柚皮苷治疗类风湿关节炎的作用机制研究进展

金灵璐　仲卫红　李宇涛　邱志伟　谢新宇　付长龙

【摘 要】 中藥化橘红、骨碎补是治疗类风湿关节炎的常用药，其主要有效成分柚皮苷具有良好的抗炎和抗氧化作用，且能够修复类风湿关节炎所致关节软骨损伤，延缓其病理进程，临床预防和治疗类风湿关节炎具有潜在应用价值。柚皮苷治疗类风湿关节炎的作用机制主要为保护与修复骨质，对炎症的抑制作用，抗氧化和免疫抑制作用，有很大的临床应用价值，可为临床治疗类风湿关节炎提供新的思路。

【关键词】 类风湿关节炎；柚皮苷；作用机制；研究进展；综述

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种临床常见的免疫介导疾病［1］，主要导致关节滑膜炎性病变和关节软骨损伤，受累关节常表现为以滑膜成纤维细胞为主的炎性细胞增殖与浸润、骨与软骨基质损伤，临床多见晨僵、关节疼痛、功能障碍、活动不利等症状，甚至有致残风险。临床常规治疗使用非甾体抗炎药、糖皮质激素与抗风湿药等，不良反应较大［2］，且长期使用对患者造成一定的经济负担。

柚皮苷是一种枳壳、化橘红、骨碎补等常见植物药中存在的类黄酮-黄烷酮类苷元类成分［3］。研究证明柚皮苷在抗炎、抗氧化、调节细胞周期、激素代谢、保护骨组织等方面具有一定作用［4］，临床治疗RA具有良好的发展前景。本文对近年来柚皮苷相关药理药效及其在RA治疗中的作用机制进行综述，以期为临床预防与治疗RA提供新的研究思路。

1 柚皮苷的药理作用研究

柚皮苷属于二氢黄酮苷，于柑橘类植物未成熟果实中含量较高，也是化橘红、枳壳等常见中药的重要化学成分。传统对柚皮苷的提取常用碱提酸沉法、溶剂萃取法等，随着设备与技术的更新，出现水提取、超声波辅助提取方法，降低化学污染并提高提取率［5-6］。柚皮苷具有抗过敏反应、抗炎、镇痛、抗凋亡、抗氧化等作用［7］，药用价值高，功效显著。大量研究表明，柚皮苷能够抑制骨与关节炎症，促骨形成，抑制骨破坏［8］，改善RA症状［9］。近年来，对柚皮苷相关药理药效的研究是RA治疗的热点之一。

2 柚皮苷治疗RA的机制研究

2.1 保护与修复骨质 RA以全身性骨丢失和关节破坏为特征［10］。成骨细胞（OB）与破骨细胞（OC）的协调功能在维持人体骨量的过程中起到关键作用，保持骨质的形成与吸收平衡。RA骨代谢的特点通常是患者体内OB分化不足，OC过度激活，导致多关节进行性骨质破坏，骨密度下降［11］。

2.1.1 促进成骨细胞增殖分化 研究表明，柚皮苷对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向OB分化有显著的促进作用，且能够明显提高MC3T3-E1成骨细胞的增殖和分化能力［12］。LI等［13］研究表明，柚皮苷通过MSCs的增殖分化，提高骨钙素表达，增加骨密度、骨体积和骨小梁厚度。宁宇等［14］通过体外实验发现，柚皮苷对MSCs向OB分化的促进作用与成骨信号轴BMP-2/Smads/Runx2/Osterix表达有关。刘冲等［15］通过体外实验证明，柚皮苷通过调控miR-199a-5p/ECE1分子轴促进小鼠胚胎OB增殖、成骨分化和矿化，从而可促进骨损伤修复。

