血清壳多糖酶3样蛋白1在诊断慢性乙型肝炎肝纤维化中的价值

朱缘圆，陈 敏，樊 燕，陈春华，刘小琴△

江苏省常州市第三人民医院：1.检验科；2.肝病研究所，江苏常州 213003

肝纤维化是肝细胞慢性损伤的一种修复反应，慢性乙型肝炎(CHB)是中国人群中引起肝纤维化和肝硬化的主要因素，早期诊断及有效治疗可阻止甚至逆转肝纤维化进程[1]。目前，肝穿刺活组织病理学检查是诊断肝纤维化的“金标准”，但由于侵袭性、潜在并发症、采样误差等诸多因素，限制了其在临床的广泛应用。为此，许多研究者尝试采用非侵入性方法来诊断肝纤维化，但各种方案总体临床实用性仍不令人满意，进一步探索新的标志物仍十分必要。壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)属于糖基水解酶家族18成员，能够参与炎性反应、细胞增殖和分化，抑制细胞凋亡，促进血管生成及细胞外基质重构等病理过程。CHI3L1与多种肝脏疾病的发生、发展密切相关[2]。本研究通过检测慢性乙型肝炎肝纤维化(CHB-LF)、CHB患者和健康人血清CHI3L1水平，初步探讨了CHI3L1对CHB-LF的诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院2018年1月至2020年12月收治的30例未合并肝纤维化的CHB患者为CHB组，其中男19例，女11例，平均年龄(49.3±9.8)岁；收治的CHB-LF患者30例为CHB-LF组，其中男20例，女10例，平均年龄(50.8±12.3)岁。纳入标准：CHB-LF、CHB诊断符合《慢性乙型肝炎防治指南》中的相关标准。排除标准：合并人类免疫缺陷病毒感染、自身免疫系统疾病、白血病等血液系统疾病者；合并脂肪肝、酒精性肝病及肝癌者；合并急性、慢性感染者。所有患者均经肝穿刺活组织病理学检查确诊，CHB-LF患者中S1期4例，S2期5例，S3期9例，S4期12例。另选择30例同期健康体检者作为健康对照组，其中男20例，女10例，平均年龄(50.2±11.3)岁。

1.2方法 所有研究对象均抽取清晨空腹静脉血，分离血清，-80 ℃冻存待检。CHI3L1酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自苏州跃亚生物技术有限公司。应用ELISA试剂盒检测血清CHI3L1水平，以标准品水平为横坐标，吸光度值为纵坐标，计算出标准曲线回归方程，将标本的吸光度值代入方程，计算标本水平，具体操作按试剂盒说明书进行。

2 结 果

2.13组血清CHI3L1水平比较 CHB-LF组血清CHI3L1水平为(136.44±69.18)ng/mL，明显高于CHB组的(60.04±29.42)ng/mL和健康对照组的(45.62±22.81)ng/mL，差异有统计学意义(P<0.05)；CHB组CHI3L1水平与健康对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见图1。

图1 3组血清CHI3L1水平比较

2.2不同分期CHB-LF患者血清CHI3L1水平比较 S1、S2、S3和S4期患者血清CHI3L1水平分别为(72.02±13.15)、(82.77±10.16)、(120.81±31.21)、(191.98±69.18)ng/mL，其中S4期患者血清CHI3L1水平高于S1、S2和S3期患者，差异有统计学意义(P<0.05)；而S1、S2、S3期患者血清CHI3L1水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见图2。

注：与S4期比较，*P<0.05。

2.3血清CHI3L1诊断CHB-LF的ROC曲线分析 ROC曲线分析结果显示，血清CHI3L1从健康人群中鉴别诊断CHB-LF的曲线下面积(AUC)为0.959(95%CI：0.913～1.000)，最佳临界值为75.20 ng/mL，此时诊断灵敏度为90.0%，特异度为90.0%。CHI3L1从CHB患者中鉴别诊断CHB-LF的AUC为0.895(95%CI：0.819～0.971)，最佳临界值为91.34 ng/mL，此时诊断灵敏度为83.3%，特异度为80.0%。见图3。

