的负调节、蛋白水解的负调节、内肽酶活性的调节、肽酶活性的调节、催化活性的负调节、炎性反应、白细胞活化、细胞活化、骨髓细胞分化的积极调节、管状体发生、蛋白水解的调节、骨髓细胞分化的调节、调节骨髓白细胞分化、对MAPK 级联反应的阳性调节、生殖结构发育、白细胞分化、单核细胞分化的积极调节、生殖系统发育等；参与的信号通路有造血细胞谱系、可卡因成瘾、酒精中毒、唾液分泌、IL-17 信号通路、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用、细胞因子-细胞因子受体相互作用、阿米巴病、Ras 信号通路、MAPK 信号通路、补体和凝血级联、神经活性配体-受体相互作用、精氨酸和脯氨酸代谢等。

图4 GO 和KEGG 富集分析（注：A：GO-BP 分析；B：GO-MF 分析；C：GO-CC 分析；D：KEGG 分析）

3 核心基因与信号通路

借助Cytoscape 软件对显著差异基因进行PPI分析，首先从STRING 数据库以combined score＞0.4为条件筛选，导入Cytoscape 软件后，借助内置工具cytobubba、centisacpe 和MCODE 模块分析，cytohubba按照MCC 算法，选择前10 位核心基因，结果如下：CD44、KIT、ESR1、CDH2、BDNF、AHSG、NTRK1、ITIH4、C3、GATA2；centisacpe 按照度值排序，选择前10 位结果，如下：CD44、KIT、ESR1、BDNF、AHSG、LTF、C3、CDH2、CPA3、MUC5AC；MCODE 共筛选到6 个功能模块，分值最高的模块，由9 个核心基因组成，包括FETUB、ITIH4、BDNF、CDH2、GSN、AHSG、GIG25、NTRK2、C3。将三种方法所取结果取并集，共获得核心基因17 个，其中上调基因11 个，FETUB、BDNF、GSN、AHSG、NTRK2、CD44、KIT、CPA3、MUC5AC、NTRK1、GATA2，下调基因6 个，C3、ESR1、LTF、ITIH4、CDH2、GIG25。将核心基因和信号通路的关系可视化，见图5，如图中所示，核心基因中可能与哮喘关系更为密切的有NTRK1、NTRK2、BDNF、KIT、KIT、C3、CD44，与核心基因关系密切的通路为RAS 信号通路、MAPK 信号通路。

图5 核心基因与KEGG 富集通路图

4 免疫浸润分析

在 CIBERSORT 反卷积法分析哮喘患者组与健康者组免疫细胞浸润水平，以P＜ 0.05 筛选后，最终获取64 个可信样本。如图6 所示，哮喘患者组的未活化的CD4+T 记忆性细胞（T cells CD4 memory resting）、γδT 细胞（gamma delta T cell）、未活化的肥大细胞（mast_cells_resting ）、活化的树突状细胞（dendritic cells activated）高于健康者组，健康者组的CD8+T 细胞（T cells CD8）、M2 巨 噬 细 胞（macrophages M2）、活化的肥大细胞（mast_cells_activated）、中性粒细胞（Neutrophils）高于哮喘患者组。各样本具体免疫浸润比例见图7。左侧16 个健康者样本，右侧48 个为哮喘患者样本。对两组免疫细胞浸润水平进行pearson 相关系数分析，结果见图8。Pearson 相关系数计算发现活化的CD4+T 记忆性细胞（T cells CD4 memory activated）和M1 巨噬细胞（macrophages M1）有较强的正相关性（r=0.62），未活化的肥大细胞和活化的肥大细胞（mast cells activated）有较强的负相关性（r=-0.69）。

