M2BPGi在原发性肝癌患者血清中的表达及其与预后的相关性

据世界卫生组织报道，原发性肝癌是世界六大恶性肿瘤之一，其死亡率在癌症中排列第二。原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率非常高

。原发性肝癌早期症状不明显，大部分患者就诊时已处于中晚期，即使早期治疗的患者，由于在治疗过程中，癌症易复发和转移，仍然导致患者预后不良率较高

。据研究统计，我国原发性肝癌患者术后5年生存率仅10%左右

。Mac-2结合蛋白是一类糖蛋白，该蛋白由含7个N糖基的单体组成，可以聚集成大的环状或线状结构，在多种癌症、炎症性疾病中明显升高

。Mac-2结合蛋白聚糖异构体(Mac-2 binding protein glycan isomer，M2BPGi)是Mac-2结合蛋白另一种存在形式，具有肝脏特异性，能更好反映肝脏纤维化进展。高敏等

研究发现在乙型肝炎肝纤维化中，M2BPGi水平随肝纤维程度加重而升高。本研究拟探讨M2BPGi在原发性肝癌患者血清中的变化及其与预后的关系，旨在为预测原发性肝癌的预后提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院在2018年1月至2019年12月期间收治的原发性肝癌患者100例(原发性肝癌组)、慢性乙型肝炎患者72例(慢性乙型肝炎组)为研究对象。原发性肝癌组中男59例，女41例，年龄35～76岁，平均(56.86±10.81)岁；肿瘤直径≤5 cm 41例，肿瘤直径>5 cm 59例；根据肿瘤个数，单发22例，多发或弥漫性78例。慢性乙型肝炎组中男40例，女32例；年龄35～76岁，平均(57.02±11.06)岁。纳入标准：①符合原发性肝癌病理诊断指南(2015年版)

；②慢性乙型肝炎诊断标准参照2015年《慢性乙型肝炎防治指南》

；③患者年龄35～76岁；④患者之前未接受任何抗癌治疗；⑤同意随访并配合此次试验者。排除标准：①合并其他恶性肿瘤患者；②合并严重肾功能障碍患者；③ 合并有严重感染性疾病患者；④合并有自身免疫性疾病患者；⑤其他肝炎病毒感染者；⑥精神异常患者；⑦酒精性脂肪肝患者。选取同时期本院体检结果健康者100例为对照组，男54例，女46例，年龄35岁～76岁，平均(56.97±10.98)岁。原发性肝癌组、慢性乙型肝炎组及对照组性别、年龄比较差异无统计学意义(

>0.05)，具有可比性。本研究通过本院伦理委员会批准，患者及家属知情并签署知情同意书和临床研究协议书，研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》。

1.2 标本采集 对所有研究对象清晨空腹时采取静脉血4～5 ml装于采血管中，静置20 min后，4℃，3 500 r/min，离心15 min，留上清，冻存于-80℃冰箱中，待测。

气候突变表示气候从一种稳定态跳跃式地转变到另一种稳定态的现象，它是普遍存在于气候变化中的一个重要现象。图3为天峻地区1961-2017年春季干旱指数M-K突变检验，从分析的结果来看，相对湿润度指数(M指数)和标准化降水指数(SPI指数)的M-K突变检验是一致的，在上下两条±1.96(α=0.05)的置信线内，两个指数的UF与UB两条曲线均在1966年和2016出现交叉点，UF曲线在1966年的交叉点后向负方向变化，并低于-1.96，说明交叉点后减小趋势显著，因此认为1966年为突变年，而2016年的交叉点是不是突变点，有待需要更长序列的数据验证。

1.3 检测血清M2BPGi水平 采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清M2BPGi水平，操作步骤严格依据M2BPGi ELISA试剂盒(货号：JCSW1945，上海机纯实业有限公司)进行，使用Multiskan MK3酶标仪进行。

(4)对老旧管线的清管作业，应事先根据管道实际情况，有选择地在适当位置断管，摸清管道内黑粉情况，然后选择适当的清管器，并采取多段清管的方式清除管道内黑粉。

2.3 M2BPGi与肝纤四项的相关性分析 Pearson分析显示，原发性肝癌患者血清M2BPGi与HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相关(

<0.05)，见表3。

1.5 随访 对原发性肝癌患者进行随访1年，根据患者病情分为预后良好组75例和预后不良组25例，预后不良指患者病情复发、癌细胞转移或死亡。随访方式为入户、电话随访，或邀请患者入院检查，每两个月随访1次。

2 结果

2.1.2 混播禾草种类对混播植物POD活性的影响 A2处理禾草POD活性最高，其次是A3处理。其中，A2处理禾草POD活性分别比A1，A3和A4处理高250.04%，20.22%和350.42%倍，差异均达极显著水平(P<0.01)；A3处理禾草POD活性分别比A1和A4处理高191.18%和274.68%(P<0.01)。A1和A4处理之间差异不显著(表1)。A1处理下苜蓿POD活性比A4处理高19.47%(P<0.01)；A3处理POD活性比A4处理高16.40%(P<0.05)；其余处理之间无显著差异。

