血清肺腺癌转移相关转录因子-1、叉头框转录因子M和神经生长因子表达水平与肺癌患者临床病理特征及肿瘤转移的关系

景建军，张云江，王 银

(川北医学院附属三台医院/三台县人民医院，四川 绵阳 621100)

肺癌发病率在恶性肿瘤中居全球首位，随着吸烟以及大气污染的日益严峻，肺癌患者呈递增趋势，晚期肺癌比例逐渐增加，腺癌取代鳞癌成为主要病理类型[1，2]。肺腺癌转移相关转录因子-1(MALAT-1)[3]、叉头框转录因子M1(FoxM1)[4]、神经生长因子(NGF)[5]与肿瘤转移密切相关。既往有研究[6]分析MALAT-1、FoxM1和NGF mRNA及蛋白表达与肺癌的关系，但血清MALAT-1、FoxM1和NGF表达水平与肺癌是否有关尚存在争议。本研究探讨血清MALAT-1、FoxM1和NGF表达水平与肺癌患者临床病理特征及肿瘤转移的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2017年10月至2020年6月我院收治的152例肺癌患者(肺癌组)，纳入标准：①符合非小细胞肺癌的诊断标准[7]；②病理类型为鳞癌或腺癌；③病例资料完整。排除标准：①继发性肺癌；②合并其他恶性肿瘤；③合并心血管、神经系统、免疫系统疾病。男94例，女58例，年龄47～79岁[(65.33±6.49)岁]；鳞癌86例，腺癌66例。吸烟指数≥400有104例；临床分期：Ⅰ期29例，Ⅱ期33例，Ⅲ期61例，Ⅳ期29例；癌胚抗原阳性98例，阴性54例；区域淋巴结转移97例，远处转移29例。选取同期55例健康志愿者(对照组)，男35例，女20例。年龄45～77岁[(63.48±6.82)岁]。本研究符合《赫尔辛基宣言》原则，不违背医学伦理，研究对象均知情同意，自愿参与研究。

1.2 方法①标本检测：肺癌组入院时采集外周静脉血5 ml，对照组体检时采集外周静脉血5 ml，3000 r/min分离血清，置于-20 ℃待检。血清MALAT-1、FoxM1和NGF均采用酶联免疫吸附法检测，MALAT-1试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司，FoxM1试剂盒购自上海谷研实业有限公司，NGF试剂盒购自上海劲马实验设备有限公司。BioTek 800 TS多功能酶标仪，购自美国伯腾仪器有限公司。按照试剂盒说明书检验。②资料收集：查阅医院电子病历系统，收集患者的临床病理特征。肿瘤转移特征：是否存在区域淋巴结转移(肺组织内、肺门、肺血管、支气管的淋巴结)，是否存在远处转移(骨、肝、脑)。根据血清MALAT-1、FoxM1和NGF水平的中位数，分为MALAT-1高水平与低水平组、FoxM1高水平与低水平组、NGF高水平与低水平组。分析血清MALAT-1、FoxM1、NGF高水平与低水平组的临床病理特征及肿瘤转移特征。随访至2021年4月，记录肺癌患者的总生存时间。

1.3 统计学方法应用SPSS 22.0软件分析数据。计量资料以均数±标准差表示，比较采用t检验；计数资料以n(%)表示，比较采用χ2检验；相关性分析采用Spearman秩相关分析；绘制生存曲线，进行Log rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清MALAT-1、FoxM1、NGF水平比较肺癌组血清MALAT-1、FoxM1、NGF水平均高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组血清MALAT-1、FoxM1、NGF水平比较 (pg/ml)

2.2 血清MALAT-1、FoxM1、NGF高水平与低水平组肺癌病理特征及肿瘤转移情况比较MALAT-1高水平组病理类型为腺癌、临床分期为Ⅳ期、有区域淋巴结转移、有远处转移的比例高于MALAT-1低水平组(P<0.05)。FoxM1高水平组临床分期为Ⅳ期、有区域淋巴结转移、有远处转移的比例高于FoxM1低水平组(P<0.05)。NGF高水平肺癌患者中临床分期为Ⅳ期、肿瘤低分化、有区域淋巴结转移、有远处转移的比例高于NGF低水平肺癌患者(P<0.05)。见表2。

表2 血清MALAT-1、FoxM1、NGF高水平与低水平组肺癌病理特征及肿瘤转移的差异比较 [n(%)]

