Pim-1、SULF1、E-cadherin在结直肠癌组织中的表达意义

熊晓玲 王 盼 覃小艳

湖北省麻城市人民医院病理科 438300

结直肠癌是居全球第3位的恶性肿瘤，并且随着近年来人们饮食结构改变，该病发病率逐年增加[1]。该病早期症状不明显，随着病情的发展会出现血便、腹泻、局部腹痛，但是诊断时往往失去最佳治疗时机，影响预后效果[2]。另外，结直肠癌的发生、发病机制尚不明确，深入了解其发病机制，寻找有力的靶点成为新的研究热点。丝/苏氨酸激酶-1(Pim-1)是一种诱导癌细胞恶化、加速增殖、抑制凋亡的原癌基因[3]；硫酸酯酶1(SULF1)能够特异性去除细胞表面硫酸肝素蛋白多糖的硫酸基团[4]；上皮型黏附素(E-cadherin)是一种钙黏附素，能够维持细胞间连接，参与细胞内信号传导[5]。鉴于此，本文为了探究Pim-1、SULF1、E-cadherin在结直肠癌组织中的表达意义，选择180例结直肠癌患者进行分析,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年1月—2019年8月我院收治的180例结直肠癌患者作为观察对象。其中男98例,女82例；年龄32～72(52.36±10.18)岁；肿瘤部位：结肠92例，直肠88例；病理类型: 黏液细胞癌31例，乳头状腺癌69例，管状腺癌80例；分化程度：低60例，中104例，高16例；TNM分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期69例，Ⅲ期81例，Ⅳ期11例；浸润深度：T1 12例，T2 59例，T3 91例，T4 18例。

1.2 选择标准 (1)纳入标准：①依据《中国结直肠肿瘤早诊筛查策略专家共识》[6]，并经活检、病理学检查确诊为结直肠癌者；②预计生存期在6个月以上者；③年龄30～75岁；④浸润深度：T1～T4；⑤知情本次研究者。排除标准：①无法与医护人员正常沟通者；②1周内有特殊用药史者；③伴有心脑血管疾病，肝、肾功能不全者；④伴有其他恶性肿瘤者。

1.3 试剂及药品 单克隆兔pim-1抗体购自美国Santa Cruz公司、多克隆兔E-cadherin抗体购自北京奥博星生物技术有限责任公司，多克隆鼠SULF1抗体购自武汉博士德生物工程有限公司，二氨基联苯胺(DBA)显色试剂盒(批号180102)及SP试剂盒(批号171207)均购于北京奥博星生物技术有限责任公司。

1.4 方法 用10%甲醛固定结直肠癌和癌旁组织标本，用石蜡包埋后，切4μm薄片，烘干、脱蜡后滴加单克隆兔Pim-1抗体、多克隆兔E-cadherin抗体、多克隆鼠SULF1抗体。然后进行苏木素染色。以自配制磷酸盐缓冲液代替一抗做阴性对照，用已知标志物的阳性组织切片为阳性对照，具体检测操作步骤严格按照所用试剂盒的操作说明进行。

1.5 观察指标 (1)Pim-1、SULF1、E-cadherin表达情况：Pim-1表达的阳性细胞判定标准：细胞质染为淡黄色至棕褐色；E-cadherin表达的阳性细胞判定标准：细胞核或细胞浆中出现棕黄色颗粒，在400倍镜下，阳性细胞<25%判定为阴性，≥25%判定为阳性；SULF1表达的阳性细胞判定标准：细胞核或细胞浆中出现棕黄色颗粒，在400倍镜下，阳性细胞<50%判定为阴性，≥50%判定为阳性。(2)临床病理参数：性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、分化程度、TNM分期、浸润深度。(3)统计Pim-1、SULF1、E-cadherin阳性和阴性表达结直肠癌患者24个月生存状况，并利用Prism软件绘制生存曲线。

