复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶治疗老年慢性牙周炎疗效及对龈沟液中人类刺猬因子蛋白、基质金属蛋白酶-8水平的影响

刘 阳，高秀秋

(锦州医科大学附属第二医院口腔科，辽宁 锦州 121000)

慢性牙周炎是临床上十分常见的口腔疾病，在牙周炎患者中占比高达95%，该病是由于微生物(细菌)所诱发的一种牙周炎症疾病，早期可表现为牙龈出血，随着疾病进展可出现牙周松动、疼痛等症状，对生活质量有较多不良影响[1]。老年人由于缺乏口腔保护意识，属于慢性牙周炎的高发人群[2]。临床上针对慢性牙周炎治疗目的是彻底清除菌斑、牙石等刺激物，令牙周袋变浅、消除牙龈炎症等，在牙龈炎症的消除方式中需使用抗菌药物，多选择局部给予米诺环素、硝基咪唑类等药物，也有研究发现，通过联合用药的抗菌方案，有助于进一步加强疗效[3]。近年来的报道中指出，龈沟液中(Sonic hedgehog，Shh)蛋白、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase-8，MMP-8)均参与着牙周组织炎症的发生和发展，对其的检测在判断慢性牙周炎的程度上有重要作用[4-5]。因此，本研究旨在探讨复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶治疗老年慢性牙周炎的疗效，并观察其对龈沟液中Shh蛋白、MMP-8水平的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年6-9月我院收治的100例老年慢性牙周炎患者进行研究，按照随机数表法，分为研究组和对照组，每组分别有50例，两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。病例纳入标准：①符合《牙周病学》[6]中关于慢性牙周炎诊断标准，病情为中重度；②口腔留牙>20颗，且至少有4颗牙齿健康、无龋齿、不良修复体、充填体等；③年龄≥60岁；④近3个月未接受过抗生素或其余抗炎药物治疗；⑤患者签署研究知情同意书。排除标准：①合并其余严重躯体疾病、重要器官功能障碍等；②合并急慢性感染；③合并精神障碍性疾病，无法配合研究；④对本研究相关药物具有过敏情况。本研究已经过我院伦理委员会批准实施。

表1 两组患者一般资料比较

1.2 治疗方法 两组均给予慢性牙周炎的常规牙周基础治疗，包括口腔卫生处理、龈上洁治和龈下刮治、根面平整等，并采用0.9%氯化钠注射液及3%过氧化氢交替冲洗牙周袋，最大程度的去除局部致病因素；在上述基础上，对照组给予2%米诺环素软膏(批号H20150106，规格0.5 g/支)治疗，取0.5～1.0 g的量于牙周袋缓慢注入，确保完整填满、可包裹牙齿即可，1次/周。研究组给予复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶治疗，该温敏凝胶包含2%米诺环素和0.5%奥硝唑，取总量1.0 g的温敏凝胶于牙周袋缓慢注入，确保完整填满、可包裹牙齿即可，1次/周；两组均持续治疗4周。

1.3 疗效判定 ①临床疗效[6]：于治疗4周后进行评价，显效：牙龈肿痛、出血等症状消失，牙周袋深度(Pocket depth，PD)较治疗前减少程度>2 mm，或PD<3 mm，探诊无出血；有效：牙龈肿痛、出血等症状明显缓解，PD较治疗前减少程度1～2 mm，探针无出血或者仍有少量出血；无效：未满足上述标准，甚至有加重表现；总有效率=(显效+有效)/总例数×100%。②牙周指标[6]：对治疗前及治疗4周后的PD、牙菌斑指数(Plaque index，PLI)、龈沟出血指数(Sulcus bleeding index，SBI)、牙龈指数(Gingival index，GI)的情况予以评价。PD为牙齿和牙龈之间的龈沟深度；PLI主要评价牙面菌斑覆盖厚度情况：3分表示菌斑已到达临床牙冠颈的2/3以上，2分表示已到达1/3～2/3，1分表示<1/3，0分表示牙面无菌斑表现；SBI主要评价出血情况：3分表示龈炎、牙龈出血程度重，2分表示牙龈有自发性出血倾向，1分表示有轻度龈炎、龈缘充血表现，经过探诊有轻微的出血，0分表示牙龈无充血、水肿症状，探诊没有出血现象；GI主要评价牙龈颜色和质地：3分表示有牙龈重度炎症、红肿、溃疡，2分表示牙龈有明显的炎症、红肿表现，但无溃疡出血，1分表示牙龈炎症较轻、牙齿颜色有改变，0分表示牙龈健康。③龈沟液指标：于治疗前及治疗4周后时，使用Whatman 3MM的滤纸条收集患者龈沟液，直接将滤纸插入龈沟底部位，静置30 s的时间，取出滤纸置于龈沟液测量仪(美国 Oraflow Periotron 8000型)进行测量，将结果换算成体积后，再将滤纸条置于250 ml的磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer，PBS)中震荡处理4 min，上离心机，转速3000 r/min，时间10 min，收集上清液，最终储存于-80 ℃的冷冻箱中待检，龈沟液Shh蛋白、MMP-8水平的检测均采用上海恒远生物技术发展有限公司所提供的酶联免疫吸附试验试剂盒进行。

