广州地区围生期孕妇B族链球菌感染情况及对妊娠结局的影响*

容莉莉，高坎坎，陈丽芳，谭晓明，江志锐，叶密玲，肖燕青

广东省广州市妇女儿童医疗中心检验科，广东广州 510130

B族链球菌(GBS)是引起孕妇发生围生期感染的主要病原菌之一，并且可引起胎儿宫内感染，导致胎儿脑膜炎，严重影响母婴健康[1]。研究表明，GBS可定植于生殖道中，能和念珠菌共存，不同年龄、地区、种族的女性GBS阳性率也不同[2-3]。目前，我国有关GBS的多中心、大样本临床研究较少，因此，在区域内开展流行病学调查，了解本地区妊娠期女性GBS感染情况对于优生优育、确保母婴健康有着重要意义。本研究选取2019年于本院行产前检查的孕35～38周围生期孕妇共2 812例为研究对象，探讨广州地区围生期孕妇GBS的感染情况和耐药率，以及GBS阳性对妊娠结局的影响，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年于本院产科行产前检查的围生期孕妇共2 812例为研究对象。年龄24～43岁，平均(30.5±2.1)岁；孕周35～38周，平均(36.6±0.7)周；初产妇1 585例，经产妇1 227例；有流产史636例，其中多次流产(≥3次)孕妇141例。纳入标准：1周内未使用任何抗菌药物；孕妇情况良好，无外阴、阴道瘙痒等症状；近期无性生活，伴侣无泌尿生殖道感染；孕周均经早孕反应时间、末次月经时间、孕中B超检查等核准；孕期检查资料完整。排除标准：合并严重器质性病变；合并精神类疾病；合并免疫系统疾病；合并严重心脑血管疾病。纳入研究对象对本研究知情同意，并签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2方法

1.2.1标本采集 参照美国疾病控制与预防中心(CDC)发布的《围生期GBS感染预防指南》中GBS检测取材方法对孕妇进行阴道及肛门取材。孕妇取仰卧位，首先清除外阴分泌物，将两根无菌阴道棉拭子用旋转方式采集阴道内下1/3处分泌物；另取两根棉拭子用旋转方式采集肛门括约肌上2～3 cm处的直肠分泌物。将标本放入无菌管中妥善保存，并于48 h内进行细菌培养。

1.2.2培养法检测GBS及药敏试验 参照《全国临床检验操作规程(第4版)》相关要求进行标本采集、分离和培养。培养后分离的病原菌接种于35 ℃、5%CO2的血琼脂平板，恒温培养24 h,观察菌落生长特点，如发现粉红色或灰白色的絮状菌落，则挑取出来转种至血琼脂平板，再次培养后进行生化鉴定，先进行革兰染色，如镜检确定为革兰阳性菌，则进行环磷酸腺苷(CAMP)检测，如结果为阳性表示GBS阳性，触酶试验阴性则表示GBS阴性。最后将菌株用GP67药敏卡、VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定/药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。

1.2.3层析法检测GBS 严格按照GBS快速鉴定试剂盒(层析法)说明书操作，先将1号和2号抽提液各5滴加入试管中混匀，然后将阴道拭子放入已加入抽提液的管中，搅动数秒，在管壁上反复挤压，静置5 min，搅动拭子数秒并反复挤压；取出拭子，将2～3滴抽提物垂直滴入样本孔中，在10～15 min后判定结果。结果判断标准：阳性为T线(检测线)出现红色条带，同时出现C线(质控线)；阴性为T线不出现，C线出现。如果不出现C线则重新进行检测。GBS质控菌株来源于本院检验科。

2 结 果

2.1培养法和层析法检出的GBS阳性率比较 2 812例孕妇中，培养法检出GBS阳性178例(6.3%)，层析法检出GBS阳性354例(12.6%)，两种方法检出的GBS阳性率比较，差异有统计意义(χ2=64.309，P<0.05)。见表1。

表1 培养法和层析法检出的GBS阳性率比较

2.2培养法检出的GBS菌株药敏试验结果 培养法检出的178株GBS菌株进行了药敏试验，结果显示，其对青霉素、万古霉素、利奈唑胺的敏感率为100.0%，对氨苄青霉素和呋喃妥因的敏感率分别为98.9%和94.4%；而对喹诺酮类抗菌药物左氧氟沙星及环丙沙星的耐药率分别为22.5%、16.9%，对大环内酯类抗菌药物四环素和红霉素的耐药率分别为73.0%和50.6%，对克林霉素的耐药率为47.8%。见表2。

表2 培养法检出的GBS菌株药敏试验结果[n(%)]