2 结果

2.1 Pim-1、SULF1、E-cadherin表达情况 相比癌旁组织，结直肠癌组织中Pim-1、SULF1阳性率明显更高，E-cadherin阳性率明显更低(P<0.05)。见表1。

表1 Pim-1、SULF1、E-cadherin表达情况比较[n(%)]

2.2 Pim-1、SULF1、E-cadherin表达与结直肠癌临床病理参数的关系分析 在结肠癌组织中，Pim-1、SULF1阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而增加；E-cadherin阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而降低(P<0.05)。见表2。

表2 Pim-1、SULF1、E-cadherin表达与结直肠癌临床病理参数的关系分析[n(%)]

2.3 Pim-1、SULF1、E-cadherin阳性和阴性表达结直肠癌患者24个月生存状况比较 结直肠癌患者24个月生存率为81.67%(147/180)，其中Pim-1阳性表达患者24个月生存率为75.00%(93/124)，明显低于阴性表达患者的96.43%(54/56)；SULF1阳性患者24个月生存率为71.96%(77/107)，明显低于阴性表达患者的95.89%(70/73)；E-cadherin阳性表达患者24个月生存率为100.00%(32/32)，明显高于阴性表达患者的77.70%(115/148)(P<0.05)。见图1～3。

图1 结直肠癌患者Pim-1阳性与阴性表达生存曲线

图2 结直肠癌患者SULF1阳性与阴性表达生存曲线

图3 结直肠癌患者E-cadherin阳性与阴性表达生存曲线

3 讨论

结直肠癌是来源于结直肠黏膜的恶性肿瘤，发病与生活方式、遗传、结直肠腺瘤等关系密切[7]。并且该病发病过程较复杂，且有效的治疗靶点尚无确定。目前临床上治疗结直肠癌患者的关键在于改善患者生活质量，延长生存周期。同时大量研究报道[8-9]，结直肠癌的发生、转移及预后与多种生物指标相关。

Pim-1不仅能够促使凋亡分子Bad发生磷酸化，丧失活性，加速肿瘤细胞增殖，而且能够调节细胞的增殖周期，增强细胞的抗凋亡作用[10]。硫酸肝素蛋白多糖存在于细胞表面，能够促进肿瘤新生血管生成，能够促进癌细胞转移，促进癌组织生长，而SULF1能够特异性去除细胞表面硫酸肝素蛋白多糖的硫酸基团，提高硫酸肝素蛋白多糖的作用效果[11]。存在于人体非神经上皮细胞的E-cadherin减少是恶性肿瘤转移和扩散的关键[12]。故本文结果发现，相比癌旁组织，结直肠癌组织中Pim-1、SULF1阳性率明显更高，E-cadherin阳性率明显更低。分析原因，Pim-1阳性表达能够增强细胞的抗凋亡，延长癌细胞生存周期；SULF1阳性报道能够促进心血管生成，加速癌细胞转移；E-cadherin表达减弱使得上皮细胞间的连接作用减弱，使细胞间出现松散，易于扩散和转移。

另外，本文结果发现，在结肠癌组织中，Pim-1、SULF1阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而增加；E-cadherin阳性表达率随着肿瘤直径增加、分化程度降低、TNM分期增加、浸润深度增加而降低。结直肠癌患者24个月生存率为81.67%，其中Pim-1阳性表达患者24个月生存率明显低于阴性表达患者；SULF1阳性患者24个月生存率明显低于阴性表达患者；E-cadherin阳性表达患者24个月生存率明显高于阴性表达患者的。分析原因，Pim-1可有效抑制肿瘤细胞出现凋亡，明显促进肿瘤细胞的增殖速度，且显著性阻滞肿瘤细胞的分化和成熟过程；SULF1阳性报道能够促进心血管生成，加速癌细胞转移；E-cadherin的表达缺失会增加结直肠癌患者的死亡率，加速癌细胞转移，影响预后。

综上所述，Pim-1、SULF1、E-cadherin参与结直肠癌的发病，与患者临床特征和预后密切相关。