2.2 预后良好与预后不良原发性肝癌血清M2BPGi和肝纤四项水平比较 原发性肝癌的不良预后与患者的肿瘤大小、肿瘤的个数均相关(χ

=6.480、62.720，

=0.011、0.000)。见表2。

1.4 检测血清中肝纤四项水平 采用日立7170型全自动生化分析仪检测透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)水平。

2.1 血清M2BPGi和肝纤四项水平比较 见表1。

2.4 ROC分析M2BPGi对原发性肝癌不良预后的预测价值 M2BPGi对原发性肝癌不良预后诊断的曲线下面积AUC为0.883，灵敏度为84.00%，特异度为81.30%，截断值为2.65 mg/ml。

现代汉语词汇的重叠一般不儿化，但在历史上却并非如此。动词的重叠形式后面加‘儿’的形式，常常见于明、清时期的白话文学作品里，从明代中叶的小说《西游记》、《金瓶梅》来看，动词重叠儿化达到高潮。如：

3 讨论

2016年全球肝癌患者已达到了100万例，且每年的发病率依然在持续升高，严重威胁人民的身体健康

。原发性肝癌患者早期无明显临床表现，晚期时表现为肝部刺痛或持续性钝痛，并伴随腹胀等，多数患者就诊时原发性肝癌已发展至中晚期，导致患者错失最佳治疗时期，因而大多患者术后预后差。因此临床上急需探寻一种分子标志物用于原发性肝癌患者预后判断，以期为临床治疗决策和改善患者不良预后提供理论依据。

在我国，长期被肝炎病毒感染(以乙型肝炎或丙型肝炎病毒为主)的患者，后期易发展为肝纤维化、肝硬化及肝癌

。肝纤维化是肝细胞外基质过度堆积为主的慢性炎症过程，是肝硬化的前期阶段

，肝纤四项(HA、PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C)是肝细胞外基质的主要组成成分。研究发现肝纤维化及肝硬化时，Ⅳ-C被大量沉积在细胞外基质，血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平在肝癌患者中明显升高，且与肝癌的严重程度呈正相关

。本研究发现在对照组、慢性乙型肝炎组、原发性肝癌组中，血清HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN水平依次显著升高，提示慢性乙型肝炎、原发性肝癌患者均存在肝纤维化。

M2BPGi是一种新的血清肝纤维化生物标志物。M2BPGi是由Mac-2结合蛋白与紫藤多花凝集素组成，二者结合后，Mac-2结合蛋白结构发生改变。紫藤多花凝集素阳性Mac-2结合蛋白检测纤维化的原理是利用紫藤多花凝集素检测蛋白质表面糖链变化，对检测肝纤维化是一种无创、可靠的生物标志物。Mac-2结合蛋白最早被发现能与半乳糖凝集素3结合形成糖化蛋白，导致Mac-2结合蛋白的质和量都发生变化，猜测可能原因是糖链修饰蛋白结构造成的

。后来研究显示，N-乙酰半乳糖基化修饰的紫藤多花凝集素也可与Mac-2结合蛋白形成紫藤多花凝集素阳性Mac-2结合蛋白，且对肝纤维化的不同分期具有较高的诊断价值

。高敏等

研究发现紫藤多花凝集素对识别肝纤维化过程中，紫藤多花凝集素阳性Mac-2结合蛋白的水平不受其他器官组织分泌的M2B结合蛋白的影响，具有肝脏特异性，因此可反映肝纤维化的程度。研究显示M2BPGi对晚期肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌术后的发展和复发具有预测价值

。王伟等

研究发现慢性丙型肝炎肝纤维化患者血清M2BPGi水平明显高于丙型肝炎无肝纤维化患者，且M2BPGi对丙型肝炎患者肝纤维化具有较好的诊断价值。肝纤维化是“肝炎-肝纤维化-肝硬化-肝癌”这一发展过程的关键环节

。本研究发现原发性肝癌组患者血清M2BPGi水平显著高于慢性乙型肝炎组和正常健康人，慢性乙肝病组患者血清M2BPGi水平显著高于正常健康人，提示M2BPGi可能参与原发性肝癌的发生。肝炎后肝硬化是原发性肝癌发生的危险因素。另外Ueno等

研究报道，M2BPGi可作为评估胆道闭锁肝硬化患者的预后指标，因为患者发生肝硬化后，其肝纤维化程度仍可能发生变化。预后不良组原发性肝癌患者血清M2BPGi显著高于预后良好组原发性肝癌患者，提示M2BPGi可能与原发性肝癌患者预后不良密切相关，猜测M2BPGi在不同预后的原发性肝癌患者血清有变化可能是因为原发性肝癌患者肝纤维化程度可能仍在变化

。进一步研究发现M2BPGi与HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均呈正相关，提示M2BPGi参与肝癌患者肝纤维化进程。M2BPGi对原发性肝癌不良预后诊断的曲线下面积AUC为0.883，灵敏度为84.00%，特异度为81.30%，提示M2BPGi对原发性肝癌预后不良可能具有较好的评估价值，应加强对M2BPGi水平变化进行监测。

综上所述，血清M2BPGi水平原发性肝癌中呈上调，对原发性肝癌预后不良具有较好的评估价值。但本研究是单中心回顾性分析，缺乏前瞻性临床研究。M2BPGi与原发性肝癌的疾病发生的相关机制仍有待进一步研究。

[1]Akinyemiju T,Abera S,Ahmed M,

.The Burden of Primary Liver Cancer and Underlying Etiologies From 1990 to 2015 at the Global,Regional,and National Level: Results From the Global Burden of Disease Study 2015[J].JAMA Oncol,2017,3(12):1683-1691.

