风疹IgM 抗体检测中即刻法和双质控法的应用

刘斌

风疹是一种传染性疾病，因风疹病毒感染所致，临床症状以发热、出诊子、淋巴结肿大等为主，主要通过飞沫经呼吸道进行传播[1-2]。IgM 抗体检测是临床诊断风疹的主要参考依据，目前常用的检测方法是酶联免疫吸附试验，该试验方法具有敏感度高、操作简易、成本低等优势，在临床中得到了广泛运用[3-4]。但是，已有的文献报道指出，酶联免疫吸附试验会受到温度、洗板、显色等诸多因素的影响，导致其检测结果存在一定的误差，因此必须加强检测过程中的室内质量控制[5]。鉴于此，本研究为了进一步探讨风疹IgM 抗体检测中的有效室内质量控制方法，就62 例疑似风疹患者酶联免疫吸附试验中即刻法和双质控法的应用效果进行对照分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

筛选出本科室2018 年4 月—2020 年4 月的62 例疑似风疹患者，均出现一定程度的皮疹、黏膜疹、淋巴结肿大、发热等症状。对所有进行IgM 抗体检测，根据不同室内质量控制方法将其分为A 组与B 组，每组31 例。A 组：男21 例，女20 例；年龄8 ～53岁，平均（31.69±10.91）岁。B 组：男20 例，女21 例；年龄8 ～54岁，平均（31.74±11.00）岁。两组基本资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 采集患者的血液标本，3 000 r/min 离心10min，提取上层血清，于2 ～10℃的冰箱中冷藏保存待测。

1.2.2 IgM 抗体检测 参照卫生部发布的风疹诊断标准（WS297-2008）[6]，运用酶联免疫吸附试验进行检测，试剂盒源于深圳市科润达生物工程有限公司，均与有效期内使用，严格按照说明书操作。

1.2.3 室内质量控制 内部对照质控血清根据麻疹网络实验室SOP（麻疹风疹IgM 抗体检测的内部质控标准化操作规程），利用阳性病例血清自行配制，分装100 µL 一管，不反复冻融。仪器包括运用Thermo MUITISKAN MK3 酶标仪与Thermo WELLWASH酶标洗板机；HWS-28 电热恒温水浴锅，源于上海合恒仪器设备有限公司。

A 组应用即刻法，按照公式计算出定值血清的密光度值（OD）/试剂盒临界值（CO）的比值（S/CO）的上限与下限，再查离散指数值表判定质控结果，若结果为“告警”或“失控”，则舍弃并重新测定，其他测定值可继续使用[7]。

B 组应用双质控法。替换质控血清时，将新质控血清在旧质控血清用完前与其一起检测≥3 次，即于同一个酶标板上各加新旧质控血清1 ～2 孔。旧质控血清的OD 值参照原数据组继续进行“即刻法”分析。替换试剂批号时，于旧试剂用完前将新试剂2 排（18 孔）与旧试剂于同一个酶标板上进行3 次检测，两种批号的试剂皆加入到同一质控血清与部分相同样本中；旧试剂质控的OD 值参照原数据组继续进行“即刻法”分析。新试剂质控的OD 值剂同时进行原数据组的“即刻法”分析与新一组数据的“即刻法”分析。从第3 次检测开始应用新试剂进行标本检测，质控的OD 值也只进行新一组数据的“即刻法”分析。若新试剂质控的OD 值在原始数据的“即刻法”分析中出现负值偏移至警报与失控，且同一个酶标板旧试剂的质控结果为可控状态，则新试剂弃用。

1.3 观察指标

对比两组的室内质控效果，分析旧试剂与新试剂试验结果的可控情况。

2 结果

旧试剂第5 ～7 次与新试剂第1 ～2 次对应的同一个酶标板试验结果以及旧试剂的第7 次与新试剂的4 次试验结果均处于可控状态。见表1。

表1 两组的室内质控效果对比

3 讨论

酶联免疫吸附试验是免疫学诊断的主要方法之一，其检测结果较为稳定，适用于大规模的检测。但临床实践表明，酶联免疫吸附试验的影响因素较多，要确保检测结果的准确性，就必须让每次检测均保持可控，因此就需要进行室内质量控制[8]。此前较为常用的室内质控方法是即刻法和常规质控图相结合的方式，具有简单、实用、易操作的特点[9]。但实际操作过程中发现，即刻法的前几次试验存在可控性无法判定的不足，特别是对于异常不常检测的指标以及有效期较短的试剂盒，其可控状态存在较为明显的不稳定性[10-11]。所以，需要探讨一种更为有效、能够准确反映检测过程可控状态的室内质量控制方法。

双质控法采取双重质控，有效解决了新旧试剂替换时检测结果不可控的情况[12]。本研究对比即刻法与双质控法的应用效果，结果显示，新旧试剂的各次检测结果均处于可控状态，提示两种方法在风疹IgM 抗体检测的室内质量控制中均有效，由此进一步证实了酶联免疫吸附试验在风疹IgM 抗体检测中的应用价值。另外，分析即刻法有效的原因，主要在于：风疹IgM 检测的样本数量少、时间短，因此采用即刻法进行室内质量控制也能获得较为满意的效果。

必须一提的是，进行室内质量控制的最终目的是确保试验结果的准确性。而酶联免疫吸附试验的试剂盒与质控血清的有效期较短，所以应尽量选择更具有效性的双质控法进行室内质量控制，以提高检测结果的准确性与可靠性。同时应保证在试剂盒与质控血清的有效期内进行风疹IgM 抗体检测，以确保检测结果的准确率，为患者的临床诊断与治疗提供科学、有价值的参考依据。

综上所述，风疹IgM抗体检测中双质控法的应用效果优于即刻法，有助于提高检测结果的准确率，对风疹的临床诊断具有重要意义。