调节血脂保健粥的研制
2021-11-14刘小杰舒志成赵志红
刘小杰,舒志成,赵志红,左 迪,
(1.上海城建职业学院,上海 201415;2.杭州娃哈哈集团有限公司研发中心,浙江杭州 310018)
随着人们生活方式和饮食结构的巨大改变,高脂肪、高胆固醇食物大量摄入,使得心血管疾病成为了当今威胁人类健康的头号杀手。从食物和天然药物中寻找更安全有效的降脂途径,是防治心脑血管疾
病的方向之一。国内外大量研究表明:植物甾醇/酯[1-4]、植物甾醇/酯复方产品[5-8]、红曲[9-12]、红曲和中草药[13-16]、红曲和纳豆组方[17]、红曲和蜂胶[18]、红曲和姜黄[19]、红曲和其他功效素材[20-21]等多种天然来源的生物活性成分具有明确的降血脂作用,但其复合物对高血脂人群是否有明确的降血脂作用,目前研究还不多见。获得批准文号的具有辅助降血脂功能的保健食品,其产品形式基本为片剂、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊)等类似药品的剂型,粥以其制作简便、加减灵活、易于消化吸收、养生保健的特点,赢得了广大消费者的青睐,而调节血脂的保健粥类产品鲜见。本研究以粥为载体,添加植物甾醇酯、红曲等功效素材,对关键工艺及参数进行了深入研究,考察了功效成分和理化等指标的稳定性,以期为该类产品的开发及市场应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
低糖八宝粥 市售;糯米、大麦仁、赤豆、黑米、花生仁、红芸豆、青稞、银耳 购自农贸市场;红曲粉 山东巨野巨彤生物科技有限公司;植物甾醇酯
德国科宁公司;菊粉 重庆骄王天然产物股份有限公司;零卡糖 山东糖之物语健康产业有限公司;麦芽糖醇 山东福田药业有限公司;三聚磷酸钠西安浩天生物工程有限公司;乙二胺四乙酸二钠 河南瑞仁生物工程有限公司;磷脂 河北美业斯维生物技术有限公司;蔗糖脂肪酸酯 杭州瑞霖食品科技有限公司。
ME1002T/02电子天平、PHS-9V型pH计 梅特勒-托利多公司;RFM800自动数字折光仪 英国B+S公司;2690型高效液相色谱仪 美国Waters公司;2010plus气相色谱仪 日本岛津公司;SILVERSON L4RT高速剪切机 上海发信机电设备有限公司;封口机 杭州中亚机械有限公司;AUTOCLAVE MLS-3020杀菌锅 SANYO公司。
1.2 实验方法
1.2.1 八宝粥制作的操作要点 乳化:在烧杯中加入定量80±5 ℃的水,在搅拌状态下加入称量好的植物甾醇酯、红曲粉、复合乳化剂。保持水温高速剪切,速度为5000 r/min,时间为5 min,得到乳化液。
溶糖:在烧杯中加入定量85 ℃水,在搅拌状态下加入称量好的白砂糖溶解,得到糖浆。
调配:将糖浆、乳化液、零卡糖、乙二胺四乙酸二钠等加入到配料装置中,搅拌速度为500 r/min,搅拌15 min后,得到糖水备用。
空罐烫洗:用90 ℃以上热水烫洗空罐。
米豆料淘洗:淘洗各种米豆料,按配方称好,装入空罐中。
封罐:把配制好的糖水倒入装好米豆料的罐中,并进行封口。
高温灭菌:采用杀菌锅进行高温灭菌,要求罐头中心温度达到116~121 ℃,且达到该中心温度的保持时间≥30 min。
1.2.2 关键工艺及参数研究
1.2.2.1 米豆料混合时间研究 以产品配方中用量较低而色泽明显的红芸豆为标准物,采用在混合过程中不同时间段取样,于3个不同部位,即顶部(A)、中部(B)和下部(C)随机取样200 g,通过称重检测红芸豆在各取样点A、B、C中的实际比例,是否接近标准值(配方比例)来确定混合时间,即通过计算A、B、C三点红芸豆比例的平均值和标准差来判断均匀度。
1.2.2.2 装罐量研究 每罐分别装米豆混合料46、49、52、55、58、61和64 g,按照1.2.1的步骤制备成品保健粥,参考1.2.2.6评定保健粥的成品感官和感官接受度,同时参考1.2.3.2测定固形物含量,确定最佳的装罐量。
1.2.2.3 灌装温度研究 分别在50、55、60、65、70、75、80、85、90和95 ℃进行灌装,考察不同灌装温度对真空度、瘪听率、凸角率、产品色泽等指标的影响,其中瘪听率和凸角率主要通过考察100罐试制产品中发生瘪听和凸角的比例。
