HSP70 TNF-α IL-4 与妊娠期高血压患者体液免疫的关系研究

王 影， 洪海漫， 孟 斐

(沈阳医学院附属中心医院产科, 辽宁 沈阳 110024)

妊娠期高血压是指妊娠期出现的高血压，主要表现为蛋白尿、水肿以及多器官损伤，且多数患者可在分娩后血压恢复正常，该病存在一定的地区差异，国外报道发生率为7～10%，而我国内陆地区为9%，高原地区为20%[1]。该病对母婴健康安全造成了较大的影响，是造成孕产妇和围产儿死亡的重要原因[2]。据WHO调查指出，妊娠期高血压在孕产妇死亡中的比重为15%。目前临床仍未明确该病的发生机制，但是多数学者认为遗传因素、免疫反应、氧化应激反应以及胰岛素抵抗在该病的发生中起到了重要的作用[3]。热休克蛋白70(HSP70)是热休克蛋白家族中含量最多且表达水平最高的应激蛋白，当机体出现感染、损伤以及缺血缺氧等情况时都可引起HSP70表达水平的升高。肿瘤坏死因子(TNF)是一种能够杀伤肿瘤细胞且对正常细胞无影响的细胞因子，是目前临床医学中发现肿瘤杀伤效果最强的生物活性因子之一，最常见的为TNF-α和TNF-β这两种类型[4]。TNF-α主要是由巨噬细胞分泌，起到调节免疫细胞的效果，可引起细胞凋亡，阻碍肿瘤生长和病毒复制[5]。白细胞介素-4(IL-4)是由活化T细胞产生的细胞因子，对于B细胞、T细胞、肥大细胞、巨噬细胞具有免疫调节的作用。本研究选取2016年12月至2019年6月108例医院收治妊娠期高血压患者和108例正常妊娠孕妇，分析HSP70、TNF-α、IL-4与妊娠期高血压患者体液免疫的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1临床资料:选取2016年12月至2019年6月108例医院收治妊娠期高血压患者作为观察组。纳入标准：①均符合《妇产科学》中关于妊娠期高血压的诊断标准；②均知情同意；③既往无糖尿病、高血压病史；④年龄均>20岁；⑤沟通、交流能力正常；⑥意思清醒，可配合研究。排除标准：①高血压家族遗传史；②严重肝肾功能异常；③合并心血管疾病；④合并自身免疫性疾病；⑤合并恶性肿瘤；⑥一般状况较差者。观察组患者年龄为22～35岁，平均为(28.6±3.5)岁；孕周为20～36周，平均为(32.6±2.6)周。另外选取同时期108例正常妊娠孕妇作为对照组，年龄为21～34岁，平均为(28.3±4.1)岁；孕周为21～37周，平均为(33.1±2.4)周，本组所有孕妇经产检身体各项指标均正常且无家族遗传病史。本次研究经医院伦理委员会批准。两组在一般资料方面的比较差异无统计学意义，具有可比性。

1.2方法:体液免疫指标检查方法:两组均空腹采集3mL肘静脉血于真空采血管，分离血清后3h内使用免疫比浊法进行检测，采用全自动生化分析仪以及配套试剂盒进行检测，均严格按照仪器及试剂盒说明书进行操作。HSP、TNF-α、IL-4检测方法:清晨空腹采集3mL静脉血，1000r/min速率离心5min，放置-80℃冰库保存。然后采用PCR法和ELISA法测量，使用多功能酶标仪、全自动生化分析仪以及配套试剂盒进行检测，均严格按照仪器及试剂盒说明书进行操作。

1.3观察指标:观察两组患者体液免疫指标以及血清HSP70、TNF-α、IL-4差异，并分析HSP70、TNF-α、IL-4与妊娠期高血压患者体液免疫的相关性。

2 结 果

2.1两组体液免疫指标差异:观察组C3、C4、IgA、IgG、IgM均明显低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组体液免疫指标差异

2.2两组患者血清HSP70、TNF-α、IL-4水平差异:观察组患者血清HSP70、TNF-α明显高于对照组(P<0.05)，且IL-4水平均明显低于对照组(P<0.05)，见表2。

2.3HSP70、TNF-α、IL-4与妊娠期高血压患者体液免疫的相关性分析：分析发现，HSP70、TNF-α、IL-4与妊娠期高血压患者体液免疫存在正相关性(P<0.05)，见表3。

表2 两组患者血清HSP70 TNF-α IL-4水平差异

表3 HSP70 TNF-α IL-4 与妊娠期高血压患者体液免疫的相关性分析

3 讨 论

妊娠期高血压是妊娠期常见的并发症，主要以妊娠期出现高血压及蛋白尿为主要表现，多数患者分娩后高血压症状自行缓解。但是该病对母婴健康造成了较大的威胁，可导致胎儿宫内发育迟缓以及孕产妇和围产儿死亡等不良妊娠结局。因此，引起了妇产科学的关注，近些年来随着临床研究的不断深入，发现遗传因素、免疫失调、氧化应激反应以及胰岛素抵抗与该病的发生有密切的相关性。遗传因素在妊娠期高血压发生中具有重要的作用，其具有母系遗传的特点，有统计学指出，母亲存在妊娠期高血压病史的孕妇其妊娠期高血压发生风险要明显高于母亲无妊娠期高血压病史的孕妇[6]。

