肺炎支原体肺炎患儿肠道菌群与血清干扰素-γ和白介素-4水平的关系

2021-11-24胡尧舜高广川李小容向豪冯琴

西部医学 2021年11期

胡尧舜高广川李小容向豪冯琴

(四川大学华西广安医院儿科，四川广安 638000)

肺炎支原体肺炎(Mycoplasmal Pneumoniae Pneumonia,MPP)是由肺炎支原体引起的急性呼吸道炎症和肺部病变[1]，占肺炎总数的 10%～30%[2]，可导致儿童免疫功能异常，严重危害儿童身心健康。目前国内外研究发现，MPP主要由细胞免疫紊乱引起，尤其是辅助性T淋巴细胞功能异常[3-4]。辅助性T细胞分为TH1 与TH2两种类型细胞，其中TH1细胞以干扰素(Interferon-y，IFN-y)等促炎症介质为特征，可增强细胞毒作用，介导细胞免疫反应；TH2细胞以白介素-4(interleukin-4，IL-4)等细胞因子为特征，以抗炎症介质为主，介导体液免疫应答[5]。生理上，Th1/Th2细胞功能相互制约维持正常的免疫状态，若Th1/Th2不平衡，则导致MPP发生[6]。近年来，肠道菌群紊乱因可引起多种疾病，已成为人们关注的热点。目前引起肺部感染的肠道菌群越来越受到重视，正常情况下，其主要参与肠道物质分解代谢，维持肠道免疫系统稳定。在慢性疾病中肠道菌群数量和类型发生变化，可能涉及内源性肠道感染的启动和免疫系统的抑制[7]。且有实验表明，肠道菌群紊乱可增加肺部感染性疾病的发生[8]。鉴于目前临床对MPP患儿肠道菌群与血清IFN-γ、IL-4水平的关系相关详细报道较少，因此本研究进一步分析，为临床治疗提供理论基础和新的思路，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2016年10月～2020年10月我院收治的106例行MPP患儿为研究对象。纳入标准：①均符合第8版《实用儿科学》[9]中MPP诊断标准：X线改变明显，多为单侧病变，下叶为多见，有时病灶呈游走性，少数呈大叶性阴影；血清冷凝集反应、血清抗体检测及支原体培养阳性。②年龄2～14岁。③患儿家长知情同意。排除标准：①严重心脑血管疾病儿。②合并免疫系统疾病儿。③1个月内有呼吸道感染者。④血液系统疾病者。⑤肝肾疾病者。根据病程分为急性期组(急性感染发作在1周内)46例和恢复期组(症状保持2个月以上)60例，并选取同期于本院进行体检的健康儿50例作为对照组。本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 肠道菌群于入院后第二天随机取新鲜粪便0.5 g，电子称量，用4.5 mL稀液稀释。取新鲜粪便10 μL接种于相应的培养基上。根据不同菌株使用的培养基，在37℃恒温箱中培养48 h后，细菌革兰染色，计算每克粪便中含有的菌群数目。使用MALDI Biotyper系统(德国BRUKER)进行细菌质谱鉴定。采用鲨试剂三肽显色基质偶氮法检测内毒素。

1.2.2 血清IFN-γ、IL-4 入院后第二天采取晨起空腹肘正中静脉血3 mL，保存于EDTA抗凝管中，在3000 r/min下离心10 min，进行离心沉淀细胞，分离上清液后-70℃恒温冰箱保存，采用全自动分析仪测定检测血清IFN-γ、IL-4水平。为使检测结果更准确可靠，本研究采集标本后充分与抗凝剂混匀，且放置10min后对标本进行检测。

2 结果

2.1 3组一般资料比较急性期组中男性26例，女性20例，年龄2～14岁，平均(7.63±2.04)岁；病程3～15 d，平均(9.22±3.04)d。恢复期组中男性35例，女性25例，年龄2～13岁，平均(7.51±2.02)岁；病程3～14 d，平均(9.11±3.02)d。对照组中男性28例，女性22例，年龄3～14岁，平均(7.83±2.09)岁。3组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