[2]Valery P C,Laversanne M,Clark P J,

.Projections of primary liver cancer to 2030 in 30 countries worldwide[J].Hepatology,2018,67(2):600-611.

[3]Xu Y,Wang B,Zhang F,

.Long non-coding RNA CCAT2 is associated with poor prognosis in hepatocellular carcinoma and promotes tumor metastasis by regulating Snail2-mediated epithelial-mesenchymal transition[J].Onco Targets Ther,2017,10(1):1191-1198.

[4]郑毅,白霞,许鑫,等.原发性肝癌肝切除术后严重并发症的危险因素分析[J].广西医科大学学报,2017,34(9)：1313-1316.

[5]杨以良,崔园园,胡月,等.Mac-2结合蛋白糖基化异构体在慢性肝病诊断中的作用[J].临床肝胆病杂志,2016,32(12):2395-2398.

[6]高敏,刘蓉,张庆.血清miRNA-122和紫藤多花凝集素阳性Mac-2结合蛋白对慢性病毒性肝炎患者肝纤维化程度的预测价值[J].临床肝胆病杂志,2018,34(4):764-769.

[7]中国抗癌协会肝癌专业委员会,中华医学会肝病学分会肝癌学组,中国抗癌协会病理专业委员会,等.原发性肝癌规范化病理诊断指南(2015年版)[J].中华肝胆外科杂志,2015,21(3):865.

[8]中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)[J].中华肝脏病杂志,2015,23(12):888-905.

[9]盛庆寿,古训东,许峰铭.中医药防治原发性肝癌的表观遗传学研究进展[J].中西医结合肝病杂志,2017,27(6):382-384.

[10]Jin L,Zhang T,Chen X.The trends in incidence of primary liver cancer caused by specific etiologies: Results from the Global Burden of Disease Study 2016 and implications for liver cancer prevention[J].J Hepatol,2019,70(4):674-683.

[11]钱宏波,钱媛,赵汉东.HA、PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C在原发性肝癌诊断及判断手术预后中的价值[J].胃肠病学和肝病学杂志,2016,25(11):1286-1288.

[12]方未英,徐兰,顾婷玉,等.肝纤维化治疗策略的研究进展[J].医学研究杂志,2019,48(4):6-9.

[13]张明哲,常文龙,周雪,等.血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-c检测在肝癌诊断及术后的价值分析[J].现代消化及介入诊疗,2018,23(6):35-38.

[14]王泽瑞,许文萍,谢渭芬.紫藤凝集素阳性Mac-2结合蛋白在慢性肝病诊治中的应用现状[J].中华消化杂志,2017,37(8):571-573.

[15]Toshima T,Shirabe K,Ikegami T,

.A novel serum marker,glycosylated Wisteria floribunda agglutinin-positive Mac-2 binding protein (WFA(+)-M2BP),for assessing liver fibrosis[J].J Gastroenterol,2015,50(1):76-84.

[16]Nagata H,Nakagawa M,Nishimura-Sakurai Y,

.Serial measurement of Wisteria floribunda agglutinin positive Mac-2-binding protein is useful for predicting liver fibrosis and the development of hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis C patients treated with IFN-based and IFN-free therapy[J].Hepatol Int,2016,10(6):956-964.

[17]Ura K,Furusyo N,Ogawa E,

.Serum WFA(+) -M2BP is a non-invasive liver fibrosis marker that can predict the efficacy of direct-acting anti-viral-based triple therapy for chronic hepatitis C[J].Aliment Pharmacol Ther,2016,43(1):114-124.

[18]王伟,马玉萍,马海婷,等.血清M2BPGi联合MRI-DWI预测丙型肝炎患者肝纤维化的临床价值[J].实用医学杂志,2018,34(2):293-296,300.

[19]吕春燕,裴豪,戴亚萍,等.血清AFP、AFP-L3及PIVKA-Ⅱ联合检测在原发性肝癌诊断中的价值[J].标记免疫分析与临床,2019,26(7):1159-1162.

[20]Ueno T,Kodama T,Noguchi Y,

.Serum Mac-2-binding protein (M2BPGi) as a marker of chronological liver fibrosis in biliary atresia patients with cirrhosis[J].Pediatr Surg Int,2019,35(10):1065-1070.

[21]刘春红,张丹图,卢宠茂,等.ALPPS在合并轻中度肝纤维化肝细胞癌患者中的应用分析[J].中华肝胆外科杂志,2019,25(11):806-808.