自体富含血小板血浆应用于慢性皮肤窦道的临床观察

余祖改 高娅 孟庆南 周健 郭鹏飞 崔正军

郑州大学第一附属医院烧伤与修复重建外科（郑州450052）

随着富含血小板血浆（PRP）的研究越来越深入，自体PRP 的应用领域也越来越广泛，如骨科、整形美容、眼科等方向。有研究发现自体PRP 凝胶对肉芽的生长有着很强的促进作用，这种凝胶释放高浓度的生长因子，刺激细胞增殖和分化，封闭伤口，加速止血，修复受损组织。已经有研究表明自体PRP 应用于创面能减轻患者的疼痛，国内也有相关研究发现［1］PRP 能促进窦道的生长，而本研究进一步发现自体PRP 对促进窦道创面的愈合有着显著的效果。常规换药的治疗方法，住院周期长，花费也高，病人的痛苦也大。而使用自体PRP后不仅能减轻患者换药时的疼痛，而且能大大缩短窦道创面愈合的时间，同时还可以减轻患者经济负担。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究选取了2017年12月至2020年12月郑州大学第一附属医院烧伤与修复重建外科60 例窦道创面的患者，其中男34 例，女26例，年龄15～64岁；创面类别：压疮治疗后形成的窦道23 例，外伤术后形成的窦道18 例，静脉性溃疡治疗后形成的窦道13 例，重度烧伤治疗后残余创面形成的窦道6 例。

1.2 纳入与排除标准纳入标准：（1）每个患者窦道都经过至少4 周的常规换药效果不明显；（2）所有窦道均不见脓性渗出；（3）窦道创面无明显坏死组织；（4）所有患者均经过知情同意。排除标准：（1）入组前正在接受激素或免疫抑制治疗；（2）患有出血性疾病、恶性肿瘤、严重营养不良或严重自身免疫性疾病；（3）患有任何形式的凝血功能障碍。

1.3 治疗方法

1.3.1 富含血小板血浆的制备根据窦道的大小用5 mL 肝素锂管抽取适量的血液（30 mL 或40 mL），一般采集的部位为肘正中静脉：（1）将肝素锂管置入离心机中进行第一遍离心，离心力400 ×g，离心时间10 min；（2）离心后肝素锂管内血液分为三层，最上层呈淡黄色为血清，最下层红色为红细胞，中间白色薄薄一层为PRP 层。用特制的针头去除适量底层红细胞；（3）再次将去除红细胞后的肝素锂管放入离心机中离心，离心力800 ×g，离心时间10 min；（4）离心后肝素锂管内血液再次分为三层，最上层呈淡黄色为血清，最底下红色为红细胞，用特制针头去除适量上层血清；（5）将去除血清后的血液轻轻摇晃使其混合均匀置入灭菌后的弯盘里，将3 或4 支（具体根据抽取的血液量）凝血酶配2 mL 0.9%氯化钠均匀注入弯盘的PRP 里，静置5 min 后得到富含血小板血浆［2］。

1.3.2 窦道的处理将窦道用碘伏消毒后，然后用无菌盐水清洗干净，用镊子搔刮窦道至轻微渗血。实验组处理（PRP 组）：用注射器将制作好的PRP 凝胶注入窦道中，再用新型敷料美皮康银（保赫曼）覆盖窦道口，最后外层用透明薄膜完全封闭；间隔7 d 后打开，记录窦道愈合情况，窦道未愈合者再次行PRP 注射，即重复上述过程操作一次，7 d 为一个治疗周期，直至窦道完全愈合。对照组：用凡士林油纱引流，外层无菌纱布包扎固定，隔一天换药1 次，7 d 左右记录一次创面愈合情况，直至创面完全愈合。

1.4 评价指标

1.4.1 创面愈合率在每次换药后使用镊子探查窦道的深度，再用无菌标尺进行测量，每次评估有一名高级职称医师进行操作。以创面完全上皮化作为完全愈合的标志，收集首次治疗后7、14、21 和28 d 窦道深度数据，计算窦道的愈合率。窦道的愈合率=（原始深度⁃未愈合深度）÷原始深度×100%