1.4 观察指标 记录治疗4周后临床疗效、治疗前及治疗4周后牙周指标(PD、PLI、SBI、GI)、龈沟液Shh蛋白、MMP-8水平的结果，并记录治疗期间的相关不良反应(局部刺激、疼痛、胃肠道反应)的相关情况。

2 结 果

2.1 两组患者临床疗效情况比较 研究组的总有效率为96.00%，对照组为82.00%，研究组结果明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.2 两组患者牙周指标情况比较 治疗4周后，两组患者的牙周指标PD、PLI、SBI、GI和治疗前比较均明显降低，且研究组结果均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表2 两组患者临床疗效情况比较[例(%)]

表3 两组患者牙周指标情况比较

2.3 两组患者龈沟液中Shh蛋白、MMP-8水平情况比较 治疗4周后，两组患者龈沟液中Shh蛋白、MMP-8水平和治疗前比较均明显降低，且研究组结果均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 两组患者龈沟液中Shh蛋白、 MMP-8水平情况比较(ng/ml)

2.4 两组患者不良反应情况比较 治疗期间，两组不良反应情况对比显示，差异无统计学意义(P>0.05)，见表5。

表5 两组患者不良反应情况比较[例(%)]

3 讨 论

慢性牙周炎在老年人中具有较高的发病率，慢性牙周炎的发生不仅会对牙周组织、结构造成破坏，严重的甚至造成牙齿脱落，影响到日常生活质量[7]。牙周基础治疗是该病的常用治疗手段，主要是采用清洁、平整等机械方式，但难以有效的清除牙根面的菌斑和牙周袋深处部位的细菌，极易导致细菌再次侵袭，此时抗生素的使用则显得极为重要[8-9]。米诺环素是代表性的四环类抗生素，具有广谱的抗菌效应，主要是通过对病微生物细胞壁产生破坏作用，并对其蛋白质或者DNA的合成过程予以阻断，起到发挥抗菌效果[10]。但在慢性牙周炎患者中，牙周袋中的菌斑成分主要为革兰阳性、兼性厌氧菌，单独使用米诺环素对厌氧菌的作用效果有局限性[11]。奥硝唑是中硝基咪唑类抗生素，其对厌氧菌有着广谱的抗菌效果，其分子中的硝基可进入到病菌中，将致病菌转化成为氨基，并对其DNA合成产生抑制作用，产生抗菌作用[12]。刘晓静等[13]实验发现，通过将米诺环素及奥硝唑相互联合，可明显提高对慢性牙周炎患者的治疗效果。

Shh蛋白又被称作是刺猬因子，其信号通路在急慢性炎症反应过程中的作用也备受临床学者关注。有研究发现，在慢性牙周炎患者中，龈沟液中Shh蛋白的表达明显比健康人群高，主要机制是在炎症的刺激下，Sonic Hedghog信号通路会出现激活，导致Shh蛋白水平的升高，且随着局部炎症反应的加重，这种升高程度会更明显[14]。MMP-8又被称作是中性粒细胞胶原酶，对其的检测有助于反应机体组织损伤程度，当牙周组织出现炎症反应时，MMP-8的表达可出现大量释放，并对牙周结缔组织造成破坏作用，致使牙周附着丧失，并对牙槽骨的吸收产生影响[15]。

本研究所使用的复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶主要成分由米诺环素和奥硝唑组成，并加入温敏凝胶制成凝胶质地，结果显示，采用复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶的患者PD、PLI、SBI、GI及龈沟液中Shh蛋白、MMP-8水平的降低程度上明显优于使用米诺环素软膏的患者，且临床疗效高达96.00%，明显更具有优势，在复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶中，米诺环素和奥硝唑两者发挥相互协同作用，联合加强了抗菌、抗炎效果，且通过口腔局部给药的方式，可在牙龈部位产生直接作用，药物在病变组织可保证长时间的浓度效应，进一步缓解局部炎症反应，提高临床疗效。此外，温敏凝胶作为一种小分子凝胶，和米诺环素软膏的高分子成分相比，对皮肤和黏膜的刺激更小，在本研究中使用复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶的患者均无局部刺激、疼痛的现象，但在总体的不良反应比较上差异无统计学意义，考虑和样本量过少相关。但慢性牙周炎属于一种容易复发的疾病，由于时间限制，本研究未持续观察两组远期复发情况的差异，此后也将持续深入研究。

综上所述，复方米诺环素奥硝唑温敏凝胶治疗老年慢性牙周炎的疗效显著，可有效改善牙周指标、降低龈沟液中Shh蛋白、MMP-8水平的表达。