黄连素治疗2型糖尿病的疗效及对患者血糖、肠道菌群及Cys C、AN、FFA水平的影响

陈诚，沙雯君，徐碧林，朱近悦，张翠平，夏娟，汪红平，雷涛

上海中医药大学附属普陀医院内分泌科，上海 200062

根据世界卫生组织(WHO)预估，全球范围内患有糖尿病的人数已超过2亿，估计至2035年会超过3亿，心血管疾病、肿瘤及糖尿病已成为世界上3 大非传染性疾病[1]。中国成为仅次于印度的第二大糖尿病发病大国，患有糖尿病的人数有4 000万左右，给经济和社会造成了比较沉重的负担[2]。黄连素又被称为小檗碱，其是从含有小檗碱的植物药如黄柏、黄连等中提炼的生物碱，是异喹啉生物碱，也能够人工合成[3]。黄连素虽然是清热解毒的代表药物，但魏晋时期就有著作记载使用黄连治疗消渴[4]。基于此，本研究观察黄连素治疗2 型糖尿病的疗效，并探讨其对患者血糖、肠道菌群及胱抑素C(Cys C)、脂联素(AN)、游离脂肪酸(FFA)水平的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年7月至2020年12月上海中医药大学附属普陀医院治疗的2型糖尿病患者124 例为研究对象，本研究经本院伦理委员会批准同意。纳入标准：①与2 型糖尿病诊断标准相符[5]；②检测血糖水平，餐后2 h 血糖(2 hPG)大于11.1 mmol/L，糖基化酶(FPG)大于7.0 mmol/L；③签署了知情同意书。排除标准：①伴有严重脏器疾病者；②出现意识障碍或精神疾病者；③对研究所使用的药物过敏。按照随机数表法将患者分为观察组和对照组，每组62例。对照组男性32例，女性30例；年龄43～74岁，平均(64.26±5.03)岁；病程1～11年，平均(6.34±2.96)年。观察组男性33例，女性29例；年龄42～75岁，平均(64.67±4.85)岁；病程2～12年，平均(6.87±3.15)年；在对照组的基础上选择黄连素进行治疗。两组患者的性别、病程、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 治疗方法 对照组患者选择二甲双胍肠溶片治疗：①叮嘱病患养成健康的饮食习惯，需低脂、低盐、优质低蛋白、低呤饮食，禁烟酒，体育锻炼每日都需进行，同时保证睡眠充足；②口服二甲双胍肠溶片(生产商：贵州天安药业股份有限公司；规格：0.25 g×100片/瓶；国药准字：H52020960)，0.5 g/次，3次/d。观察组患者在对照组治疗的基础上选择黄连素(生产商：杭州赛诺菲民生健康药业有限公司；规格：0.1 g×100片/瓶；国药准字：H33021708)进行治疗，口服0.2～0.5 g/次，3次/d。两组均连续治疗1个月。

1.3 观察指标与评价(检测)方法 治疗1 个月后，比较两组患者的临床疗效、餐后2 h 血糖(2 hPG)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、Cys C、AN、FFA水平及肠道菌群。(1)临床疗效[6]：①显效：临床症状全部消失，2 hPG为4.4～8.0 mmol/L，FPG为4.4～6.1 mmol/L；②有效：临床症状得到改善，2 hPG<10 mmol/L，FPG<7 mmol/L；③无效：临床症状没有缓减。总有效率=显效率+有效率。(2) 2 hPG、FPG、HbA1c、Cys C、AN、FFA水平：于清晨病患空腹状态下收集病患6 mL静脉血，EDTA抗凝后，3 500 r/min转速离心10 min，血浆分离，于-80℃的超低温冰箱中保存。选择γ放射免疫计数器(SN-684M型)对2 hPG、FPG、HbA1c水平进行检测，散射比浊法检测CysC水平，酶联免疫吸附法检测AN 水平，比色法检测FFA 水平。(3)肠道菌群：稀释粪便后选择直接涂片法：①试管中加入10 滴(50 μL/滴)无菌生理盐水，之后加入粪便标本(水滴样大小)搅拌混匀，抽取1 滴置于玻片上，涂抹成2 cm 直径的标本膜，后晾干，等待染色；②固定涂片之后实施革兰氏染色，后晾干，等待镜检；③剪一张大小为显微镜目镜的圆形纸片，于中间剪一直径是目镜直径一半的圆形孔，于目镜中放置，4个视野于油镜下观察，对革兰阴性杆菌(G-b)、革兰阴性球菌(G-c)、革兰阳性杆菌(G+b)、革兰阳性球菌(G+c)、细菌总数与其他细菌数进行观察；④按照记录的细菌数分别对油镜视野中的细菌总数进行计算(500个细菌中球菌、杆菌数与杆球比)。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0 统计学软件分析数据，计量资料以均数±标准差(x-±s)，组间比较采用t检验，计数资料组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的临床疗效比较 观察组患者的治疗总有效率为95.16%，明显高于对照组的74.19%，差异有统计学意义(χ2=10.504，P=0.001<0.05)，见表1。