1.4.2 换药次数制备自体PRP 均由同一名医师进行操作，分别在7、14、21、28 d，统计两组患者换药次数。

1.4.3 窦道治疗的感染率分别在初次处理前，再开始治疗前及第7 天换药时取两组患者窦道分泌物进行细菌培养，并根据细菌培养结果统计阳性率。

1.5 统计学方法利用统计学软件SPSS 20.0 进行统计学分析。符合正态分布的计量资料数据以表示，组间比较两独立样本t检验、重复测量方差分析，感染率使用Fisher 精确分析。计数资料以例（%）表示。P< 0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 创面愈合率患者基本信息统计分析见表1。第一次换药后7、14、21 和28 d，自体PRP 组患者窦道愈合率均明显高于常规换药组，并且在换药两次后自体PRP 组窦道愈合率达到93%（P< 0.05），见表2。

表1 患者基本信息统计分析Tab.1 Statistical analysis of basic patient information 例

表2 两组窦道患者换药后各时间点创面愈合率Tab.2 Wound healing rate of the two groups of sinus patients at each time point after dressing change %

2.2 换药次数在7、14、21、28 d 时自体PRP 组患者换药次数分别为1 次、2 次、3 次、4 次（28 d 后所有患者痊愈），常规换药组换药次数分别为3 次、6 次、9 次、12 次，可以表明，自体PRP 组患者换药次数明显少于常规换药组。

2.3 窦道治疗的感染率对两组数据使用Fisher精确检验的统计学方法，结果发现在治疗的第7 天时，PRP 组感染感染率明显低于常规换药组（P<0.05），见表3。

表3 两组治疗后感染率Tab.3 Infection rate after treatment in 2 groups

2.4 典型图片见图1。

图1 典型图片Fig.1 Typical picture

3 讨论

慢性皮肤窦道创面在临床较为常见，由于其创面内病理性炎症反应状态、低氧环境、老化的肉芽覆盖以及反复感染的情况，使得治疗的难度增加。目前对于这种慢性皮肤窦道的普遍的治疗方式有以下几种：一是常规的换药治疗，这种方式治疗周期长，创面会反复感染；二是封闭式负压引流治疗，其治疗方式优点是通过持续的引流降低炎症反应及细菌的滋生，使得创面愈合时间缩短，缺点就是花费较高，同时对于细长较深、骨外露以及肌腱外露的窦道不大适用；三是手术治疗，彻底的清创，然后局部皮瓣覆盖，能显著缩短窦道愈合时间，缺点就是对患者二次伤害较大，花费更高［3-4］。

PRP 对创面愈合的影响主要归因于其释放各种生物活性分子，包括生长因子、趋化因子和细胞因子，这些分子储存在血小板中，可以促进血管生成，调节细胞外基质，加速细胞的募集、增殖和分化。除了生长因子外，PRP 还包含许多重要的蛋白，如纤维蛋白，这些蛋白可能影响细胞外基质的重塑，为组织再生提供支架，并控制生长因子从血小板的稳态释放。此外，PRP 在激活时含有多种抗菌蛋白。体外研究表明，PRP 对肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌等具有特异性抗菌活性。PRP 的抗菌作用在使用后能立即显现。近年来，巨噬细胞炎症蛋白（macrophage inflammatory protein，MIP）⁃1α、MIP⁃1β、IL⁃4、IL⁃10 和IL⁃13 等细胞因子对白细胞在免疫调节、抗感染和抗炎症中的作用进行了越来越多的研究。此外，白细胞可能促进血管内皮生长因子的产生，而血管内皮生长因子可能参与血管生成过程。这种作用机制使得PRP 在应用关于窦道创面的中不仅能够达到填塞空腔的效果，而且也会促进上皮化，同时还具有一定的抗感染作用［2，5］。

本研究目的是通过与常规换药进行比较，证实了PRP 凝胶在治疗慢性皮肤窦道有很好的治疗效果。本研究发现PRP 治疗的优点在于：（1）能显著缩短慢性窦道的治愈时间；（2）制备的PRP 来自自身，不存在免疫排斥反应；（3）因PRP 自身具有抗感染的效果，慢性窦道只要没有明显的坏死组织覆盖以及脓性分泌物，就能直接用PRP 进行治疗，不会出现感染加重的情况；（4）制备PRP 的操作简单；（5）能减少换药次数，从而减轻患者换药时的痛苦［6］。

与此同时，PRP 也有一些自身的不足，不仅制备方式上还没有统一的标准，同时对于一些复杂潜行慢性窦道不适用。但笔者认为PRP 应用于慢性窦道创面效果确切，成本较低，适合在医院广泛推广。