土鳖虫研究概述

杨 丽,苏学秀，顾炳麟，王太生，吕益涛，吴兆蕃，武玉婧，王晓燕，石林凡，李普凡，滕泽学，杨世琴，杨 伍

(白银市药品检验检测中心,甘肃 白银 730900)

1 人工养殖技术

土鳖虫完成一个生命周期历经产卵、幼虫、成虫共三个阶段。文献记载[1]，20世纪60年代，我国就开始了以江苏省为首的土鳖虫人工养殖技术探索。基于野生动物保护政策，现药用土鳖虫绝大多数为人工养殖，其养殖方式有盆养、缸养、池养和立体饲养等，最大优点表现为生长周期短，投资少，见效快。

人工养殖需要考虑其生活习性、养殖方法、饲料组成、温度控制以及敌害防治等多个方面外界因素。最初，北方人工养殖土鳖虫的方法为用砖头、水泥板(或木板、电阻丝)组成饲养柜，另取干净的培养土(加入适量生石灰)、锯术屑或稻壳灰进行小范围个体户养殖[2]。后来，周维官等[3]选取不同地域土鳖虫为试验基材，对饲养土、蛋白质水平、温度等多个饲养指标进行了详细研究，选出了饲养土鳖虫的适宜条件，发现优化后的养殖法土鳖虫产量提高 15.5%，耗料比降低10.9%。吴巧凤等[4]以土鳖虫幼虫为载体，率先选用含富硒酵母或亚硒酸钠等加富饲料进行人工养殖，大大提高了土鳖虫的品质和市场竞争力。至此，土鳖虫的人工养殖技术取得突破性进展，终于可以进行大规模的养殖。

2 真伪鉴别

土鳖虫真伪鉴别在其临床应用与基础研究中占有重要地位，鉴别方法有经验鉴别法、显微法、光谱法、色谱法、生物鉴定法等。

早在2011年，张叶[5]就在《土鳖虫及其伪品的鉴别》一文中详细介绍了地鳖、冀地鳖、金边土鳖及东方潜龙虱的性状鉴别要点。鞠康等[6]借助多种仪器对土鳖虫的不同部位进行图像采集，利用Photoshop CS5软件景深合成高清晰度微性状特征图片对土鳖虫进行微性状鉴定法研究，发现土鳖虫口器、腹背板边缘、肛上板、生殖板、触角、单眼间距与复眼间距比例、单眼、复眼、前足胫节、跗节、爪、尾须、背甲及腹甲刚毛等方面与混淆品有比较明显的区别。

近年来，陈伟韬等[7]通过改变供试品溶液的制备方法、薄层色谱展开剂、薄层板和检视方法等条件，确定金边土鳖的薄层色谱中存在混伪品没有的橙黄色荧光斑点，可作为金边土鳖混伪品的鉴别依据。

生物鉴定法中目前应用较成熟的方法是分子生药学技术。陈伟韬等[8]借助DNA条形码通过基因数据库可以有效的鉴别土鳖虫及其混伪品。李娜等[9]借助线粒体 DNA 细胞色素氧化酶b( Cytb) 基因的分子标记技术对土鳖虫及其混伪品炮制药材进行了分子鉴定，确定只有土鳖虫带有扩增条带，可以有效鉴别地鳖虫及其混伪品。

3 化学成分

土鳖虫作为传统中药动物药，含有丰富多样的化学成分，有蛋白质、氨基酸、脂肪酸、胆固醇、挥发油等，其中蛋白质含量占总干重的50%以上[10]。土鳖虫中还含有多种人体必需氨基酸，已发现18种[11-13]，其中组氨酸基于首位。此外，土鳖虫中含有多种脂肪酸，包括3种饱和脂肪酸(软脂酸、豆蔻酸、硬脂酸)和3种不饱和脂肪酸(棕榈油酸、油酸、亚油酸)。见表1。

表1 土鳖虫中的化学成分及其种类

4 临床药理

现代临床研究表明，土鳖虫对治疗人体肝、腰、关节等多个脏器疾病有重要作用。土鳖虫作为中药动物药，与其他虫类动物药合并可用于治疗骨关节类疾病。王继萱等[16]引用土鳖虫能破血逐瘀中医辨证治病，将其用于治疗慢性肝炎、早期肝硬化和肝区有闷痛等症效果显著。金鑫[17]对100例血瘀型腰痛患者在常规治疗的基础上口服土鳖虫中药，发现能有效减轻患者的疼痛、改善血流动力学、降低血液黏度。