2.2 3组肠道菌群比较急性期组和恢复期组双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌数量低于对照组，急性期组双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌数量低于恢复期组(P<0.05)，见表1。

表1 3组肠道菌群比较

2.3 3组血清IFN-γ、IL-4水平比较急性期组和恢复期组血清IFN-γ、IL-4水平高于对照组，急性期组血清IFN-γ、IL-4水平高于恢复期组(P<0.05)，见表2。

表2 3组血清IFN-γ、IL-4水平比较

2.4 肠道菌群与血清IFN-γ、IL-4水平的相关性 Spearman相关分析显示，双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌数量与血清IFN-γ、IL-4水平呈负相关性(P<0.05)，见表3、图1。

表3 肠道菌群与血清IFN-γ、IL-4水平的相关性

图1 肠道菌群与血清IFN-γ、IL-4水平的相关性

3 讨论

MPP是儿童呼吸道感染常见病，近年来其发病呈升高趋势。报道显示，MPP占肺炎总发病率的22%，仅次于链球菌性肺炎[10]，肺外并发症的发生率为36%～46.7%(如神经、循环、血液、消化及泌尿系统病变等)，严重时可导致多器官功能衰竭，治疗不及时可致死亡，因此及时有效的治疗至关重要[11-13]。

呼吸道上皮细胞的吸附、肺炎支原体的侵袭和免疫功能障碍是MPP的主要发病机制。而细胞因子的变化可以反映辅助性Th亚群变化，从而了解患儿免疫失衡，Th分为Th1和Th2，其中Th1可分泌IFN-Y等促炎介质，增强细胞毒性作用，杀死炎症细胞；而IFN-Y在早期防御反应中起重要作用。Th2可产生以抗炎介质为主的IL-4细胞因子，促进抗体的产生，介导体液免疫反应；IL-4具有免疫调节和抗炎作用，可下调促炎细胞因子基因的转录和分泌，在肠道免疫中发挥重要作用。正常情况下Th1/Th2通过分泌细胞因子相互调节、制约、平衡，并维持正常的免疫状态，若Th1/Th2失衡，可导致该病发生[14-16]。肠道菌群是一个复杂的微生态系统，可以抵抗致病微生物的入侵，限制相关致病微生物的生长。正常情况下肠道菌群可促进维生素合成和膳食纤维的消化，调节炎症，还可以促进免疫系统发育和成熟。而肠道细菌及其代谢产物是肠道免疫系统刺激因素，可影响肠道上皮细胞完整性，通过宿主的免疫反应可破坏正常的肠道菌群，并削弱肠道粘膜屏障功能，当机体处于应激状态时肠道菌群会失衡并大量增殖，进而导致炎症等不良事件发生[17-19]。本研究结果显示，急性期组和恢复期组双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌数量低于对照组，急性期组双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌数量低于恢复期组，与郭伟等[20]报道一致，说明MPP存在肠道菌群紊乱，且可鉴别对急性期和恢复期MPP患儿。同时本研究发现，急性期组和恢复期组血清IFN-γ、IL-4水平高于对照组，急性期组血清IFN-γ、IL-4水平高于恢复期组，提示血清IFN-γ、IL-4水平参与MMP发生发展，可作为MMP诊断及病情轻重的诊断指标。且本研究进一步分析双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌与血清IFN-γ、IFN-γ水平的相关性，Spearman相关分析显示，双歧杆菌、真杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、消化球菌与血清IFN-γ、IL-4水平呈负相关性，提示MPP患儿肠道菌群与血清IFN-γ、IL-4水平密切相关，血清IFN-γ、IL-4水平随肠道菌群数量减少而升高，因此临床应对患儿肠道菌群进行监测，并实施针对性干预措施，以改善肠道菌群，促进患儿预后。