2.1.2 抑制OC形成，保护软骨 柚皮苷对OC活性具有抑制作用。刘朝晖等［16］研究初步发现，柚皮苷能够抑制OC分化，降低组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、整合素β3、非受体酪氨酸激酶及其磷酸化产物p-src的表达。李风波等［17］体外培养OC发现，柚皮苷干预可以明显减少成熟OC数量，加速OC凋亡。彭侃等［18］将柚皮苷作用于骨关节炎（osteoarthritis，OA）大鼠模型4周后，大鼠关节软骨损伤程度减轻，并发现柚皮苷通过抑制核转录因子-κB（NF-κB）和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）信号通路显著阻滞了白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的软骨细胞凋亡。SHEN等［19］研究证明，柚皮素包被的微结构钛缓释系统有助于OB碱性磷酸酶（ALP）表达增高，而抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和V-ATPase（VATP）表达显著降低，OB的分化增强，而OC的形成被抑制。

2.2 对炎症的抑制作用

2.2.1 对炎症因子的抑制作用 研究表明，在RA病理进程中，IL-1β、IL-6、IL-17及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对OC的形成有促进作用［20-21］。其中IL-1β通过激活单核巨噬细胞和淋巴细胞引发骨和软骨破坏并抑制其修复，进而导致骨质损伤，关节病变［22］。而IL-6过表达会导致机体免疫系统功能失调。谢仁峰等［23］通过动物实验发现，柚皮苷具有抗炎、消肿、止痛的作用。ZHU等［24］实验研究表明，口服柚皮苷可以降低佐剂性关节炎大鼠TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平。XU等［25］发现，柚皮苷能够抑制脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞中前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）、IL-6和TNF-α的产生，且在OA模型中，柚皮苷还可以减轻关节僵硬和疼痛，减少炎症介质和促炎症细胞因子的产生，保护软骨下骨和软骨组织。ZHAO等［26］将柚皮苷作用于OA模型小鼠，发现其能够保护软骨免受破坏，降低TNF-α、IL-1β、MMP-13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5（ADAMTS-5）和一氧化氮合酶（iNOS）-2等炎症因子的产生，增加含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）的活化，增加Bax/Bcl-2比值，且呈剂量依赖性。

2.2.2 对炎性信号通路的调节作用 NF-κB与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）是控制RA病程中产生炎症反应的主要调节通路［27-28］。研究证实，柚皮苷能够抑制细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、应激活化蛋白激酶（JNK）和p38 MAPK的磷酸化［29］，在胶原诱导性关节炎小鼠模型中，柚皮素通过降低脂多糖诱导的MAPK和NF-κB信号激活，抑制了促炎因子的产生［30］，达到缓解炎症的目的。另外，柚皮苷可通过PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路降低TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）中炎症因子和MMPs的产生，促进RA-FLS细胞凋亡［26］。

2.3 抗氧化和免疫抑制作用 氧化应激是RA病理过程的重要组成部分，免疫反应以及抗原之间的相互作用诱导活性氧物质（ROS）的产生，此过程或与炎症发生程度和关节破坏速度呈正相关［31］。研究发现，柚皮苷可通过影响过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和硫代巴比妥酸反应物（TBARS）发挥抗氧化作用，通过清除ROS和活性氮保护过氧硝酸盐诱导的DNA氧化损伤，抑制iNOS及环氧合酶的表达［32］。体外实验表明，iNOS参与RA炎症过程与关节破坏，导致关节周围骨质流失，并介导免疫功能障碍［33］。

RA患者受损关节中自发产生活化的CD14+单核细胞，并特异性诱导辅助性T细胞17（Th17），Th17分泌IL-17，诱导促炎细胞因子产生，导致组织及关节软骨和骨的破坏［34］。何冶等［35］的研究结果显示，柚皮苷通过上调miR-21调节Treg/Th17失衡，降低CIA大鼠的多种炎症反应，抑制滑膜炎症和软骨破坏，对RA起保护作用。另外，在RA疾病发展过程中，活化的T细胞通过NF-κB受体活化因子配体（RANKL）介导滑膜巨噬细胞向OC分化，引起骨质丢失，柚皮素能够通过促进T细胞释放IL-4抑制RANKL诱导的OC生成［36］，并通过下调转化生长因子-β1，减少调节性T细胞，改善免疫环境［37］。

3 小 结

柚皮苷具有抗炎镇痛、抗过敏、抗氧化、免疫调节、抑制破骨细胞增生等多种生物活性。因其不良反应较小，且来源广泛，提取技术成熟，药效作用和化学结构基本明确，在预防和治疗RA及其他慢性关节疾病方面具有良好的发展前景。因此，对柚皮苷治疗RA及其并发症的作用机制进一步探究，有很大的临床价值和意义。目前，关于柚皮苷治疗RA大多局限于动物研究与细胞研究，待加入严格和标准化的大样本临床试验，以及相关信号通路研究，为临床运用提供新的依据。

参考文献

［1］ 赵海燕，张鸿婷，郭丹丹，等.独活寄生汤对肝肾不足寒湿痹阻型类风湿性关节炎Th17/Treg平衡的影响［J］.西部中医药，2021，34（6）：8-12.