图6 哮喘患者组（A）与健康者组（NA）间的免疫浸润差异分析差异箱线+散点图

图7 哮喘患者与健康者样本中免疫相关细胞的浸润组成及比例

图8 免疫细胞间的相关性分析热图

5 中药预测及分析

借助Coremine Medical 数据库，映射核心基因相关中药，以P 值＜0.05 作为有显著意义，对中药进行筛选，通过查阅《中华人民共和国药典》2020 年版，规范中药名称，归纳中药的性味、归经、功效等，结果如图9所示，可见与支气管哮喘相关中药多归肝、肺、心、脾等经，性味多选苦、甘、辛之品，寒温均用。将核心基因与对应的中药导入Cytoscape 软件进行可视化，如图7，该网络图中有199 个节点，284 条边。该网络图中人参、淫羊藿、栀子、三七、山茱萸、甘草、何首乌、丹参、五味子、西洋参、水牛角、山药、黄芩、郁金、姜黄、穿山龙、莪术等中药的度值≥3，提示此17 味中药可能在哮喘治疗中发挥重要作用。

图9 中药归经、性味雷达图

图10 中药—核心基因网络图

讨 论

1 核心基因

本研究基于GEO 数据库的GSE179156 数据集，发现以下基因在哮喘患者和健康者样本中的表达具有显著差异：FETUB、BDNF、GSN、AHSG、NTRK2、CD44、KIT、CPA3、MUC5AC、NTRK1、GATA2、C3、ESR1、LTF、ITIH4、CDH2、GIG25。目前普遍认为哮喘发生发展与气道慢性炎症、气道高反应性、免疫失衡、气道神经调节失常、遗传机制等有关。BDNF 名为脑源性神经营养因子，在外周和中枢神经系统中各种神经元的发育，存活和功能中起着至关重要的作用。聂颖等研究发现，BNDF 亦可能影响哮喘气道炎症的发生发展，具体可能通过上调IL-17A 的分泌，诱导相关炎性因子Eotaxin 的表达，使嗜酸性粒细胞活化、聚集[5]。KIT，又称受体酪氨酸激酶、KIT 原癌基因、c-kit，可以作为 KITLG/SCF 的细胞表面受体，参与PIK3-akt、MAPK、ERK 等信号通路，激活STAT 家族，在调节细胞存活和增殖、造血、干细胞维持、配子发生、肥大细胞发育、迁移和功能以及黑色素生成方面起着至关重要的作用。陈晖等通过动物实验，发现抑制KIT与细胞因子的结合，可以抑制PI3K/Akt/NF-κB 的激活，以及影响MUC5AC 表达，减轻哮喘小鼠的炎症和气道黏液分泌[6]。CD44 是一种细胞表面受体，通过细胞外基质成分在细胞-细胞之间作用，影响细胞粘附和迁移，参与T 淋巴细胞的激活、再循环和归巢、造血、炎症和对细菌感染的反应等细胞功能，也可作为信号转导的平台[7]。目前多认为作为一种黏附分子，在肿瘤细胞侵袭转移中起促进作用。有研究表明该基因在哮喘的气道炎症、气道高反应及气道重塑过程中均发挥作用，李婷通过动物实验证明在慢性哮喘致使气道平滑肌细胞分泌透明质酸升高，致使作为受体的CD44 升高，透明质酸和CD44 通过ERK1/2 信号转导通路促进气道平滑肌细胞的异常增殖，从而参与慢性哮喘气道重塑过程[8]。MUC5AC 和呼吸道上皮凝胶形成的糖蛋白有关，参与哮喘气道粘液高分泌，可导致哮喘急性加重，有临床研究表明，哮喘患者观察组诱导痰中MUC5AC 表达明显高于健康对照组，并且和哮喘分级严重程度相关，治疗后表达量明显减低[9]。目前中药单体或成分及中药复方在降低哮喘患者MUC5AC 表达量具有肯定效果[10]。