2.3GBS阳性及阴性孕妇不良妊娠结局比较 层析法检出的354例GBS阳性孕妇中，早产62例(17.5%)，胎膜早破91例(25.7%)，宫内感染82例(23.2%)，均显著高于GBS阴性孕妇，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 GBS阳性及阴性孕妇不良妊娠结局比较[n(%)]

3 讨 论

GBS是寄生于人类泌尿道及下消化道的兼性厌氧革兰阳性链球菌(溶血链球菌)。正常情况下，健康女性阴道微生物群与体内环境会维持一个动态平衡，而妊娠期间由于女性体内激素水平变化，阴道原有菌群平衡被打破，阴道内糖原增加，有利于细菌生长，再加上妊娠期间阴道黏膜充血水肿及细胞膜通透性的改变，导致阴道抵御外部侵袭的能力下降。阴道、子宫颈、肛门、直肠和泌尿道都是较易发生GBS感染的部位，而肥胖、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、低龄或高龄，以及多次妊娠史都是感染GBS的危险因素。当母体感染GBS时可直接或间接导致婴儿体内感染，引起一系列不良妊娠结局。GBS致病性强，传染迅速，是发达国家围生儿间接死亡的首要原因，在发展中国家GBS感染率也有升高趋势。尽管现代医疗水平不断提高，但是GBS感染仍然是造成围生期疾病和不良妊娠结局的一个重要原因。有研究表明，世界范围内不同种族及地区围生期孕妇GBS阳性率为6.5%～36.0%，而我国围生期孕妇GBS阳性率为3.5%～32.4%[4]。准确、快速地筛查孕妇GBS感染对临床防治工作及优生优育都有着重要意义。

本研究中，层析法检出的GBS阳性率为12.6%，该值在参考文献[4]得出的GBS阳性率范围内。本研究分别采用培养法及层析法进行了GBS检测，培养法检出的GBS阳性率为6.3%，低于层析法的12.6%，造成此差异的原因可能与培养法检测结果易受标本取材、运送及培养等因素的影响。本研究培养法漏检的可能原因：培养时对GBS菌落的判断失误，或在菌群生长过程中GBS的生长被其他菌类抑制而未被检出。层析法是近年来用于细菌检测的重要方法，其可检测GBS特异性抗原，特异度高，不受人为因素影响，且该方法在应用中检测时间短、准确率高，检测结果可为后期治疗及预后评估提供有效参考[5]。GBS是引起围生期孕妇严重感染的致病菌之一[6]。GBS与围生期感染密切相关，研究证实围生期孕妇感染GBS可引发早产、宫内感染、胎膜早破等不良妊娠结局，威胁孕妇及胎儿健康[7]。GBS对绒毛膜具较强的穿透及吸附能力，寄居于泌尿道、阴道等部位可感染胎膜，通过细胞蛋白水解酶及炎症细胞的吞噬作用侵袭胎膜，被感染后的胎膜张力下降，导致羊膜腔感染、胎膜早破[8]。而感染GBS的孕妇若出现胎膜早破则极易产生继发性宫内感染，引起前列腺素、细胞因子等释放，刺激宫缩，导致早产等不良妊娠结局[9-10]。本研究中，GBS阳性孕妇早产、胎膜早破及宫内感染发生率均高于GBS阴性孕妇，与上述研究结果类似。

随着抗菌药物滥用率的升高，GBS也开始出现耐药情况，了解GBS的药敏情况，对妊娠期GBS感染的防治有重大意义。针对围生期GBS感染孕妇，CDC推荐使用青霉素及氨苄青霉素进行治疗，若对上述药物过敏则可使用红霉素或克林霉素治疗[11]。本研究中GBS对青霉素、利奈唑胺、万古霉素、呋喃妥因的耐药率均为0.0%，对氨苄青霉素、环丙沙星及莫西沙星的耐药率分别为1.1%、16.9%和18.0%，对左氧氟沙星的耐药率为22.5%，对红霉素及克林霉素的耐药率分别为50.6%及47.8%，对四环素的耐药率高达73.0%。结合上述研究结果可知，青霉素及氨苄青霉素是治疗围生期GBS感染的理想抗菌药物，与孙丹华等[12]的研究结果一致。既往对青霉素过敏者多选用大环内酯类药物替代治疗，然而近年来有研究表明，GBS对大环内酯类药物的耐药率上升[13]。

综上所述，GBS感染显著增加了围生期孕妇早产、胎膜早破等不良妊娠结局的发生率，故临床需加强对围生期孕妇的GBS检测，并积极完善药敏试验，合理选择抗菌药物进行治疗，以改善妊娠结局。