2.3 血清MALAT-1、FoxM1、NGF水平与肺癌病理特征及肿瘤转移的相关性分析血清MALAT-1水平与病理类型、临床分期、区域淋巴结转移、远处转移呈正相关(P<0.05)；血清FoxM1水平与临床分期、区域淋巴结转移、远处转移呈正相关(P<0.05)；血清NGF水平与临床分期、区域淋巴结转移、远处转移呈正相关，与肿瘤分化程度呈负相关(P<0.05)。见表3。

表3 血清MALAT-1、FoxM1、NGF水平与肺癌病理特征及肿瘤转移的相关性

2.4 血清MALAT-1、FoxM1、NGF高水平与低水平患者生存分析本研究随访6～42个月。MALAT-1高、低水平患者的中位总生存期为27.3个月(6.3～42.0月)、37.9个月(15.5～42.0月)；FoxM1高、低水平患者的中位总生存期为31.8个月(6.3～42.0月)、38.6个月(14.2～42.0月)；NGF高、低水平患者的中位总生存期为31.8个月(6.3～42.0月)、37.9个月(20.0～42.0月)。见图1～图3。

图1 MALAT-1高、低水平患者的生存曲线比较

图2 FoxM1高、低水平患者的生存曲线比较

图3 NGF高、低水平患者的生存曲线比较

3 讨论

3.1 血清MALAT-1与肺癌的关系MALAT-1是一种与肿瘤转移相关的转录因子，主要参与转录起始过程[8]。MALAT-1是恶性肿瘤发生进展中的关键基因分子[9，10]。有研究[11，12]显示，在癌组织中，MALAT-1呈高表达。若MALAT-1 表达被抑制可诱导癌细胞的细胞周期停滞，癌细胞停止侵袭，并且在DNA合成后期及细胞分裂期，诱导癌细胞凋亡。本研究发现 MALAT-1高水平患者中腺癌、Ⅳ期、有区域淋巴结转移、有远处转移的比例高于MALAT-1低水平患者，说明肺癌中MALAT-1呈高表达，MALAT-1水平越高，病理类型为腺癌、临床分期越高，而且越容易发生区域淋巴结转移、远处转移，增加肿瘤侵袭能力。进一步分析预后也发现MALAT-1高、低水平患者的中位总生存期为27.3(6.3～42.0)个月、37.9(15.5～42.0)个月，MALAT-1高表达水平意味着预后不良。

3.2 血清FoxM1与肺癌的关系FoxM1属于叉头框转录因子，近年来研究发现，在恶性肿瘤中FoxM1呈高表达，参与多种癌症信号转导途径[13，14]。有体外实验[15]表示，FoxM1是MALAT-1的一个下游调控分子，MALAT-1调控miRNA-194-5p/FoxM1通路，进而诱导人肺泡上皮细胞凋亡。也有研究[16]表示，在肺癌进展中FoxM1促进肺成纤维细胞活化和纤维化，FoxM1为关键驱动因子，参与miR-766-3p调控肺癌细胞增殖、迁移、侵袭[17]。本研究分析血清FoxM1与肺癌病理特征及肿瘤转移的关系，结果显示FoxM1高水平患者中Ⅳ期、有区域淋巴结转移、有远处转移的比例高于FoxM1低水平患者，说明FoxM1表达水平越高，肺癌临床分期越高，而且越容易发生区域淋巴结转移、远处转移，中位总生存期越短。上调FoxM1增加肿瘤细胞的迁移与侵袭性，导致总生存期缩短。

3.3 血清NGF与肺癌的关系NGF是一种神经营养因子，主要参与调控神经细胞的生长与分化。在多种癌组织如前列腺癌[18]、骨癌[19]可发现NGF高表达。本研究发现NGF高水平患者中Ⅳ期、肿瘤低分化、有区域淋巴结转移及远处转移的比例高于NGF低水平患者；NGF高水平患者的中位总生存期也明显短于NGF低水平患者。NGF在恶性肿瘤中的机制尚不明确，有研究[20～22]发现NGF可促进血管内皮生长因子水平升高，诱导肿瘤血管生成，为肿瘤侵袭与转移创造条件。

综上所述，肺癌患者血清MALAT-1、FoxM1和NGF表达水平与病理类型、临床分期、区域淋巴结转移、远处转移有关，高表达水平意味着预后不良。MALAT-1、FoxM1和NGF能否作为肺癌的靶点仍需进一步研究。