血清miR-210水平与妊娠期高血压疾病患者不良妊娠结局的相关性

刘洋 樊天云 封淼

（南阳市第一人民医院产二科，河南 南阳 473000）

妊娠期高血压疾病（Hypertensive disorders in pregnancy，HDP）在妇产科发病率较高[1]，对患者心、肾、肝等重要器官均可造成一定损伤，严重者可引起多器官组织功能衰竭。同时，HDP会增加胎盘早剥、术后感染等不良妊娠结局风险，甚至可危及母婴生命安全[2]。因此，探索与HDP不良妊娠结局有关的因素，并实施针对性早期监测与干预尤为关键。研究表明，在HDP发展过程中，免疫因素较为重要[3]。

微小核糖核酸（miRNA）是一种内源性非编码 RNA，可调节多种基因表达，参与免疫应答、转录调控等[4]，对人体生理活动产生影响。其中miR-210是一种常见miRNA，参与调控细胞的生长、免疫应答，可作为子痫前期妊娠的潜在诊断标志物[5]；miR-210异常表达也可能对诊断 HDP有一定价值[6]。但miR-210是否参与了HDP不良妊娠结局病理过程尚不明确。基于此，本研究重点分析血清 miR-210水平与HDP患者不良妊娠结局的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究的执行获得医院伦理委员会批准同意，前瞻纳入2018年5月至2019年5月我院收治的93例HDP患者作为研究对象，患者与家属对此次研究知情同意。研究对象年龄24-39岁，平均年龄 28.10±3.23岁；孕前体重指数 18.12-25.97 kg·m-2，平均孕前体重指数 22.20±0.48 kg·m-2；分娩孕周32-38 w，平均分娩孕周35.40±1.11 w；疾病类型：妊娠期高血压35例，子痫前期15例，慢性高血压伴子痫前期11例，慢性高血压32例。

纳入标准：符合《妊娠期高血压疾病诊治指南（2015）》[7]中HDP诊断标准；妊娠期首次出现高血压；单胎妊娠。

排除标准：病情严重需要终止妊娠；合并肾脏、肝脏疾病；合并其他妊娠并发症，如妊娠期糖尿病；子痫家族史；合并病毒感染。

1.2 方法

1.2.1 基线资料收集

收集基线资料，包括年龄、孕前体重指数、分娩孕周、疾病类型等。

1.2.2 血压检测方法

使用电子血压计（飞利浦，BP700C型）测定患者舒张压、收缩压并比较。

1.2.3 miR-210检测

采集2 mL空腹静脉血，常温静置30 min，3000 r·min-1离心（半径 12 cm）10 min，-80℃下保存待测。加入1 mL的Trizol RNA，提取RNA，使用紫外分光光度计对 RNA总纯度进行检测达标（纯度良好区间范围为 1.8-2.0）后，使用 Takara反转录试剂盒将总RNA反转录为cDNA，正向引物序列：5'-CAATAACTCTCCGTGTGACAGC-3'，反向引物序列：5'-TATGGTTGTTCTCGTCTCCTTCTC-3' ，长度为 77 bp，存于 4℃冰箱内，使用 Applied Bioststems 7500实时PCR系统进行扩增和基因型检测，反应条件：95℃预变性3 min，95℃变性12 s，60℃复性40 s，72℃延伸20 s，持续40个循环。重复三次取平均值，采用2-△△Ct法计算血清miR-210 相对表达量，即 △ Ct=Ct（miR-210）-Ct（U6）。

1.2.4 不良妊娠结局评估方法

根据《妇产科学第8版》[8]标准评估，包括新生儿不良结局（胎儿窘迫、宫内发育迟缓、新生儿感染、新生儿窒息等）与产妇不良结局（早产、胎盘早剥等）。按照妊娠结局分为不良妊娠结局组和对照组（无不良妊娠结局）。

1.3 统计学方法

采用SPSS24.0软件进行数据处理，计量资料均经Shapiro-Wilk正态性检验，正态分布以均数±标准差（±SD）表示，组间用独立样本t检验；计数资料用百分比表示，采用χ2检验；血清miR-210表达水平与HDP患者不良妊娠结局的相关性采用 Logistic回归分析；绘制受试者工作曲线（Receiver operator character，ROC）得到曲线下面积（Area under the cure，AUC），检验血清miR-210表达水平检测用于HDP患者不良妊娠结局预测的价值，AUC值＞0.9表示预测性能较高，0.71-0.90表示有一定的预测性能，0.5-0.7表示预测性能较差；P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不良妊娠结局发生情况和基线资料

93 例HDP患者中21例妊娠结局不良，不良妊娠结局发生率为22.58%（21/93），其中，11例（52.38%）早产，9例（42.86%）胎儿窘迫，6例（28.57%）宫内发育迟缓，3例（14.29%）新生儿感染，2例（9.52%）新生儿窒息。

对比不良妊娠结局组与对照组的基线资料发现，两组年龄、孕前体重质量指数、分娩孕周、初产妇占比、疾病类型分布比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；不良妊娠结局组舒张压、收缩压、血清miR-210水平明显高于对照组 (P＜0.05)，见表1。