以下基因关于哮喘的研究较少，可能作为辅助诊断哮喘和评估病情的生物标志物。FETUB（胎球蛋白B），主要由肝脏分泌一种血浆蛋白，现代研究认为与代谢、心血管疾病、肿瘤、生殖等方面相关，在呼吸道疾病中，有临床研究表明FETUB 在COPD 患者中的表达量高于对照组，通过分析可以预测COPD 急性发作，可能对疾病进展有预测作用，通过随访患者的肺功能、胸部CT，FETUB 可以反映肺功能或气道受限、肺气肿的严重程度[11]。C3，补体C3，是一种蛋白质编码基因，在补体系统激活引发免疫失衡中起着核心作用，主要有微生物裂解，促进吞噬作用，引发炎症和免疫清除。卢洪华在研究用于儿童哮喘稳定期病情及预后评估的生物靶标研究时发现，C3 表达在对照组高于哮喘组，可以辅助诊断哮喘，但目前相关研究较少[12]。

自奥马珠单抗作为哮喘的靶向药物上市以来，诸多研究围绕哮喘的精准、个体化治疗研发新药，同时探寻诸多生物标志物进一步评估哮喘病情、预后等，如呼出性一氧化氮、嗜酸性粒细胞、编码POSTN 基因编码的骨膜蛋白、IL-4、IL-6、IL-8、IL-17、TGF-β2、TNF-α、HMGB1、Eotaxin、YKL-40 等[13]。因此，本次研究所得核心基因，可以作为哮喘治疗的潜在靶标或生物标志物。

2 哮喘相关信号通路

差异基因借助Metascape 数据库经过富集分析获得13 条相关信号通路，经过查阅文献，和哮喘密切相关的有IL-17 信号通路、Ras 信号通路、MAPK 信号通路，筛选所得核心基因多位于RAS 信号通路、MAPK信号通路上。RAS 信号通路的核心是RAS 蛋白，位于细胞膜内侧，它在传递细胞生长分化信号方面起重要作用，通过影响ERK、PI3K-AKT、Rho-Rac、JNKSAPK 等信号通路，在调节细胞增殖、存活、生长、迁移、分化或细胞骨架活力方面发挥重要作用，见图11。有研究表明，RAS 蛋白作为生物标志物用于癌症诊断、评估病情、判断预后及研发抑制剂抑制通路激活，治疗癌症[14]。手冢俊文等发现RAS 信号通路在 IL-33 诱导的 ILC2s 激活过敏性哮喘的气道重塑中起重要作用，RAS 抑制剂可以改善小鼠的过敏性气道炎症，并且与氟替卡松联合时，在改善嗜酸性粒细胞炎症的同时，进一步改善了支气管上皮下厚度，影响过敏性哮喘的气道重塑，可能具有治疗难治性哮喘的潜力[15]。MAPK 信号通路是一个三级信号传递通路，通过MAPK，MAPK 激酶（MEK 或MKK）以及MAPK 激酶的激酶（MEKK 或MKKK），这三种激酶能依次激活，共同调节着细胞的生长、分化、应激、炎性反应等多种重要的生理、病理效应。见图12。MAPK 信号通路和哮喘密切相关，齐莎莎等研究发现，哮喘幼鼠的p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2 升高，使用p38 MAPK 通路激活剂后，上述指标可升高，肺泡灌洗液中炎症相关指标IL-1β、TNF-α 升高，气道重塑相关指标管壁厚度/外径、管壁面积/气管总面积升高，两种指标变化与的p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2 变化一致，可见MAPK 信号通路在哮喘的气道炎症和气道重塑中发挥作用[16]。