［2］ 胡晓敏，宗英，余珊珊，等.类风湿关节炎治疗药物的研发进展及趋势［J］.中国新药杂志，2017，26（1）：36-43.

［3］ 王婷婷，张健，张再媛，等.柚皮苷抑制大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导的细胞焦亡［J］.中国病理生理杂志，2021，37（6）：1019-1026.

［4］ 殷方明，肖涟波，张昀.骨碎补柚皮苷对炎症及骨作用的相关研究进展［J］.中国骨伤，2015，28（2）：182-186.

［5］ 张智，杨柳，尹文哲，等.提取骨碎补中柚皮苷的研究［J］.中国林副特产，2019，34（2）：1-4.

［6］ 杨稼俊，胡爱军，杨瑶，等.柚皮中柚皮苷的提取工艺研究［J］.农产品加工，2020，19（8）：36-38，43.

［7］ 郭俐麟.静脉注射柚皮苷在大鼠体内药代动力学研究［J］.广东化工，2021，48（7）：31-33.

［8］ 张鹏，余翔，陈卓峰，等.基于网络药理学探讨柚皮苷治疗骨质疏松症的潜在机制［J］.中国骨质疏松杂志，2021，27（4）：533-541.

［9］ AIHAITI Y，SONG CY，TUERHONG X，et al.Therapeutic effects of naringin in rheumatoid arthritis：network pharmacology and experimental validation［J］.Front Pharmacol，2021，12（1）：672054-672074.

［10］ 高潔，刘小娟，孔瑞娜，等.类风湿性关节炎患者骨密度及骨代谢生化标志物的变化［J］.中国骨质疏松杂志，2015，21（9）：1119-1122.

［11］ 陈红梅，王友莲.破骨细胞在类风湿关节炎致骨破坏病理变化中的作用及其调控［J］.中国骨质疏松杂志，2016，22（9）：1168-1173.

［12］ CHEN LL，LEI LH，DING PH，et al.Osteogenic effect of Drynariae rhizoma extracts and Naringin on MC3T3-E1 cells and an induced rat alveolar bone resorption model［J］.Arch Oral Biol，2011，56（12）：1655-1662.

［13］ LI N，JIANG YP，WOOLEY PH，et al.Naringin promotes osteoblast differentiation and effectively reverses ovariectomy-associated osteoporosis［J］.J Orthop Sci，2013，18（3）：478-485.

［14］ 宁宇，刘想忠，汪伟，等.柚皮苷通过Runx2信号通路促进MSCs成骨分化的实验研究［J］.湖北中医药大学学报，2019，21（1）：9-14.

［15］ 刘冲，曹慧，杨彩彩，等.柚皮苷调控miR-199a-5p/ECE1分子轴促进骨损伤修复［J］.昆明医科大学学报，2020，41（6）：32-38.

［16］ 刘朝晖，马剑雄，田爱现，等.柚皮苷对破骨细胞分化和极化影响的初步探究［J］.天津医药，2020，48（12）：1141-1145.

［17］ 李风波，孙晓雷，马剑雄，等.柚皮苷对破骨细胞凋亡的影响［J］.中国矫形外科杂志，2021，29（5）：450-454.

［18］ 彭侃，鲁超，胡守业，等.柚皮苷对骨关节炎软骨破坏的保护作用研究［J］.现代生物医学进展，2020，20（13）：2418-2424，2439.

［19］ SHEN K，ZHANG XJ，TANG Q，et al.Microstructured titanium functionalized by naringin inserted multilayers for promoting osteogenesis and inhibiting osteoclastogenesis［J］.J Biomater Sci Polym Ed，2021，32（14）：1865-1881.