表1 两组基线资料比较（±SD）

表1 两组基线资料比较（±SD）

相关因素 不良妊娠结局组 对照组 t/ χ2 P例 21 72年龄（岁） 28.25±3.23 28.06±3.22 0.238 0.813孕前体重指数（kg·m-2） 22.15±0.52 22.21±0.47 0.503 0.617分娩孕周（w） 35.42±1.15 35.39±1.08 0.110 0.912初产妇 是 13（61.90） 48（66.67） 0.163 0.686否 8（38.10） 24（33.33）疾病类型妊娠期高血压 8（38.10） 27（37.50）0.276 0.964子痫前期 4（19.05） 11（15.28）慢性高血压伴子痫前期 2（9.52） 9（12.50）慢性高血压 7（33.33） 25（34.72）舒张压（mmHg） 103.07±6.12 96.01±5.19 5.264 ＜0.001收缩压（mmHg） 161.01±7.36 154.06±8.61 3.356 0.001 miR-210 5.48±0.79 3.73±0.35 14.626 ＜0.001

2.2 血清 miR-210与不良妊娠结局关系 Logistic回归分析

将血清miR-210表达作为协变量，将HDP患者妊娠结局作为因变量（1=不良妊娠结局，0=妊娠结局良好），初步经二元Logistic回归分析检验后，将其他基线资料（年龄、孕前体重指数、分娩孕周、初产妇、疾病类型、舒张压、收缩压）纳入，构建多元回归模型.

结果显示，校正各个资料之间的影响后，舒张压、收缩压、血清miR-210过表达均与HDP患者不良妊娠结局有关，可能是HDP患者不良妊娠结局的风险因子（OR＞1，P＜0.05），其中miR-210的风险因子OR值最大，且为18.488，可能作为独立风险因子，见表2。

表2 血清miR-210与不良妊娠结局关系Logistic回归分析结果

2.3 血清miR-210表达预测HDP患者不良妊娠结局风险价值分析

绘制ROC曲线发现，血清miR-210表达预测 HDP患者不良妊娠结局风险 AUC（0.800，95%CI=0.653-0.946）、标准误（0.075，P＜0.001）、cut-off值3.345、特异度0.903、灵敏度0.857、约登指数0.760，有一定预测价值，见图1。

图1 血清miR-210表达预测HDP患者不良妊娠结局风险ROC曲线图

3 讨论

HDP发病率高，对孕产妇和胎儿的影响均较大，可致孕产妇死亡[9]。HDP发病后，血压升高会引起小动脉痉挛，对胎盘供血产生影响，从而导致早产、胎儿发育迟缓等不良妊娠结局发生[10]。

本研究显示，HDP患者发生不良妊娠结局的风险较高。舒张压、收缩压高水平均可能是增加HDP患者不良妊娠结局风险的主要因素。血压水平控制效果不佳将影响患者的抗凝血和凝血功能，增加血管痉挛风险，内皮损伤越严重，对产妇及胎儿带来的不利影响也更为显著[11-12]。但是，血压水平高本身就是HDP患者主要病理特征，对妊娠结局的影响已被证实，且有部分患者可能存在血压水平控制理想，但是妊娠结局仍较差的情况，还需要研究其他可能的风险因子。

miR-210可在多种疾病中异常表达，包括恶性肿瘤、心血管疾病等[13-14]。研究发现，miR-210在HDP患者中过表达，且表达水平与HDP患者病情严重程度呈正相关[15]。可见，miR-210可能参与了HDP患者疾病的发生发展。本研究结果显示，不良妊娠结局组血清miR-210水平高于对照组。进一步经单项 Logistic回归分析后建立多元回归模型行多因素分析，结果显示，血清miR-210过表达与HDP患者不良妊娠结局有关。

可能的原因为：在HDP发病时，缺氧环境会诱导miR-210表达，造成17β-羟基类固醇脱氢酶1水平降低从而促进雌酮（E）转化为雌二醇（E2），因而miR-210过表达也会间接造成E2减少[16]。对于孕产妇，E2作用较大，可以舒张血管、抑制炎症反应，也利于减轻氧化因子造成的破坏[17]。而miR-210水平升高后，机体血管内皮损伤加重，将增加胎盘供血障碍，增加不良妊娠结局风险[18]。此外，miR-210过表达也会对VEGF诱导的细胞迁移造成一定的阻碍，从而导致血管再生障碍，对胎盘内血管样结构的生成产生刺激，增加不良妊娠结局风险[19]。不仅如此，miR-210对 VECF表达产生的影响也会对滋养细胞造成增殖分化的影响和侵入功能的障碍，从而降低胎盘血液供应，增加不良妊娠结局[20]。最后ROC曲线结果显示，血清miR-210表达预测HDP患者不良妊娠结局风险的AUC为0.800，有一定预测价值。但目前已知的miRNA种类繁多，除miR-210外，其他种类的miRNA是否也与HDP患者的不良妊娠结局有关尚待发现与验证。

综上所述，血清miR-210过表达可能与HDP患者不良妊娠结局相关，可增加不良妊娠结局风险，检测血清miR-210水平可预测HDP患者不良妊娠结局风险。