荞麦粉中总黄酮的含量测定研究

孟玉环

摘要：目的：建立荞麦粉中总黄酮含量的测定方法。方法：以芦丁为对照品，甲醇为溶剂，恒温振荡提取，分光光度计测定荞麦粉中总黄酮含量。结果：芦丁在0.00125～0.0200mg/mL范围内线性良好，相对标准偏差为3.2%，回收率在93.8%～98.5%之间。结论：该方法准确可靠，可用于日常检验工作。

关键词：荞麦粉；分光光度法；总黄酮

荞麦是一种营养丰富又兼具保健功能的药食两用植物，其富含的黄酮类化合物有降血糖血脂、防癌抗氧化等功效，因此也被作为荞麦及其制品的重要评价指标。本研究参照NY/T1295-2007标准方法，建立了以芦丁为对照品、甲醇为溶剂、恒温振荡提取、分光光度计测定荞麦粉中总黄酮含量的实验方法。

1. 材料与方法

1.1 材料与试剂

荞麦粉为超市自购袋装（200g/袋）；芦丁标准品（德国DR，批号：G165751）；三氯化铝、乙酸钾、甲醇均为分析纯；实验用水为三级水。

1.2 仪器与设备

721G可见分光光度计（上海仪电公司）；ME204电子天平（梅特勒-托利多）；恒温水浴振荡器、离心机、常规玻璃仪器。

1.3 实验方法

1.3.1 标准曲线的制备

准确吸取一定浓度系列的芦丁标准储备液（0.0500mg/mL）于10mL容量瓶中，分别加入0.1mol/L的三氯化铝溶液2mL、1mol/L的乙酸钾溶液3mL，用甲醇水溶液（7+3）定容，摇匀后静置0.5h，配制成标准工作系列，其浓度如表1。同时作空白。使用可见分光光度计在波长420nm处测吸光度（A），以A为横坐标，C为纵坐标，制作标准曲线。

1.3.2 试样溶液的制备

称取0.35g（精确值0.0001g）荞麦粉试样于具塞三角瓶中，加入30mL甲醇水溶液（7+3），盖紧瓶塞于65℃、160r/min的水浴振荡器中振荡2h，趁热过滤后转移入50mL容量瓶中，用甲醇水溶液洗涤残渣，合并滤液并定容、摇匀，制得待测液。

1.3.3 试样溶液的测定

准确吸取1.0mL待测液于10mL容量瓶中，按照标准曲线制备方法依次加入试剂溶液，静置0.5h后离心10min，依前法测得吸光度，代入标准曲线方程计算试样中总黄酮浓度。

2. 结果与讨论

2.1 標准曲线绘制

采用上述方法测定配制的标准系列，绘制标准曲线，如图1。回归方程为y=0.0275x-0.0001，R2=0.9993，表明对照品芦丁在0.00125～0.0200mg/mL范围内线性良好。

2.2 精密度试验

采用上述方法对某荞麦粉试样进行6次平行测定，记录吸光度值，计算得总黄酮含量分别为0.34、0.33、0.32、0.33、0.31、0.33g/100g，RSD为 3.2%，表明精密度较好。

2.3 加标回收试验

称取已知总黄酮含量的荞麦粉试样6份，准确吸取芦丁标准溶按低、中、高浓度（每个水平做平行实验）依次加入0.5mg、2.5mg、5mg芦丁对照品，按照本实验方法进行试样处理和吸光度测定，计算得加标回收率在93.8%～98.5%之间，符合GB/T 27404-2008的规定。

2.4准确度试验

为确认本实验方法的准确性，在期间精密度条件下对某荞麦粉试样进行实验室内部人员比对试验，两位检验员测得该荞麦粉中总黄酮含量分别为0.42g/100g、0.40g/100g，两次独立测定误差在NY/T 1295-2007要求范围内。

3. 结论

近年来，随着国民生活质量提升，荞麦作为保健食品愈为被广大消费者所重视。本研究建立的测定荞麦粉中总黄酮含量的方法操作简便、成本较低、准确可靠，可以满足基层实验室食品检测的需求，也可为大众食品安全提供保障。