1.2.2.4 杀菌时间研究 工业生产八宝粥一般采用卧式杀菌釜进行灭菌,同时兼具将“生料煮熟”的目的,将杀菌温度设定为121 ℃,同时将回转速度统一设置为3.0 r/min,考察不同杀菌时间(25、30、35、40、45、50、55、60 min)对成品八宝粥口感质量的影响。
1.2.2.5 回转速度研究 分别将回转速度设置为0、2.0、2.5、3.0、3.3和3.6 r/min,考察不同回转速度对产品感官和包装外观的影响。
1.2.2.6 感官评价 选择经过专业训练的感官评审员20人组成感官评价小组,按照公司内部标准程序对保健粥样品进行感官评价,其中成品厚实度采用5分制(分别对应稀薄、稍薄、适中、稍厚和太厚);产品色泽以市售低糖八宝粥作为参照,来判断保健粥色泽是否正常;感官接受度采用3分制(分别对应不接受、勉强可接受和可接受),在研究杀菌时间对保健粥口感的影响时,采用3分制(分别对应整体偏硬、不够酥软和口感酥软),由感官评价小组成员针对上述指标进行打分。
1.2.3 产品稳定性试验 在37 ℃条件下保存3个月,每隔15 d取样,定期测定保健粥中洛伐他汀和植物甾醇酯的含量,同时检测理化指标和微生物指标。
1.2.3.1 pH的测定 用pHS-9V型pH计测定。
1.2.3.2 可溶性固形物含量的测定 按GB/T 10786-2006 《罐头食品的检验方法》规定的方法测定。
1.2.3.3 糖含量的测定 依据GB 5009.8-2016《食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》,采用高效液相色谱法。
1.2.3.4 桔青霉素含量的测定 采用免疫亲和柱净化法-高效液相色谱法,检测仪器为超高效液相色谱仪Waters Aquilty UPLC,免疫亲和柱:R-Biopharm P126。色谱条件如下:色谱柱:Waters Acquilty C18-T3柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相:乙腈:10 mmol/L磷酸溶液(pH2.5)=45:55;流速:0.4 mL/min;进样体积:5 μL;检测器:Waters FLR荧光检测器;发射波长:500 nm;激发波长:350 nm。标准曲线方程:Y=3.74e+003X-2.27e+003(R2=0.999598)。
1.2.3.5 微生物指标的测定 按SN/T 2100-2008《罐头食品商业无菌快速检测方法》进行测定。
1.2.3.6 洛伐他汀含量的测定 采用超高效液相色谱法,参照了轻工行业标准QB/T 2847-2007《功能性红曲米(粉)》中的相关方法。色谱条件:色谱柱:Acquilty BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相:甲醇:水:磷酸=385:115:0.14(体积分数);检测器:Acquilty PDA(A10UPD520A);流速:0.3 mL/min;进样量:2.5 μL;检测波长:238 nm。标准曲线方程:Y=2.96e+004X-1.03e+005(R2=0.999990)。
1.2.3.7 植物甾醇酯含量的测定 采用气相色谱法,检测参数如下:柱温梯度:150 ℃保持1 min,以30 ℃/min升温到280 ℃,保持20 min;进样口:温度300 ℃,分流比5:1,进样量:1 μL;检测器:FID检测器,温度280 ℃尾吹气流量30 mL/min;色谱柱:HP-1(30 m×0.32 mm×0.25 μm),柱流速2 mL/min。采用内标法,样品中总植物甾醇(包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇)含量以豆甾醇计,最后折算成植物甾醇酯的含量。标准曲线方程(强制过原点):Y=0.8963X(R2=0.99987)。
1.2.4 志愿者人体功能验证试验 从自愿报名参加试验的人员中,选择年龄40~55岁,医院体检血脂异常的受试者120例,签署自愿参加试验的书面知情同意书。其中对照组、试验组各60例。试验组按推荐方法和推荐量服用保健粥,每日1次,每次1罐(净重360 g);对照组服用某品牌市售低糖八宝粥(不含洛伐他汀和植物甾醇酯),用法与用量同试验组,各组均建议清淡饮食,连续服用45 d,在试验前和服用45 d后,前往医院测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),考察该保健粥对受试者血脂水平的改善作用。
1.3 数据处理
