清热解毒中药治疗肝癌的作用机制研究进展*

王哲睿 潘洁露 喻 晓 张海燕 邢练军

上海中医药大学附属龙华医院脾胃病二科 (上海， 200032)

肝癌在全球癌症相关发病率和死亡率分别排名第6和第4，我国肝癌发病率及死亡率分别排名第4和第3，且肝癌新发病例率上升最快[1-3]。中医认为肝癌发病与气滞、血瘀、湿热等病理因素瘀滞肝络所形成的癌毒有关，清热解毒已成为治疗肝癌的重要方法之一。现代药理研究表明清热解毒中药治疗肝癌能减轻患者临床症状及体征，其机制与抑制肿瘤增殖及转移、联合化疗药物增强疗效、减轻化疗药物不良反应等有关[4-7]。本文对清热解毒中药治疗肝癌的作用机制进行综述。

1 抑制细胞增殖

肝癌细胞呈失控增殖，抑制肝癌细胞增殖是治疗肝癌的重要手段。鸦胆子油脂质体抑制肝癌HepG2细胞增殖，且呈剂量依赖性，其机制与抑制DNA合成、调控microRNA-95的表达、阻断G0/G1向S期发展有关[8, 9]。白花蛇舌草提取物熊果酸UA显著抑制了R-HepG2细胞的生长，且呈时间与剂量依赖性，其机制为阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡介导[10]。菊花提取物可以有效减弱异丙肾上腺素(ISO)对HepG2和MHCC97H细胞的有丝分裂作用，其机制是抑制ISO对肿瘤细胞的子β2受体激动，从而阻止MAPK/ERK1/2信号通路的激活[11]。

重楼提取物PS1和PS2可以抑制HepG2细胞增殖，促肝癌细胞凋亡，且呈剂量依赖性，其机制与激活p38/MAPK和JNK/MAPK信号通路、抑制ERK/MAPK和P13K/Akt信号通路有关[12, 13]。白头翁提取物AB4可抑制肝癌细胞SMMC- 7721增殖，诱导细胞凋亡和自噬，其机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号失活有关[14]。黄芩素能够抑制Bel7402和HepG2细胞增殖，诱导细胞凋亡，其机制与降低c-Myc在肝细胞癌中的表达、下调CD24的mRNA和蛋白表达有关[15]。藤梨根提取物能够抑制MHCC97H、MHCC97L、HepG2、SMMC7721、Huh7和Hep3B细胞增殖，且呈剂量依赖性，其机制是通过显著增强PCSK9表达，减少低密度脂蛋白水平从而降低肝癌细胞内总胆固醇浓度[16]。这些研究显示，鸦胆子、白花蛇舌草、菊花、重楼、白头翁、黄芩、藤梨根能够抑制肝癌细胞增殖。

2 诱导细胞凋亡

细胞凋亡是指基因调控的细胞自主有序的死亡过程，诱导肿瘤细胞凋亡是治疗癌症的重要方法之一。绞股蓝皂苷可以诱导肝癌HepG2、SMMC7721、Huh7细胞凋亡，且呈时间和剂量依赖性，其机制与扰乱细胞钙稳态从而触发钙离子依赖性细胞凋亡有关[17, 18]。鱼腥草提取物可诱导HepG2细胞凋亡，抑制其细胞增殖，其机制是通过激活HIF-1A、FOXO3和MEF2A等转录调节因子来诱导细胞凋亡[19]。黄芩苷通过激活内质网ATF6信号通路的分子靶点S2P，诱导HepG2和SMMC7721凋亡[20]，还可通过上调Bax和下调Bcl-2，从而抑制Bel-7402的体外增殖[21]。虎杖提取物白藜芦醇可以诱导SMMC-7721细胞凋亡，其机制与激活caspases 3和caspases 9并同时上调p-JNK表达和下调p-ERK表达相关[24,25]。金银花提取物可以诱导SMMC7721细胞凋亡，其机制与对于促凋亡ERK信号通路的激活超过了促生存AKT/mTOR信号通路的激活有关，且可抑制乙肝病毒复制[22, 23]。这些研究显示，绞股蓝、鱼腥草、黄芩、虎杖、金银花能够诱导肝癌细胞凋亡。

3 阻滞细胞周期

细胞周期是基因组DNA完成复制后均等地分裂成两个相似的细胞，分为G1、S、G2和M期，G0期属于细胞静止期，阻滞肿瘤细胞周期能有效抑制其分裂增殖。半枝莲提取物能够阻滞HepG2和R-HepG2细胞周期，其机制与抑制G2/M期细胞周期调控蛋白、细胞周期蛋白A1和cdc2的表达有关[26]。甘草提取物能够阻滞HepG2细胞于G2/M期，其机制是通过抑制STAT3的激活和降低细胞周期蛋白B1、CDK1/2和p27的水平[27]。研究表明，大血藤提取物能够阻滞肝癌HepG-2细胞于S期，且能诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖[28]。研究表明藤梨根提取物TEO可抑制BEL7402,、BEL7404和SMMC7721细胞生长并阻滞于G1期[29]，绞股蓝提取物能够阻滞Hep3B细胞于G0/G1期[30, 31]。这些研究显示，半枝莲、甘草、大血藤、藤梨根能够阻滞肝癌细胞周期。

