吉林乌头和龙船乌泡合剂对正常大鼠的痛觉调节作用

王雪纯，付立波，吕 航，彭佳琪,李佳林，朱妮娜

(长春师范大学生命科学学院，吉林 长春 130032)

根据国际疼痛学会(IASP)的定义，疼痛是一种由于实际的或是潜在的组织损伤导致的不好的感觉和情绪情感体验，或者是与此类似的经历[1]。目前一般通过药物来达到镇痛效果，阿片类药物的作用效果强，但具有许多不良反应，有极强的成瘾性，可能会对机体造成不可逆的伤害[2]，因此寻找无依赖性的镇痛药物迫在眉睫。而中草药的镇痛作用历史悠长，许多中药材能起到一定的镇痛作用且副作用较小。

龙船乌泡又称过江龙，具有舒筋活络，治疗跌打损伤及筋骨疼痛的功效[3]；吉林乌头同样具有散寒止痛，祛风除湿的功效，在民间常用来治疗风湿性关节炎、牙痛、神经痛、心腹冷痛等症[4]。研究表明，吉林乌头主要成分有生物碱类、黄酮类、多糖等[5]。但至今尚未发现有关于吉林乌头和龙船乌泡对痛觉调节的研究。因此本实验采用灌胃及行为学测痛等方法，探讨吉林乌头和龙船乌泡对痛觉的作用，以期能对临床镇痛药物的开发提供理论依据。

1 材料

1.1 实验动物与药品

使用雄性Wistar大鼠6只，长春亿斯实验动物技术有限公司提供。购买后6只大鼠单独喂养，保证大鼠自由进水进食，室内温度保持适宜和稳定，维持实验室的安静，确保实验大鼠稳定的生活条件。

吉林乌头，龙船乌泡购买于恩春堂大药店；生理盐水产自辽宁明康制药有限公司。

1.2 实验仪器

主要实验仪器有灌胃针(深圳瑞沃德公司)，YLS-6B智能热板仪(上海曼普生物公司)；YLS-3E电子压痛仪(意大利UGO)。

2 方法

2.1 水煮液母液及不同质量浓度溶液的制备

称取龙船乌泡和吉林乌头各10 g，分别放在陶瓷缸中，先将吉林乌头煎15 min，然后将吉林乌头和龙船乌泡分别熬煮3次，取水煮液的母液，再用母液分别配制成5、10、20 mg/mL的合剂。

2.2 行为痛觉测试

行为痛觉测试包括热板测试和压板测试。在实验之前对正常雄性大鼠进行一周的热板和压板测试训练，6只正常雄性大鼠都进行相同训练，每天3 轮，每轮5 次，以此减少大鼠的应激性和实验误差。经过7天训练后，第8天注射生理盐水作为对照，之后用不同质量浓度的混合液进行灌胃。在每次灌胃之前需要先测3次基础HWL，作为基础值。灌胃之后在第5、10、15、20、30、45、60 min进行行为学测痛。

2.3 数据处理

收集整理数据，用实验前测得的3次HWL值的平均值作为基础值，实验中测得的结果与其比较，计算HWL的变化百分比。实验数据以“均值±标准误差”(x±s)的形式表示，用SPSS 22.0软件分析数据，采用单因素方差分析方法进行组间比较和分析。

3 实验结果

生理盐水与不同质量浓度(5、10、20 mg/mL)合剂灌胃后大鼠 HWL的变化百分比见表 1、表 2和表3。

表1 灌胃5 mg/mL合剂大鼠的HWL的影响

由表1可知，与生理盐水(对照组)相比，5 mg/mL合剂灌胃大鼠的左爪热刺激HWL具有显著差异(P<0.05)，右爪热刺激及机械刺激HWL无差异(P>0.05)；大鼠右爪机械刺激HWL显著差异(P<0.05)。

表2 灌胃10 mg/mL合剂大鼠的HWL的影响

由表2可知，与生理盐水(对照组)相比，10 mg/mL合剂灌胃大鼠的左爪热刺激HWL具有显著差异(P<0.05)，右爪热刺激HWL具有极显著差异(P<0.01)；大鼠左爪机械刺激HWL具有极显著差异(P<0.01)，右爪机械刺激HWL具有显著差异(P<0.05)。

表3 灌胃20 mg/mL合剂对大鼠HWL的影响

由表3可知，与生理盐水(对照组)相比，20 mg/mL合剂灌胃大鼠左爪热刺激HWL具有显著差异(P<0.05)，右爪热刺激HWL具有极显著差异(P<0.01)；大鼠左爪和右爪机械刺激HWL均具有显著差异(P<0.05)。

4 讨论

本实验结果表明，与灌生理盐水相比，吉林乌头和龙船乌泡混合水煮液灌胃后，大鼠HWL明显增加，因此合剂对大鼠确实起到了镇痛作用，且镇痛效果在15 min左右最为明显，具有时间上的规律性。本实验还发现，对大鼠灌胃5、10、20 mg/mL 混合水煮液的作用效果不同，大鼠 HWL 也有显著差异。通过观察数据可以得出，随着混合水煮液质量浓度的逐渐增加，大鼠HWL 也逐渐增加，说明吉林乌头和龙船乌泡合剂对正常大鼠镇痛作用具有剂量依赖性。

许多乌头类中药材例如川乌以及附子等同样具有一定程度的镇痛功能，能够有效缓解疼痛，陈绍斌[6]用乌头桂枝散采用热敷痛点的方法，治疗患者坐骨神经痛，发现效果良好。进一步研究发现，乌头类药材中的乌头碱、草乌甲素[7]、粗茎乌头碱A等生物碱有良好镇痛作用而且不会具有成瘾性[8]。另外有动物实验[9]表明，乌头碱和次乌头碱能够明显减少足肿胀大鼠模型的抽搐次数而且能减轻疼痛，其镇痛机制与中枢神经细胞膜Na+通道开放密切相关。可能由于吉林乌头含有乌头碱等多种生物碱，能对正常大鼠起到一定的镇痛作用。中药复方还可以通过调控5-羟色胺(5-HT)含量及其受体的表达等多种途径发挥镇痛作用[10]。而龙船乌泡的相关研究较少，与镇痛作用相关的有效成分及镇痛调控途径仍需进一步探究。本实验表明吉林乌头和龙船乌泡合剂具有一定的镇痛作用，对镇痛药物的开发和研究提供初步理论基础。