表1 两组患者的临床疗效比较(例)

2.2 两组患者治疗前后的2 hPG、FPG、HbA1c水平比较 治疗前，两组患者的2 hPG、FPG、HbA1c 水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组患者的2 hPG、FPG、HbA1c 水平明显降低，且观察组明显低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前后的2HPG、FPG、HBA1C水平比较()

表2 两组患者治疗前后的2HPG、FPG、HBA1C水平比较()

注：与本组治疗前比较，aP<0.05。

2.3 两组患者治疗前后的Cys C、AN、FFA 水平比较 治疗前，两组患者的Cys C、AN、FFA 水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗后，观察组Cys C、FFA水平明显低于对照组，AN水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 两组患者治疗前后的Cys C、AN、FFA水平比较()

表3 两组患者治疗前后的Cys C、AN、FFA水平比较()

注：与本组治疗前比较，aP<0.05。

2.4 两组患者治疗前后肠道菌群比较 治疗前及治疗后，两组患者的菌数、G-b、G+b、G-c、G+c及球杆比比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表4、表5。

表4 两组患者治疗前后菌数、G-b与G+b的比较()

表4 两组患者治疗前后菌数、G-b与G+b的比较()

注：菌数/FV表示每一油镜视野下的细菌总数。

表5 两组患者治疗前后、G-c、G+c与球杆比的比较()

表5 两组患者治疗前后、G-c、G+c与球杆比的比较()

3 讨论

近几年，生活方式的变化、生活水平的提升使糖尿病的发生率逐年升高，其对人类的生命安全及身体健康造成了严重威胁，已经发展为三大主要慢性疾病之一[7]。糖尿病属于环境与遗传因素互相作用导致的一种由于破坏胰岛细胞、胰岛细胞功能出现缺陷、相对或绝对胰岛素分泌不足、胰岛素抵抗等造成的蛋白质、碳水化合物、电解质、水、脂肪等代谢紊乱的代谢不正常综合征，在临床上主要以慢性高血糖为特征[8]。长时间患有糖尿病会导致数个器官、系统发生慢性的并发症，造成功能衰竭或障碍，最终致残或致死，因为发生糖尿病的机制和原因还没有完全的明确，到现在为止还没有高效的治疗手段[9]。

黄连素也称为小檗碱，是从黄柏、黄连等中草药中提炼出的生物碱，黄连素可以对高血糖进行抑制[10]。有研究表明，40 mg/kg黄连素已经出现比较明显的降血糖功能，可以维持6 h的有效时间，对包含正常小鼠、葡萄糖性、肾上腺素性、四氧嘧啶性高血糖小鼠等在内的数种动物模型都有明显的降血糖效果[11]。由于黄连素有较低的溶解度，人体不易吸收，同谷维素共同服用，能够促进吸收，使疗效增强[12]。

有关糖尿病肠道菌群的文献显示，糖尿病病患于糖化血红蛋白与空腹血糖上升时肠杆菌科细菌就会升高，但是类杆菌及双歧杆菌的数量降低[13]。本研究中，患者的粪便大多是成形软便，没有出现水样便，并且通过观察没有持续腹泻与发热症状，腹胀、大便一次性次数增加没有进行任何处理就恢复正常，能够说明黄连素不会产生肠道菌群的现象。通过镜检，球杆菌比及各个油镜下的细菌数，同服药之前没有明显的差异。从本研究的结果中能够说明，黄连素对病患肠道菌群没有明显影响。

CysC 属于重要的一种内源性抑制半胱氨酸蛋白酶的碱性非糖化蛋白质，人体内有核细胞都能够产生恒定的CysC，肝功能、炎症不会对其造成影响[14]。AN的功能有抗动脉粥样硬化、抗炎症等，外源性AN能够使人体对于胰岛素的敏感度提高[15]。血清之中的FFA水平能够对人体之内的糖代谢、脂质代谢、分泌情况进行直接的反映，FFA 的浓度同时也会由于糖尿病等疾病的发生、发展而升高[16]。血浆之中的FFA 水平提升亦或是人体细胞之内有过高的脂肪水平，也能够导致胰岛β细胞及IR 功能失调，进而出现2 型糖尿病[17]。本研究中，通过黄连素进行治疗的患者的Cys C、FFA水平明显低于使用二甲双胍肠溶片进行治疗的患者，AN水平明显高于使用二甲双胍肠溶片进行治疗的患者，这在一定程度上论述了上述观点。

综上所述，黄连素治疗2型糖尿病的疗效显著，能明显降低病患2 hPG、FPG 水平，并对Cys C、AN、FFA水平进行改善，同时对病患肠道菌群没有明显影响，值得临床应用推广。