尿液NGAL，Kim-1及CTGF水平与糖尿病早期肾损伤的相关性研究

何晓一,刘彦君,庞晓宁,梁君蓉

(中国人民解放军联勤保障部队第九八七医院 a.内分泌科;b.消化内科,陕西宝鸡 721000)

糖尿病是中老年常见病，调查发现糖尿病发病率呈加速增长趋势[1]。随着糖尿病进展，可累及心血管、肾脏等其他组织器官，糖尿病早期肾损伤多因微血管病变引起，可造成终末期肾病等严重后果。保守治疗对延缓病情具有重要价值，但对于已发生肾小球硬化或肾小管间质纤维化的患者，药物治疗已不能扭转上述病变[2-3]。因而，如何早期预防糖尿病肾损伤成为临床关注焦点。目前，尿清蛋白/肌酐比率（urinary microalbumin/creatinine ratio，UACR）是判断早期肾损伤的依据[4]，但报道发现UACR 存在一定的假阴性结果[5]。有学者提出联合检测血清标记物可能有助于糖尿病早期肾损伤的筛查[6]，但有关联合检测的应用尚未形成规范性意见。本研究收集糖尿病患者尿液作为实验标本，分析尿结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（urine neutrophil gelatinase-associated lipocalin,u-NGAL）和尿肾损伤分子1（kidney injury molecule-1，Kim-1）在判断糖尿病早期肾损伤中的价值。报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2019年10月～2020年10月我院84 例糖尿病患者作为研究对象，根据UACR水平将84 例患者分为三组。其中UACR＜30mg/g者28 例，为糖尿病组。UACR 30～300mg/g 者30 例，为糖尿病早期肾损伤组。UACR ＞300mg/g 者26 例，为临床糖尿病肾病组[7]。

纳入标准：①糖尿病诊断参照2017 版指南标准[8]；②均在本院接受规范诊疗；③均签署知情同意书。

排除标准：①并发有肾小球肾炎、肾病综合性或其他可引起尿蛋白水平异常疾病；②并发泌尿系肿瘤者；③正在接受其他研究项目者。

1.2 仪器与试剂 采用艾美捷科技有限公司提供的u-NGAL，Kim-1 及CTGF 试剂盒进行试验。

1.3 方法 在患者入院后1 周内连续3 天收集三组患者尿液，高速离心15min 后取上清液，冷冻保存送检。u-NGAL，Kim-1 及CTGF 均采用酶联免疫吸附法进行检测，具体操作步骤按试剂盒说明进行。

1.4 统计学分析 选用SPSS 22.0 软件，符合正态分布时，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较行F 检验，两组间比较行t检验，计数资料以频数（频率）表示，组间行χ2检验，采用Pearson 相关性分析，以受试者工作曲线（receiver operating characteristic，ROC）分析预测价值，以曲线下面积（area under curve，AUC）＞0.75 为预测价值高，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比较 见表1。糖尿病组、糖尿病早期肾损伤组及临床糖尿病组患者u-NGAL，Kim-1 及CTGF 水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。u-NGAL 和CTGF 两两比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。糖尿病早期肾损伤组与临床糖尿病肾病组Kim-1 无显著性差异（P＞0.05）。

表1 三组u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比较（x±s）

2.2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 与UACR 相关性分析 见表2。Pearson 相关系数分析显示，UACR 与u-NGAL 及CTGF 呈显著正相关性（r=0.39，0.41；均P＜0.01），UACR 与Kim-1 无显著相关性（r=0.13，P=0.21）。

表2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判断糖尿病早期肾损伤价值

2.3 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判断早期肾损伤价值分析 以u-NGAL，Kim-1 及CTGF 作为检验变量，以是否发生糖尿病早期肾损伤为状态变量，绘制ROC，见图1。结果显示u-NGAL，Kim-1及CTGF 联合预测概率判断早期肾损伤的AUC 为0.81（SE=0.05，95%CI=0.71～0.91，P=0.00）。联合预测概率判断肾损伤的AUC 显著高于u-NGAL，Kim-1 及CTGF（Z=-2.817，-2.021，-1.972；P=0.00，0.01，0.03）。

图1 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判断糖尿病早期肾损伤的价值分析

3 讨论

糖尿病肾损伤多因微血管病变引起，其早期隐匿性强，临床常被忽视[9]。目前多数学者推荐UACR在30～300mg/g作为早期肾损伤的诊断标准，此阶段患者具有持续微量清蛋白尿特点，而早期干预能有效缓解症状，部分患者甚至可能扭转病情[10]。因而，本研究采用这一标准作为糖尿病早期肾损伤依据。Kim-1 为Ⅰ型跨膜糖蛋白。研究显示，肾脏发生局部缺血性损伤时，Kim-1 可在金属基质蛋白酶作用下发生裂解反应而被释放，进入尿液[11]。因而，检测尿Kim-1 水平可监测肾损伤的发生。本研究也显示尿Kim-1 有助于判断糖尿病早期肾损伤。但也有报道发现Kim-1 可能促进肾小管上皮细胞增殖和修复过程[12]。因而，在肾损伤发生后Kim-1与肾损伤程度无相关性。本文结果也发现早期肾损伤与临床肾损伤患者Kim-1 水平无显著性差异，且Kim-1 与UACR 无相关性，可能与此有关。

u-NGAL 为脂质运载蛋白lipocalin 家族成员，NGAL 能诱导肾小管中性粒细胞凋亡，并抑制炎症反应[13]。詹颉等[14]还认为NGAL 可促进肾小管上皮细胞转化和肾小管上皮细胞再生，抑制肾损伤。当糖尿病患者累及微血管，造成早期肾损伤时，持续的尿蛋白导致重吸收蛋白负荷增加，引起蛋白尿，并导致肾间质损伤[15]，使u-NGAL 应激性增加。因而，u-NGAL 对判断早期肾损伤具有较高敏感度，本研究结果也证实这一点。陶青松等[16]还认为u-NGAL 水平有助于监测肾损伤病情，这与本研究结果一致。

CTGF 为转化生长因子β 下游因子，能介导细胞增殖和黏附过程[17]。CTGF 通过促进肾小球系膜细胞外基质聚集，参与肾小球硬化和肾小管间质纤维化病变[18]。本研究也显示尿CTGF水平与UACR呈显著正相关性，通过抑制CTGF 有助于延缓肾损伤进展。赵雯红等[19]还认为尿CTGF 判断早期肾损伤风险的敏感度较肾小球滤过率更高。本研究采用ROC 进一步分析也显示其敏感度达0.76，说明CTGF 可作为早期筛查糖尿病肾损伤的指标。而CTGF 与Kim-1，u-NGAL 联合检测判断早期肾损伤的AUC 达0.86，高于其他单项指标检测，说明CTGF 与Kim-1，u-NGAL 联合检测有助于提高预测早期肾损伤的价值。

综上，CTGF 与Kim-1，u-NGAL 联合检测用于糖尿病患者，能提高早期肾损伤检出率。