鸡心包积液综合征诊断与防控

朱庆贺 苗艳 兰世捷 张蕾 田秋丰 张红 孟维珊 金振华 刘秋瑾 薛沾枚 刘雪松

鸡心包积液综合征（hydropericardium Syndrome，

HPS），又称鸡安卡拉病，是由禽腺病毒4型（Fowl adenovirus serotype-4，FAdV-4）引起的一种以心包积液、肝炎和肾炎为主要临床特征的鸡的新发传染病。2015年该病开始在我国暴发并在全国多个省市地区蔓延，发病率和致死率均较高，严重危害养鸡业的发展，给养鸡业造成了巨大的经济损失。

1 临床症状

病鸡表现出不同的症状，包括嗜睡、蜷缩在一起、羽毛竖起、食欲不振、排黄色粘液状粪便、鸡只体重下降等。

2 病理剖检变化

心包积液是最明显的肉眼病变。肝脏肿胀、易碎，呈黄色，伴有坏死和斑片状出血。心包囊呈气球状，在其内可观察到透明的稻草色液体。肾脏苍白、肿胀、易碎，肾小管中有尿酸盐。此外，在大多数病死鸡中可以观察到脾肿大和胸腺萎缩。临床病理学参数显示，病鸡出现严重的贫血，且所有血液指标都显著降低。

3 诊断

根据该病的临床症状和流行特点可作出初步诊断，通过实验室检测进行确诊。

3.1 电镜检查

透射电子显微镜（Transmission Electron Microscopy，

TEM）可以对病毒、细菌、原生动物和真菌进行超微结构检查，在微生物诊断中发挥着重要作用。透射电镜观察到，从感染病例中纯化的、阴性染色的肝匀浆、肝细胞或病毒颗粒中存在离散的二十面体腺病毒样颗粒，这表明FAdV-4是HPS的致病因子。在被感染的肝细胞细胞核中发现的腺病毒颗粒具有典型的腺病毒外观，无包膜、六边形、二十面体，直径约75 nm，这有助于确诊该病。

3.2 病毒的分离培养

从血液、体液或被感染有机体的组织中分离病毒是诊断FAdV-4感染的金标准。鸡胚、鸡胚原代肾细胞、鸡胚肾细胞、鸡胚肝细胞、鸡胚成纤维细胞、鸡肝癌细胞系（LMH）和QT-35细胞均可用于分离FAdV-4。

3.3 分子生物学检测方法

目前，已建立了多种用于检测FAdV-4的分子生物学检测方法，包括PCR、荧光定量PCR、环介导等温扩增（LAMP）等。PCR是用于检测FAdV-4的最主要分子生物学方法，禽腺病毒六邻体（Hexon）基因包括2个保守区（P1和P2）、4个可变区（L1～L4），是用于研究检查禽腺病毒PCR诊断技术的主要基因。

3.4 血清学检测方法

用于检测FAdV-4的血清学方法包括琼脂扩散试验、病毒中和试验（VN）、间接免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。基于制备的超免血清，通过琼脂凝胶免疫扩散、琼脂凝胶沉淀试验和间接免疫荧光分析可在肝脏匀浆提取物或不同组织中检测到FAdV-4。可以通过间接血凝法检测疫苗接种后的抗体效价和血清阳性率和被感染鸡的HPS试剂抗体。VN试验是一种更为灵敏、准确的方法，最早被用于区分FAdV-4血清型、评估疫苗诱导的抗体反应以及诊断FAdV-4感染情况，但因VN试验较为昂贵且耗时，限制了该方法的使用。ELISA法是实验室通常用于早期诊断的一种良好技术，因灵敏度较高，适用于批量抗体标本检测，因此被广泛应用，也是目前生产上检测FAdV-4的主要技术。

4 防控

鸡心包积液综合征自2015年在我国暴发以来，已严重危害我国养鸡业的发展，给养鸡业带来了巨大的经济损失。研究人员采用了各种策略来预防和控制HPS。良好的饲养方式、对场所和设备进行严格的消毒、充分的通风、限制养殖场工作人员或访客的活动等，均可显著降低该病感染的机会。在饮用水中添加浓度为0.07%～0.10%的碘伏溶液可有效降低肉鸡HPS的病程和死亡率。目前，尚无治疗该病的特效药物和具体治疗方法。临床上用抗生素预防继发性细菌感染，疫苗接种仍是预防FAdV-4的最主要方式。科研人员已研发了多种疫苗用于该病的预防，包括弱毒疫苗、灭活疫苗和基因工程疫苗等。

在HPS暴发的早期阶段，用受感染的肝脏匀浆制备的灭活疫苗是控制该病的主要手段，该方法被证明能够有效控制FAdV-4的传播，但由于强毒株灭活不当、疫苗生產期间卫生条件差、缺乏适当的佐剂等因素可能会导致该病传播扩散。因此，为将传播风险降到最低，建议该病毒应在特异性无病原体的鸡胚蛋和细胞培养物上繁殖，SPF鸡胚蛋和细胞培养物应具有严格的生物安全性和较高的卫生标准，是生产和开发灭活疫苗、减毒活疫苗的更好选择。