1例抗筛阳性患者不规则抗体的鉴定与分析

韩冬梅，黄义春，李宜文，陈晓玲，汪 沁，唐宗生

(皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院 输血科，安徽 芜湖 241001)

临床医生在对患者施行输血治疗之前需要进行ABO、RhD血型鉴定、不规则抗体筛查以及交叉配合实验以保障输血安全。若发现患者不规则抗体阳性，需鉴定此抗体特异性，选择对应抗原阴性的红细胞制品经交叉配血相合后才能输注[1-2]。输血或妊娠使得个体接受到其本身缺乏的血型抗原的免疫刺激产生抗体，随着时间的推移，抗体含量会逐渐降低到无法被检出。当再次输入含有相应血型抗原的血液时，会因回忆反应产生大量抗体。但回忆反应早期时血清抗体含量依然较低，难以被检出。本实验室发现1例输血后回忆反应导致的不规则抗体阳性病例，通过适当的抗体鉴定和交叉配血策略，使患者得以安全地接受输血治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 患者方某，女，68岁，子女已成年。2021年10月30日诊断“大面积脑梗死、急性呼吸衰竭”收治弋矶山医院重症医学科。既往有高血压病史3年，无传染病史，无药物过敏史，6年前因脑出血手术有过输血史，输血量不详。该病例报道已获得患者知情同意。

1.2 实验方法 ①血型鉴定方法：微柱法；②抗体筛查、抗体鉴定及抗体效价鉴定：用室温盐水试管立即离心(IS法)及微柱凝胶卡式法；③木瓜酶法：抗体鉴定谱细胞与等体积配制好的木瓜酶37℃孵育15 min，生理盐水洗涤3次，离心取压积红细胞备用。所有实验均按照文献[3]及试剂的说明书进行操作。

2 结果

患者血型鉴定、抗体筛查、不规则抗体鉴定、交叉配血及血液输注情况等如下。血型AB型，RhD+，2021年11月1日血红蛋白(Hb)56 g/L，不规则抗体筛查IS法阴性，微柱凝胶卡式法阴性。输注红细胞悬液2 U。2021年11月2日复查Hb 60 g/L。2021年11月4日Hb 62 g/L，不规则抗体筛查IS法阴性，微柱凝胶卡式法阴性。再次输注红细胞悬液2 U。2021年11月5日复查Hb 77 g/L。2021年11月9日患者病情变化，Hb 57 g/L，不规则抗体筛查IS法阴性，微柱凝胶卡式法阳性。直接抗人球蛋白试验阳性。回测2021年11月1日患者首次送检标本Rh分型：D+,C+,E-,c-,e+，微柱凝胶卡式法抗体鉴定时10份谱细胞只有1、6号阳性，无法确定不规则抗体特异性。结合抗筛格局与患者Rh抗原分型检测结果，考虑患者有抗E、抗c可能，选择Rh分型与患者相同的红细胞悬液2 U，交叉相合后输注。次日复查Hb 69 g/L。2021年11月18日因病情变化，Hb 48 g/L。不规则抗体筛查IS法阴性，微柱凝胶卡式法阳性，直抗阳性，微柱凝胶卡式法抗体鉴定，仅1、6号细胞阳性。因怀疑此抗体为Rh系统不规则抗体，而酶处理鉴定谱细胞能增强Rh系统不规则抗体的反应强度，故选择木瓜酶处理鉴定谱细胞后，行不规则抗体鉴定。结果：1、3、4、5、6号谱细胞均强阳性，2、7、8、9、10号谱细胞均阴性，符合抗E格局。结论：检出IgG抗E抗体。同时行患者红细胞放散液与酶处理谱细胞的抗体鉴定试验，结果：1、3、4、5、6号谱细胞均强阳性，2、7、8、9、10号谱细胞均阴性，符合抗E格局。结论：放散出IgG抗E抗体。回测患者2021年11月1日输注的供者红细胞悬液2 U，均为E抗原阳性。选择E-,c-献血者红细胞悬液，交叉配血相合。次日复查Hb 61 g/L。因患者病情进展，血液丢失明显，输血前后的血红蛋白作为输血的疗效虽不理想，但患者4次输血治疗除第1次效果不明显外，其余3次输血后血红蛋白均上升明显。

通过该案例的回顾分析，患者因妊娠、6年前手术中输血而引起E抗原免疫，2021年11月1日输注E抗原阳性红细胞悬液2 U而发生回忆反应，引发延迟性输血反应。这种延迟性输血反应，常规的检测方法容易漏检，需采用酶处理或其他增强技术才能明确诊断。

3 讨论

不规则抗体阳性患者输入表达相应抗原的红细胞会引起迟发性溶血性输血反应(delayed hemolytic transfusion reaction,DHTR)[4]，有些DHTR早期因患者血清中抗体滴度处于较低水平而症状不明显，且容易被疾病症状掩盖，需通过直抗和放散实验才能发现。常引起DHTR的抗体是Rh、Kidd、Duffy和KELL等血型系统的抗体[5]。

本例患者曾有多次输血史，并发生输血后的回忆反应。因患者血清游离抗体较少，首次入院输血时常规方法无法检测出抗E，交叉配血亦漏检，因此误输了E阳性血液，导致其抗体再次产生。再次申请输血时，患者新样本抗体筛查提示阳性结果，使用常规谱细胞不规则抗体鉴定无明显格局，无法确定抗体特异性，但怀疑为Rh系统不规则抗体，选择Rh分型与患者相同的血液交叉配血；第3次患者样本用酶法处理后再次进行不规则抗体鉴定，检出IgG抗E抗体，且患者红细胞放散液中亦检出抗E，证明患者近期输入了E阳性血液。回溯调查患者近期4次输血，发现2021年11月1日所输入的两袋血液均为E阳性，这也与患者放散液实验结果相互印证。

综上所述，当抗体筛查阳性，鉴定谱细胞格局不明显，但怀疑是Rh系统不规则抗体时，用酶处理谱细胞可提高Rh系统不规则抗体的检出率。同时建议，在病人有近期输血史、抗体筛查阳性、直抗阳性且输血疗效未达到预期时，可选择酶处理等抗体反应增强技术以明确是否有不相合的血液输注。多次输血导致患者血清不规则抗体呈阳性的病例多不胜举，如何精准检测出不规则抗体，是临床输血必须要解决的问题。此例个案报道能为临床输血提供有益借鉴。