妊娠是一个特殊的生理过程，从最早的免疫排斥到免疫耐受到最后发展为免疫应答平衡。有研究[7]发现，妊娠期高血压患者胎盘的蜕膜、绒毛膜、绒毛间质以及血管内皮下存在末端补体复合物异常表达的情况，同时还发现子宫蜕膜淋巴细胞补体表达水平升高的情况，这说明免疫机制在妊娠期高血压发生中起到了重要的作用。妊娠期高血压患者的补体系统被激活，从而导致补体裂解产物也产生相应升高趋势，同时会导致血清补体C3、C5水平下降，这与本次研究结果一致。血清免疫球蛋白以及补体水平反应了人体体液免疫状况，在健康孕妇中，母体与胎儿处于免疫应答平衡的状态，而妊娠期高血压患者可能由于免疫应答失调，从而引发了该病。本次研究中，观察组C3、C4、IgA、IgG、IgM均明显低于对照组，这说明妊娠期高血压患者与健康孕妇相比，体液免疫存在失调的情况，表现为各免疫指标表达水平下降。妊娠期高血压血清免疫球蛋白复合物增多可引起肾小球功能损伤，因此需要引起临床医学的关注。

HSP70是一种具有协同免疫作用的蛋白质，是热休克蛋白家族中的重要成员，在所有生物应激细胞中均有高度诱导的特征，具有保护机体和细胞的作用。HSP70在正常情况下血清含量较低，当人体出现应激状态下时出现异常升高趋势。目前临床对于热休克蛋白研究中最多的就是HSP70，正常情况下HSP70主要分布在胞浆中，当热休克刺激时核内HSP70明显升高，当细胞处于恢复状态时，核内HSP70完全消失，但细胞浆内仍存在HSP70。HSP70在细胞中执行的是最基础的生理功能，例如蛋白质折叠、伸展、运转、寡聚体形成等，维持细胞的生存和功能，当应激反应发生后，能够起到提高细胞抵抗力，从而达到应急保护的效果。有研究[8]通过对比轻度妊娠期高血压患者、中度妊娠期高血压患者、重度妊娠期高血压患者的血清HSP70发现，随着病情严重程度的增加，HSP70呈升高趋势，且与患者的病情程度呈正相关性。本次研究中观察组患者血清HSP70明显高于对照组，这说明妊娠期高血压患者存在高HSP70表达的特征，而健康孕妇血清HSP70水平较低，证实了妊娠期高血压的形成与应激反应有密切的相关性。由此可见，在妊高症发生过程中氧化应激反应与起到了重要的作用。

TNF-α作为一种炎性因子，具有介导细胞分化、增殖与凋亡的效果，过度表达将引起疾病的出现。TNF-α与多种免疫性疾病的发生有密切的相关性，例如类风湿性关节炎、恶性肿瘤以及胃炎等[9]。妊娠期高血压孕妇存在高TNF-α表达的特点，可能是由于基因突变导致患者TNF-α表达水平升高，从而引起了该病的发生，本次研究结果中，在妊娠期高血压患者胎盘中TNF-α表达水平明显高于正常孕妇。本次研究中观察组患者血清TNF-α明显高于对照组，这说明妊娠期高血压患者存在TNF-α异常表达的特征。TNF-α主要是由巨噬细胞产生，参与炎症、细胞凋亡以及血管生成过程，其可根据受体的不同而发挥不同的作用。TNF-α在免疫过程中可导致免疫失衡，引起大量毒性因子表达，从而导致胎盘滋养细胞凋亡，加重胎盘供血不足，并进一步加重TNF-α异常表达，引起血管内皮细胞损伤，导致ET表达水平升高，NO表达水平下降，促使血管收缩，加重了外周血管阻力，从而引起该病的发生。

IL-4能够刺激B细胞增殖，可有效提高B细胞产生抗原能力，促使免疫系统产生抗原刺激发生免疫应当，同时与B细胞促进IgE产生有密切的相关性。同时其对于Th2细胞具有维持增殖的效果，与IL-1存在协同作用的效果，可维持活化T细胞增殖。IL-4还能够提高巨噬细胞产生抗原以及杀伤肿瘤细胞的功能，能够提高中性粒细胞介导的吞噬和杀伤效果，能够抑制TNF以及IL-6的表达。此外，IL-4还可刺激肥大细胞增殖，与IL-3有协同作用效果。本次观察组IL-4水平明显低于对照组，这说明妊娠期高血压患者血清IL-4表达水平较低。

为了更好的筛查妊娠期高血压孕妇，从而尽早的进行干预和治疗，因此需要通过有效的观察指标进行检查。本次通过相关性分析发现，HSP70、TNF-α、IL-4与妊娠期高血压患者体液免疫存在密切的相关性，这说明HSP70、TNF-α、IL-4反应了妊娠期高血压患者体液免疫水平，可以作为临床筛查指标，从而尽早发现妊娠期高血压患者，尽早采取有效的干预措施。虽然大部分妊娠期高血压患者在分娩结束后血压会恢复正常水平，但是妊娠期高血压可引起多种不良妊娠结局，例如宫内发育迟缓、产后大出血以及围产儿死亡等，因此需要对于血压过高的患者采取降压治疗措施，避免不良妊娠结局的出现。

综上所述，妊娠期高血压患者体液免疫水平与HSP70、TNF-α、IL-4存在正相关性，可以通过HSP70、TNF-α、IL-4检查筛查高危孕妇，从而尽早给予有效的干预措施，保护母婴健康安全。