［20］ 徐慧敏，黄传兵，毛古燧，等.类风湿关节炎患者血清骨代谢标志物水平及炎症因子变化研究［J］.中国骨质疏松杂志，2018，24（2）：152-155，169.

［21］ 杨荣敏，段相国，陈建，等.血清IL-2、TNF-α及IL-13在类风湿关节炎诊断与治疗中的临床意义［J］.现代免疫学，2017，37（1）：44-49.

［22］ VAN DEN BERG WB.Arguments for interleukin 1 as a target in chronic arthritis［J］.Ann Rheum Dis，2000，59（Suppl 1）：81-84.

［23］ 谢仁峰，文双娥，李洋，等.柚皮苷抗炎镇痛作用的实验研究［J］.湖南师范大学学报（医学版），2011，8（4）：5-8，12.

［24］ ZHU LP，WANG J，WEI TT，et al.Effects of Naringenin on inflammation in complete freund's adjuvant-induced arthritis by regulating Bax/Bcl-2 balance［J］.Inflammation，2015，38（1）：245-251.

［25］ XU Q，ZHANG ZF，SUN WX.Effect of naringin on monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis pain in rats［J］.Med Sci Monit，2017，23（1）：3746-3751.

［26］ ZHAO YP，LI Z，WANG WH，et al.Naringin protects against cartilage destruction in osteoarthritis through repression of NF-κB signaling pathway［J］.Inflammation，2016，39（1）：385-392.

［27］ JIMI E，FEI H，NAKATOMI C.NF-kappaB signaling regulates physiological and pathological chondrogen-esis［J］.Int J Mol Sci，2019，20（24）：6275-6290.

［28］ YANG GL，CHANG CC，YANG YW，et al.Resveratrol alleviates rheumatoid arthritis via reducing ROS and inflammation，inhibiting mapk signaling pathways，and suppressing angiogenesis［J］.J Agric Food Chem，2018，66（49）：12953-12960.

［29］ YU DH，MA CH，YUE ZQ，et al.Protective effect of naringenin against lipopolysaccharide-induced injury in normal human bronchial epithelium via suppression of MAPK signaling［J］.Inflammation，2015，38（1）：195-204.

［30］ LI YR，CHEN DY，CHU CL，et al.Naringenin inhibits dendritic cell maturation and has therapeutic effects in a murine model of collagen-induced arthritis［J］.J Nutr Biochem，2015，26（12）：1467-1478.

［31］ MITITELU RR，PADUREANU R，BACANOIU M，et al.Inflammatory and oxidative stress markers-mirror tools in rheumatoid arthritis［J］.Biomedicines，2020，8（5）：125-143.

［32］ 金元寶，刘萍，刘小根，等.柚皮苷的生物活性研究进展［J］.中国现代医药杂志，2018，20（3）：92-97.

［33］ LEONIDOU A，LEPETSOS P，MINTZAS M，et al.Inducible nitric oxide synthase as a target for osteoarthritis treatment［J］.Expert Opin Ther Targets，2018，22（4）：299-318.

［34］ NA HS，KWON JE，LEE SH，et al.Th17 and IL-17 cause acceleration of inflammation and fat loss by inducing alpha2-glycoprotein 1（AZGP1）in rheumatoid arthritis with high-fat diet［J］.Am J Pathol，2017，187（5）：1049-1058.

［35］ 何冶，洪明志，胡盼鑫.柚皮苷上调miR-21对改善类风湿关节炎大鼠Treg/Th17失衡的研究［J］.新中医，2020，52（15）：11-15.

［36］ WANG WG，LI MJ，LUO M，et al.Naringenin inhibits osteoclastogenesis through modulation of helper T cells-secreted IL-4［J］.J Cell Biochem，2018，119（2）：2084-2093.

［37］ DU GJ，JIN LT，HAN XF，et al.Naringenin：a potential immunomodulator for inhibiting lung fibrosis and metastasis［J］.Cancer Res，2009，69（7）：3205-3212.

收稿日期：2022-08-24；修回日期：2022-09-30