在关键工艺及参数研究中,采用测定3次平行实验数据,以平均值来表示;在产品稳定性试验中,理化指标采用测定3次平行实验数据,以平均值来表示;洛伐他汀和植物甾醇酯含量,采用测定3次平行实验数据,用x¯±s表示;志愿者功能试验中,各项血脂指标用x¯±s表示,对照组应用SPSS 10.0统计分析软件,试验前后比较采用t-test检验;试验组各项血脂指标的下降率,通过计算试验前后的数据获得。
2 结果与分析
2.1 关键工艺及参数研究
2.1.1 米豆料混合时间的选择 按照1.2.2.1的方法,研究米豆料最佳的混合时间,具体试验结果见表1,从表1的数据可以看出,20~30 s基本均匀,达到了配方比例6.0%的要求;同时对3个部位均匀度求标准差,从表1的数据也可以看出,随着混合时间的延长,标准差明显降低,表明混合米豆料不同部位的均匀度明显提高,30 s后继续提高混合时间,对均匀度提高无明显效果;但混合时间过长,各物料之间摩擦产热,再加上机械碰撞,导致物料出现发热、发黏和米粒破裂等问题,故本研究选择20~30 s作为米豆料最佳混合时间。
表1 混合时间对物料均匀度的影响Table 1 Influence of mixing time on material uniformity
2.1.2 装罐量的选择 根据一般八宝粥罐头装罐量在50~52 g/罐左右的经验,设计装罐量梯度如表2,按照1.2.2.2的方法确定最佳的装罐量范围。从表2的固形物含量和成品感官结果可以看出,随着装罐量的增加,成品口感稠厚度不断提高,固形物含量呈现出类似变化趋势;但当装罐量超过61 g,产品口感偏稠厚,不够清爽,这是因为八宝粥里的米豆等物料,在灭菌过程中吸水膨胀,可以明显影响产品的质感。综合考虑,当装罐量在52~58 g时,产品感官接受度最高。
表2 装罐量对保健粥固形物含量和感官指标的影响Table 2 Effect of canned quantity on solids content and sensory indicators of health-care porridge
2.1.3 灌装温度的选择 按照1.2.2.3的方法,考察不同灌装温度对成品真空度、瘪听率、凸角率、产品色泽等指标的影响,试验结果见表3。从表3的试验结果可以看出:灌装温度在50~60 ℃时,未出现瘪听率,但凸角率较高,灌装温度越低越明显,也有假胖现象;灌装温度在80~95 ℃时,未出现凸角率,但瘪听率较高,灌装温度越高越明显;在50~95 ℃范围内灌装,成品真空度不断提高,各灌装温度,均不会影响产品色泽。综合上述实验结果,得出最佳灌装温度为65~75 ℃。
表3 灌装温度对八宝粥真空度和外观的影响Table 3 Influence of filling temperature on vacuum degree and appearance of eight-treasure porridge
2.1.4 杀菌时间的选择 八宝粥罐头杀菌目的除了杀灭微生物达到商业无菌外,还有将“生料蒸煮成粥”的双重作用。采用高温高压长时间可以使产品达到香糯酥软的口感,满足消费者的要求。按照1.2.2.4的方法,研究杀菌时间对保健粥口感的影响,实验结果见表4。试验表明:121 ℃恒温杀菌25 min,物料口感比较生硬,没有达到酥软香糯的基本要求,需要延长时间;40 min以上的恒温能达到感官设计要求。考虑能耗经济性,选用40 min,此时杀菌强度F0值40,已超肉毒梭状芽孢杆菌为对象菌的121 ℃高压蒸汽30 min的F0值[22],也远超以嗜热脂肪芽抱杆菌为对象菌的F0值[23-24]。
表4 杀菌时间对保健粥口感的影响Table 4 Effect of sterilization time on the taste of health-care porridge
2.1.5 回转速度的选择 为提高生产效率、确保半成品卫生、半成品微生物不易繁殖生长的要求,采用了主料不预先蒸煮而直接装罐的工艺,在杀菌工艺中煮料成粥,且采用回转技术,使物料煮粥后不粘罐结块。杀菌回转使得罐内物料在蒸煮过程中不断翻滚,米粒不粘罐不结团。但回转太快,会造成罐头之间的相互滑动,磨擦掉罐外印铁图案,影响外观;回转太慢,会出现结团粘罐不成其粥。按照1.2.2.5规定的方法,考察回转速度对产品品质的影响,实验结果见表5。从表5可以看出,采用静止式杀菌,产品出现分层结块现象,随着回转速度的提高,产品均匀度得到提高,但当回转速度为3.0 r/min时,产品外观出现轻微擦损的情况。以产品质地均匀,且不对包装外观产生擦损为原则,确定了回转速度为2.5 r/min。