近年药理学研究显示，土鳖虫具有降低血脂、促进骨细胞增殖、抗肿瘤等多种药理作用。姜珊等[18]研究发现土鳖虫活性肽DP17能够调控高脂血症SD大鼠体内能量代谢平衡并激活AMPK/mTOR信号通路来抑制大鼠肝脏脂肪堆积现象，从而发挥降血脂的作用。王晶等[19]发现土鳖虫的水溶性成分对MC3T3-E1成骨细胞有促增殖作用。马家宝等[20]归纳总结了土鳖虫抗肿瘤有效成分和抗肿瘤机制。发现土鳖虫抗肿瘤有效成分为脂溶性脂肪酸、纤溶活性蛋白、多糖、多种提取物等，抗肿瘤机制则是通过抑制肿瘤细胞的增殖和诱导肿瘤细胞的凋亡来实现的。

5 有害物质及毒性

5.1 有害物质

《中国药典(2020年版)》已经收录了中药土鳖虫中有害物质的检测方法。有害物质以重金属和黄曲霉毒素为主。

重金属蓄积会引起人体暂时或永久性病理变化，甚至危及生命。朱晓东[21]利用高效液相-电感耦合等离子体质谱技术对86批土鳖虫中重金属进行分析检测，发现土鳖虫中Pb、As、Cu总体超标率达到56.98%，As残留水平接近限量值，考虑可能是喂养饲料和地下水通过食物链的生物放大效应造成土鳖虫As积累。李耀磊等[22]采用电感耦合等离子体质谱对土鳖虫中16种无机元素进行测定，发现土鳖虫中As、Cd和Pb残留量较高，提示，重金属超标应引起关注。

黄曲霉毒素是含剧毒的真菌毒素，严重威胁患者用药安全。建立快速的中药材污染真菌鉴定方法检出潜在的产毒真菌，意义重大。白玲[23]通过高效液相色谱法对56批来自五省不同药材市场的土鳖虫样品中4种黄曲霉毒素含量进行分析检测，均检出黄曲霉毒素。刘晶晶等[24]采用HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对3种含土鳖虫中成药(24批)中黄曲霉毒素进行分析检测，发现其中21批检出黄曲霉毒素，检出率为87.5%。提示，以土鳖虫为例的中药动物药中黄曲霉毒素污染应引起生产企业和药品监管部门的高度重视。

5.2 毒性

近年来，随着中药不良反应报道不断增多，中药潜在毒性受到日益关注。人体服用中药土鳖虫后，可能发生皮肤过敏、腹痛、全身乏力等中毒症状。王雨等[25]从106篇不良反应/事件的文献报道中筛选涉及含动物药组分(土鳖虫、全蝎与蜈蚣)的中成药92例，临床不良反应表现为皮肤及其附件、神经系统、循环系统，提示可能与动物药毒性有关。

目前关于中药土鳖虫毒性成分的研究报道很少。传统中医用药时，将生土鳖虫使用文火焙干后得到炒土鳖虫，可以起到降低毒性、提高药效的作用。赵明会等[26]首次制定了炒土鳖虫规范化炮制工艺和炒土鳖虫饮片的质量标准研究，为推动动物药土鳖虫产业化、功能化开发奠定了基础。

6 总结与讨论

土鳖虫作为一种传统中药动物药，具有破血逐瘀，续筋接骨的功效。对跌打损伤，筋伤骨折，血瘀经闭，产后瘀阻腹痛，癥瘕痞块的患者有显著的治疗效果。笔者对近年来中药土鳖虫的人工养殖技术、真伪鉴别、化学成分、临床药理、有害物质及毒性等五个方面的研究进行归纳总结，发现土鳖虫的致毒成分和致毒原理尚未明了，关于土鳖虫致毒机理的研究报道也很少，这将是未来科研学者需要攻克的重点和难点。此外，吴巧凤等[4]采用真空冷冻干燥和超微粉碎等现代制药工程技术，成功研制出富硒土鳖虫冻干粉胶囊制剂，开创了土鳖虫多功能产品的研发先河。笔者预测，开发土鳖虫相关新剂型产品或将成为未来科研热点。