图11 RAS 信号通路图

图12 MAPK 信号通路图

3 免疫细胞浸润分析

免疫失衡是哮喘重要的发病机制之一，大致过程为过敏原刺激后，活化树突状细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞给T 淋巴细胞，引发Th1/Th2 细胞、Th17/Treg 细胞等免疫失衡。Th1/Th2 失衡表现为向Th2 倾斜，主要表现为Th2 分泌的IL-4、IL-6、IL-13 等炎性因子增多，促进气道炎症、升高嗜酸性粒细胞趋化因子水平、增加IgE 生成进一步活化肥大细胞，致使其产生的组胺、5-羟色胺、IL-33、白三烯、前列腺素等介质，影响哮喘的气道炎症和重塑[17]。Th17、Treg 细胞均来源于辅助性T 细胞，Th17/Treg 失衡表现为向Th17 倾斜，Th17 细胞可分泌IL-17、IL-23 等炎性因子，加重哮喘的气道炎症和气道高反应，Treg 细胞分泌具有拮抗作用的IL-10，并减少Th17 细胞的转化[18]。此次对哮喘患者和健康者免疫浸润的分析，结果显示γδT 细胞、树突状细胞在哮喘患者中比例较高，有临床研究表明相对于正常组，哮喘小鼠γδT 细胞表面的TLR3 受体表达增加，提示γδT 细胞活化增多[19]。树突状细胞主要促进Th2 反应影响哮喘的发病机制，那么能够诱导免疫耐受的树突状细胞群定义为耐受性树突状细胞，可以降低辅助T 细胞激活的因子表达、促进T 细胞凋亡、诱导eg 细胞生成、增加IL-10 水平等作用，起到治疗哮喘的作用[20]。而结果所得健康者组活化的肥大细胞表达更高，可能因数据样本量较少，存在误差，与实际有所不同。对差异基因进行生物进程富集分析结果显示，哮喘的差异基因和多种酶反应相关，研究表明有一类肥大细胞可以分泌类胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧肽酶和组织蛋白酶等，可以破坏气道屏障、影响炎性因子IL-33、收缩气管、促进气道重塑等作用影响哮喘发生发展[21]。在免疫细胞间相关性分析中，活化的CD4+T 记忆性细胞、M1 巨噬细胞在哮喘免疫失衡中发挥协同作用，未活化的肥大细胞、活化的肥大细胞发挥拮抗作用。

4 治疗哮喘的潜在中药

本次研究所得哮喘相关的潜在中药，如下：人参、淫羊藿、栀子、三七、山茱萸、甘草、何首乌、丹参、五味子、西洋参、水牛角、山药、黄芩、郁金、姜黄、穿山龙、莪术。其中人参、淫羊藿、甘草、何首乌、西洋参、山药为补虚药，栀子、黄芩、水牛角为清热药，丹参、郁金、姜黄、穿山龙、莪术、三七具有活血化瘀功效，山茱萸既可补益肝肾，又可收涩固脱，五味子敛肺固脱。哮喘治疗遵循“未发以扶正气为主，既发以攻邪气为急”；痰又为哮喘“夙根”，用药需兼顾化痰；哮喘多反复发作，久病必瘀，活血化瘀类药物必不可少。因此，这17 味中药，补虚者可酌情选用于哮喘缓解期扶正气为用，活血化瘀者可选用于病程较长，反复发作，缠绵难愈，有瘀血症见者，清热类选用于哮喘发作热象症见者。导师张念志教授认为哮喘反复发作，责之于“虚、痰、瘀”，虚以肺脾肾三脏为主，立定益气活血化痰之哮喘平冲剂，在联合布地奈德福莫特罗吸入治疗时，对哮喘发作症状的缓解、炎症水平的降低，效果更佳[22]。

