产ESBLs菌株及其耐药性监测的临床意义

李进，茅小波，杨丹丹

（南通市海门区人民医院检验科，江苏 南通 226100）

超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是1983年于临床中发现，之后，全球范围内均有相关报道[1-2]。ESBLs是由某些菌株生成的一种酶，此种菌株对头孢类、青霉素等β-内酰胺类药物均具有较强耐药性[3]。随着抗菌药物的广泛运用，产ESBLs菌株检出率显著升高（尤其是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌），目前已成为引起院内感染的重要致病菌[4]。因此，产ESBLs菌株与其耐药性的监测，对医院感染控制及抗菌治疗的开展均具有重要意义。基于此，为了解本院产ESBLs株菌检出情况及其耐药性，现对本院门诊与住院患者各种临床标本分离的150株菌株（包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌）展开探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年6月至2020年6月本院门诊和住院患者各种临床样本（血、痰、尿、腹水、胆汁、脓液等）分离出的肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌共150株。

1.2 方法

1.2.1 药敏实验 以琼脂扩散法进行药敏实验，参照NCCLS即美国临床实验室标准化委员会制定的相应标准[5]，评估结果。

1.2.2 ESBLs菌株试验 以双纸片协助试验，依据常规纸片扩散法进行细菌接种，将阿莫西林-克拉维酸纸片贴在平板中心，然后将氨曲南、头孢噻肟、头孢他啶纸片贴在其周围，若周边3个药敏纸片任何一个存在抑菌圈向阿莫西林-克拉维酸纸片靠近且边缘发生扩大现象，则可判定为产ESBLs可疑菌株。

1.2.3 ESBLs菌株验证试验 按照NCCLS推荐纸片扩散确证法进行试验，应用头孢噻肟-克拉维酸、头孢他啶-克拉维酸、头孢他啶进行检测。比较两组内不加入克拉维酸抑菌圈直径与任意一个药物添加克拉维酸抑菌圈直径，当增大差异超过5 mm时，表明此菌株产ESBLs。

1.3 观察指标 观察菌株内产ESBLs株检出数与其对单种抗菌药物和多种抗菌药物的耐药性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 24.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用[n（%）]表示，予以χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌内产ESBLs菌株检出情况150株菌株中，肺炎克雷伯菌有69株，大肠埃希菌有81株，两者产ESBLs菌株检出率分别为43.48%、41.98%，见表1。

表1 肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株检出情况Table 1 Detection of ESBLs-producing strains of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli

2.2 产ESBLs菌株对单种抗生素的耐药性分析 肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对SXT、AMK、GEN、CIP、ATM、CSL、FEP、CAZ、CTX、AMC、TIP、PIP的耐药性均明显高于不产ESBLs菌株（P＜0.05）。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对IPM、AMP的耐药性比较差异均无统计学意义，见表2。

表2 产ESBLs菌株对单种抗生素的耐药性[n（%）]Table 2 Resistance of ESBLs-producing strains to single antibiotics[n(%)]

2.3 产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药性分析 肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对IPM联合SXT、AMK、CIP的耐药性均较低。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对头孢菌素类、青霉素类联合酶抑制剂方案的耐药性，见表3。

表3 产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药性分析[n（%）]Table 3 Analysis of the resistance of ESBLs-producing strains to a variety of antibacterial drugs[n(%)]

3 讨论

随着新型超广谱β-内酰胺类药物的出现及广泛运用、推广，对微生态环境内各种细菌造成较大选择压力，迫使细菌出现新的耐药机制，以便能良好地适应其生存环境，其中具备重要意义的机制之一为革兰氏阴性杆菌产ESBLs，从而对氨曲南、第3代头孢菌素等新型β-内酰胺类药物产生耐药。另外，由整合子或转座子、质粒引导的ESBLs编码基因可于不同属种细菌遗传物质间聚集重排或转移，导致多重耐药性发生风险显著升高。ESBLs是一些革兰阴性杆菌的部分菌株形成的一种酶，这些菌株对β-内酰胺类药物（如头孢类、青霉素类）均具有耐药性[6]。细菌生成ESBLs后可灭活窄谱、广谱抗革兰阴性杆菌青霉素、单环β-内酰胺类、头孢菌素等抗菌药物。ESBLs多来源于肠杆菌科细菌，于肠杆菌科细菌内产ESBLs较多的为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌[7-8]。因此，临床应加强对产ESBLs菌株与其耐药性的监测，以便于后期合理应用抗菌药物，降低细菌耐药性。

本研究结果显示，150株菌株中共检出64株产ESBLs菌株，占42.67%，其中在肺炎克雷伯菌株内检出30株，在大肠埃希菌内检出34株。除亚胺培南、氨苄西林外，肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株的耐药性显著均高于不产ESBLs菌株，提示肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ESBLs菌株，可增加菌株的耐药性。因此，临床应加强对以上菌株产ESBLs的监测。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对亚胺培南耐药性均较低，分别为3.33%、5.88%。肺炎克雷伯菌产ESBLs除对亚胺培南、头孢哌酮-他唑巴坦耐药性较低外，对其他抗菌药物耐药性均高于70.00%，且本研究结果显示，产ESBLs对亚胺培南与其他抗菌药物的耐药性也较低，分别为0.00%～3.33%、0.00%～2.94%。但产ESBLs除对亚胺培南、头孢哌酮-舒巴坦外，对复方新诺明等几种药物均具有多重耐药性。另外，头孢菌素类、青霉素类联合酶抑制剂治疗方案与不加入酶抑制剂多重耐药性相比有所下降，但酶抑制剂的应用并不能解决全部问题，也说明肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌可能还存在其他耐药机制。另外，肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs对头孢哌-酮舒巴坦联合酶抑制剂的耐药性低于哌拉西林联合酶抑制剂。因此，临床可优先考虑头孢菌素类联合酶抑制剂抗菌治疗方案。

综上所述，产ESBLs菌株的分离率与耐药性均较高，是目前临床上需重点解决的问题。为避免产ESBLs造成的院内感染及控制ESBLs生成株其产酶基因扩散，临床应加强对广谱β-内酰胺类抗菌药物的合理运用。