4 抑制肿瘤细胞转移

肝癌患者预后差主要与恶性肿瘤细胞远端转移有关。多项研究证实藤梨根提取物能够抑制肝癌细胞转移，其机制之一是通过下调DLX2的表达抑制Hep3B、HepG2、SMMC7721、MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3细胞上皮-间质转化[32]，其二是抑制SKHep1细胞MAPK和FAK信号通路，降低PI3K/Akt活性和MMP-2蛋白水平[33]，其三是通过抑制HCCLM3、MHCC97H、MHCC97L、HepG2、SMMC7721、Huh7、Hep3B和HL7702细胞EP3表达，降低VEGF、EGFR、MMP2和MMP9的活化[34]。此外，藤梨根提取物还能与Huh7、HepG2和Hep3B细胞ATP结合囊相互作用抑制VEGFR2激酶活性，下调VEGFR2/Src/FAK/cdc42轴，进而降低细胞骨架微丝的形成，大剂量时藤梨根与索拉非尼具有协同化疗作用[35]。

白花蛇舌草提取物齐墩果酸和熊果酸能够抑制Huh7和HepG2细胞增殖和肿瘤转移的能力，并且能够调节肝功能，葡萄糖代谢和迁移相关的受体[36]。汉黄芩素能够抑制MHCC97L和PLC/PRF/5细胞迁移，其机制可能与抑制MMP-9活性有关[37]。野菊花乙醇提取物能够抑制MHCC97H转移，其机制是通过抑制MMP-2与MMP-9的表达和促进TIMP-1与TIMP-2的表达[38]。夏枯草提取物能抑制肝癌Huh-7 和HA22T细胞侵袭迁移，其机制与抑制 VEGF、VEGFR、EGFR和MMP-9的表达有关[39]。这些研究显示，藤梨根、白花蛇舌草、黄芩、野菊花、夏枯草能够抑制肝癌转移。

5 抑制血管生成

抑制肿瘤血管生成可以改变肿瘤微环境，减少肿瘤细胞血氧及营养物质的供给、改善化疗药物向肿瘤内部的传送、抑制肿瘤细胞的生长和转移等。藤梨根乙醇提取物能有效抑制H22细胞微血管的形成，其机制与下调血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达有关[40]。重楼提取物可抑制SMMC7721、PLC、HepG2、Hep3B和Bel7402中血管生成拟态(VM)的形成，其机制是通过阻断PI3k-Akt-Twist1-VE-cadherin通路而使VM形成受损，还能通过抑制Twist1启动子的转录激活和干扰导致VM阻塞[41]。青黛提取物靛玉红可以抑制肿瘤来源的内皮细胞Td-EC的血管生成，其与肿瘤组织缺氧、上皮-间质转化、癌症干细胞样细胞相关[42]。

6 其他

免疫功能在抑制肿瘤生长的过程中发挥重要作用，可认为与中医正气相关。半枝莲提取物能够改善免疫功能，其机制与增强NK细胞毒性、下调Treg细胞和Th17细胞，降低IL-10、TGF-β、IL-17A水平，同时提高IL-2和IFN-γ水平有关。此外，半枝莲提取物还能抑制HepG2体外增殖，且呈剂量依赖性[43]。牛蒡甙元可以诱导HepG2细胞自噬，其机制与通过抑制自噬通量与减少自噬途径，从而导致p62积累有关[44]。青黛提取物靛玉红通过抑制HepG2细胞中YB-1的核定位从而增加HepG2对放线菌素D的敏感性，放线菌素D能够抑制肿瘤细胞RNA的合成从而发挥抗肿瘤作用[45,46]。黄芩苷可协同增强纳秒脉冲电场(nsPEFs)诱导的QSG7701、MHCC97H和HCCLM3细胞消融，同时通过提高线粒体跨膜电位和减少ROS的生成，保护正常肝细胞免受nsPEFs的损伤[47]。马齿苋提取物显著降低了HepG2细胞活力和改变细胞形态[48]。

综上所述，近年研究显示藤梨根、白花蛇舌草、半枝莲、黄芩、绞股蓝等清热解毒类中药对肝癌有广泛的作用，涉及细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞转移、血管生成、免疫功能和自噬等方面。深入研究清热解毒类中药的作用特点，能够为中医药治疗肝癌提供更多的选择。值得一提的是，很多中药对肝癌细胞具有多重作用，如藤梨根、半枝莲、黄芩等，可以作用于肝癌发生、发展的不同环节，合理配伍使用这些中药将有可能进一步提高中医药治疗肝癌的临床疗效。