注：A为血清CHI3L1从健康人群中鉴别诊断CHB-LF的ROC曲线；B为血清CHI3L1从CHB患者中鉴别诊断CHB-LF的ROC曲线。

3 讨 论

乙型肝炎病毒(HBV)可由于机体免疫耐受而导致慢性和持续性的感染,持续性的HBV感染会导致肝脏炎性反应、坏死、纤维化、肝硬化，甚至肝癌。肝脏显著的纤维化被认为是反映CHB进展的重要特征，需要进行抗病毒治疗[1]。由于早期有效的治疗可以逆转CHB-LF进程，因此，CHB-LF的早期诊断对患者的预后至关重要[1]。

瞬时弹性成像技术是近年发展起来的肝纤维化无创诊断技术，可快速、可靠、重复、无创地评估肝纤维化并监测其进展。然而，其测定的肝脏硬度值会受多种因素影响，如肝脏炎症损伤、肝内外胆汁淤积、肝脏水肿或瘀血、肝淀粉样变性、脂肪变性、进食及占位性病变引起的肝包膜张力升高等均会对检测结果产生一定影响[3]。传统的肝纤维化血清学标志物包括透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白，然而上述指标的检测结果往往会受到肝脏炎症的影响[4]。临床常用的肝纤维化评价指数，如基于4因子的肝纤维化指数(FIB-4)和天门冬氨酸氨基转移酶/血小板比值(APRI)，研究发现其诊断效能也不够理想[5]。因此，迫切需要寻找一种新的无创工具或标志物来评估肝纤维化。

多项研究结果显示，CHI3L1在肝纤维化患者外周血中的水平显著高于健康者[6-10]。国外学者研究发现，CHI3L1可预测慢性丙型肝炎和非酒精性脂肪性肝病导致的晚期肝纤维化[8-9]。国内学者也对CHI3L1在肝纤维化早期诊断中的价值做了相关研究，李洪等[6]研究发现，在CHB、慢性丙型肝炎、自身免疫性肝炎、酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝病等多种慢性肝病中，CHI3L1对肝纤维化具有较高的诊断价值，莫慧玲等[7]的研究结果与其类似。

本研究结果显示，CHB-LF组血清CHI3L1水平明显高于CHB组和健康对照组，提示CHI3L1可能参与了CHB-LF的发生、发展。S1、S2、S3期CHB-LF患者血清CHI3L1水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，与相关研究报道不一致[6-7,10]，考虑出现该结果可能与纳入研究的样本量较少，统计结果存在偏倚有关。进一步分析血清CHI3L1对CHB-LF的诊断价值，结果显示，血清CHI3L1从健康人群中鉴别诊断CHB-LF的AUC为0.959，从CHB患者中鉴别诊断CHB-LF的AUC为0.895，诊断效能均较高。李洪等[6]和莫慧玲等[7]的相关研究显示，血清CHI3L1诊断慢性肝病并发肝纤维化的AUC分别为0.68和0.83，与本研究结果相差较大，考虑可能有以下几点原因：(1)研究对象不同，本研究虽然也是分析血清CHI3L1对肝纤维化的诊断效能，但纳入的研究人群为CHB患者，而上述两项研究的研究人群为慢性肝病患者；(2)本研究样本量较少，结果可能存在一定偏倚；(3)本研究S3期和S4期CHB-LF患者样本量占比较高。

目前，关于血清CHI3L1水平升高在肝纤维化发生、发展中的分子机制仍不明确。有研究表明，CHI3L1是成纤维细胞和内皮细胞的生长因子，在肝纤维化活跃区域呈高表达，特别是肝星状细胞表达高水平的CHI3L1 mRNA，免疫组织化学分析显示，CHI3L1在肝纤维化活跃区域呈阳性表达，阳性染色程度可反映纤维化分期[11]。CHI3L1可通过触发肝星状细胞增殖，促进纤维化的形成、进展。此外，CHI3L1作为细胞外基质蛋白的成分，参与了肝纤维化和基质重构[12]。目前认为，CHB患者定期进行肝纤维化评估是必要的，特别是对有明显肝纤维化的患者。

综上所述，CHI3L1水平在CHB-LF患者血清中明显升高，其可能参与了CHB-LF的发病过程，并可作为CHB-LF良好的诊断标志物。本研究存在如下不足：样本量过小；研究对象中S1期和S2期CHB-LF患者较少，关于血清CHI3L1在CHB-LF早期诊断中的价值还需进一步探讨；未对研究对象进行动态观察以评估血清CHI3L1在病情监测中的价值。今后将进一步扩大样本量，动态观察治疗前后血清CHI3L1的水平变化，探讨其在疾病疗效及预后评估中的价值。