表5 回转速度对产品品质的影响Table 5 Influence of rotation speed on product quality
2.2 产品稳定性研究
2.2.1 理化指标的稳定性 依据1.2.3中描述的方法,检测产品中各项理化指标的变化,重点考察pH、糖含量、可溶性固形物和桔青霉素含量,试验结果见表6。从表6的结果可以看出,中试样品在37 ℃3个月保温过程中,各项理化指标均合格,符合质量标准的规定。保温过程中产品感官口味均正常,无异味和变色情况。
表6 加速试验中理化指标的稳定性Table 6 Stability of physical and chemical indexes in accelerated trials
2.2.2 加速实验中微生物指标变化 依据1.2.3中描述的方法,按照SN/T 2100-2008《罐头食品商业无菌快速检测方法》,检测不同保存时间产品的微生物指标,检测结果表明均符合商业无菌的要求。
2.2.3 洛伐他汀的稳定性 依据1.2.3中描述的方法,检测产品中功效成分洛伐他汀的含量,考察在加速试验中洛伐他汀的稳定性,试验结果见图1。从图1的结果可以看出,在八宝粥体系中,洛伐他汀稳定性很好,37 ℃保存90 d后,其保留率还保持在95%左右。
图1 加速试验中洛伐他汀的稳定性Fig.1 Stability of lovastatin in accelerated trials
2.2.4 植物甾醇酯的稳定性 依据1.2.3中描述的方法,检测产品中功效成分植物甾醇酯的含量,考察在加速试验中植物甾醇酯的稳定性,试验结果见图2。从图2的结果可以看出,在八宝粥体系中,植物甾醇酯稳定性较好,初始含量为2.2 g/kg,37 ℃保存90 d后,其含量仍然可以保持在1.98 g/kg,保留率达到了90%以上。
图2 加速试验中植物甾醇酯的稳定性Fig.2 Stability of phytosterol ester in accelerated trials
2.3 志愿者功能试验
依据1.2.4人体功能试验中的方法,考察保健粥对高血脂人群三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的影响,试验结果如表7所示。
表7 保健粥对高血脂人群血清TG、TC、LDL-C和HDL-C水平的影响Table 7 Eeffect of health porridge on serum TG, TC, LDL-C and HDL-C levels in people with hyperlipidemia
从表7的结果可以看出,对照组各指标在试验前后均无明显差异;实验组按照1.2.4中的要求,坚持食用保健粥45 d后,三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)下降幅度均超过10%以上,而高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)试验前后无明显差异,初步验证了该产品具有较好的辅助降血脂作用,这与笔者前期动物实验的结果相一致[21]。
3 结论
本研究以传统低糖八宝粥为载体,依据国内外大量研究文献和前期动物实验,添加植物甾醇酯、红曲等功效素材,制备了辅助降血脂保健粥,对关键工艺及参数进行了深入研究:米豆料混合时间为20~30 s,装罐量为52~58 g,最佳灌装温度为65~75 ℃,杀菌参数为121 ℃/40 min,回转速度为2.5 r/min。
稳定性试验结果表明:在37 ℃三个月保温过程中,各项理化及微生物指标均符合GB/T 31116-2014八宝粥罐头标准;功效成分洛伐他汀和植物甾醇酯稳定性较好:其中洛伐他汀含量大于25 mg/kg,保留率在95%左右;植物甾醇酯含量为1.98 g/kg,保留率在90%左右。
人体试验结果表明:食用保健粥45 d后,三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)下降幅度均超过10%以上,而高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)试验前后无明显差异,提示该产品具有较好的调节血脂作用。