人参为补气药，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智的功效，其主要成分为人参皂苷，研究发现，人参皂苷可以降低哮喘炎性因子的表达，影响上皮细胞趋化因子的产生来缓解气道重塑，调节Th1/Th2 免疫失衡，治疗哮喘[23]。淫羊藿为补阳药，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿功效，研究表明淫羊藿苷可以抑制嗜酸性粒细胞生成和浸润、调节Th1/Th2 分化、降低炎性因子表达等方面改善气道炎症，进一步在气道高反应和气道重塑方面治疗哮喘[24]。栀子为清热药，功效为泻火除烦，清热利湿，凉血解毒；外用消肿止痛，主要活性成分为栀子苷，张雨等研究发现，栀子苷可能通过影响NF-κB 信号通路缓解哮喘气道炎症，如：减少嗜酸性粒细胞数、炎性细胞总数，下调Th2 细胞因子IL-4、IL-5 等炎症因子水平，降低IgE 含量等[25]。三七属于活血化瘀药，功效散瘀止血，消肿定痛，主要药理成分为三七总皂苷，赵文娟等研究发现三七总皂苷可以抑制哮喘小鼠炎性因子IL-17 的表达，缓解哮喘气道炎症；调节Th1/Th2 平衡倾向于Th1 分化，恢复免疫平衡状态[26-27]。除此之外，活血化瘀类药物如：川芎、银杏叶、当归、丹参、地龙等亦可通过影响炎症、免疫机制治疗哮喘[28]。郁金、姜黄亦为活血止痛药，具有活血行气、通经止痛的功效，姜黄素是两种药物共有的有效成分，具有抗炎，抗氧化，抗增殖和抗血管生成等多种作用，尹正海通过实验研究明确，姜黄素抑制哮喘大鼠气道炎症的机制可能通过调节p38MAPK/NF-κB 信号通路来抑制炎症细胞浸润、炎症因子表达水平[29]。梅拉尔·卡拉曼等研究证明姜黄素不但可以抑制哮喘炎症水平，而且对于激素导致的口咽部真菌感染，姜黄素可降低真菌负荷量[30]。目前亦有动物实验尝试姜黄素制作纳米级干粉吸入剂或者悬液改善哮喘小鼠的气道炎症[31]。黄芩为清热燥湿药，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎功效，其有效成分主要为黄芩苷、黄芩素，余保等研究表明黄芩素可以降低炎性因子水平，可能通过抑制JAK2/STAT3 信号通路减轻气道平滑肌细胞的增殖、迁移，进而改善哮喘的气道重塑[32]。黄芩苷为黄芩素结合葡萄糖醛酸形成的化合物，郭雪冬等研究发现黄芩苷可能通过调节Bax/Bcl2 促进炎性细胞凋亡，抑制MUC5AC 表达减少气道黏液蛋白分泌，激活呼吸道苦味信号通路，进而可能在松弛气道平滑肌、减轻气道炎症、气道粘液高分泌状态，发挥对哮喘的治疗作用[33]。并且黄芩苷对白色念珠菌有抑菌作用，具体机制可能通过降低细胞膜上Ca2+-Mg2+ATPase 活性、破坏细胞壁致使真菌凋亡，以及抑制增殖[34]。白色念珠菌感染为长期ICS 治疗常见的不良反应，由此可见，黄芩中的有效成分不但在减轻哮喘气道炎症和念珠菌感染均可发挥作用。穿山龙为祛风湿药，具有祛风除湿，舒筋通络，活血止痛，止咳平喘的功效，有效成分为薯蓣皂苷，可以用于合成甾体类激素，江立斌等研究发现薯蓣皂苷降低哮喘气道重塑相关指标表达，如BRP-39、PI3K、AKT 等蛋白，和糖皮质激素疗效相当，且中西医联用效果更佳[35]。

通过分析哮喘基因芯片数据，获得哮喘17 个核心差异基因与哮喘患者，与哮喘患者γδT 细胞、活化的树突状细胞比例增高，作为哮喘发病机制之一。其中6 个核心基因可以作为治疗哮喘的潜在靶标、生物标志物，来进一步研究。引发哮喘的主要信号通路有Ras 和MAPK 信号通路，多表现为促进哮喘气道炎症和气道重塑。预测治疗哮喘的17 种中药，主要为补虚、活血化瘀类药物，药理学研究表明可治疗哮喘，故可辨证选用，作为临床用药新思路，但后续可以借助网络药理学，明确中药治疗哮喘是否通过核心基因发挥作用。后续仍须通过实验验证，哮喘核心基因表达量变化、信号通路相关指标变化等是否符合生信理论研究。