分析糖尿病并微血管病变患者血CD62p和尿CD62p的表达及其临床意义

马志俊 刘川川 王先荣 金立民

（内蒙古自治区人民医院肾内科，内蒙古呼和浩特，010017）

机体长时间高血糖症状会诱发多种并发症，其中较为常见且严重的一种则为糖尿病肾病（DN），此也为导致糖尿病（DM）患者丧失生命的主要原因。疾病慢性病变中，循环血液静息性的血小板受生物因子、理化作用的影响，血小板中质膜糖蛋白和颗粒膜糖蛋白快速出现结构变化，进而变成活化血小板[1]。临床多采用凝集试验、β血小板球蛋白、血小板第4因子等方式测定活化血小板，虽有一定效果，但此类方式仅可半定量，标准化的难度较大，无法检测出血小板活化量。因此，近年应用中日益暴露出其缺陷。随着各项医学技术逐步改进，流式细胞仪、单克隆抗体等在临床各疾病诊治中得到应用，可通过测定血小板表面活化抗原状况，评估血小板活化状况，试验敏感性、特异性得到明显提高。现已有报告指出，通过测定DM并微血管病变患者的血CD62p、尿CD62p指标，利于评估病变[2]。但此方面报告较少，故本研究纳入80例DM患者和25例健康者对比论述此点。

1 资料及方法

1.1 一般资料

选取我内蒙古自治区人民医院于2015年4月～2018年12月期间收治的糖尿病患者80例，并纳入25例健康体检者作为对照组。

80例DM患者按尿白蛋白排泄率（AER）将其分DM组（共20例，AER＜20μg/min）、DN微量白蛋白组（共20例，AER为20～200μg/min，DNI组）、DN大量白蛋白组（共20例，AER＞200μg/min，DNII组）、DN尿毒症组（尿毒症组，共20例，肾功能降低至尿毒症阶段）。

DM组：年龄52～78岁，平均为（61.2±1.1）岁，女性9例，男性 11例；DNI组：年龄 51～77岁，平均为（61.5±1.2）岁，女性8例，男性12例；DNII组：年龄 52～78岁，平均为（61.8±1.2）岁，女性10例，男性10例；尿毒症组：年龄53～79岁，平均为（61.8±1.2）岁，女性7例，男性13例。对照组：年龄52～78岁，平均为（62.3±1.2）岁，女性12例，男性13例，基本资料性别、年龄差异无统计学意义（＞0.05）。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①80例DM患者均满足《2012年糖尿病诊疗指南》中DM判定标准；②研究方案经医院伦理会批准后实施；③患者均签字同意此次检测方式。

排除标准：①合并高血压、急性代谢紊乱疾病者；②肝、心、脑功能异常者；③合并风湿性疾病、肿瘤等疾病者；④纳入研究前3个月已使用治疗肾功能药物者；⑤纳入研究前3个月使用抗血小板药物者，如复方丹参、阿司匹林、双嘧达莫等；⑥中途脱落研究者。

1.3 方法

抽取其空腹静脉血液3mL、早晨尿液10mL，抗凝处理标本，离心处理10min，800r/min，分离上清，并装入试管中，加入500u多聚甲醛2.5%，均匀混合，15min后，加入2mLPBS，离心处理10min，1500r/min，洗涤3次，再混入PBS，调备为血小板悬液，分装到3支塑料试管，加入100μL血小板悬液，再加入CD62p 20μL，避光放置 15min，再加入 PBS 1mL，均匀混合后，待测。用流式细胞仪测定CD62p。

1.4 指标判定

本研究中各检测均由医院检验科2名专业且工作经验丰富的医生负责，若出现意见分歧则商讨确定。比较各组血CD62P、尿CD62P阳性表达率。

1.5 统计学方法

2 结果

比较血CD62P、尿CD62P阳性表达率，对照组低于DM组、DNI组、DNII组（＜0.05）；DNI组、DNII组高于 DM 组，尿毒症组血CD62p阳性表达率低于对照组，低于DM组、DNI组、DNII组（＜0.05）。DNI组与DNII组尿CD62p阳性表达率差异小（＞0.05）；DNII组血CD62p阳性表达率高于DNI组（＜0.05）。见表 1。

表1 比较血CD62p、尿CD62p指标 （±s）

表1 比较血CD62p、尿CD62p指标 （±s）

注：与对照组比较，1）＜0.05；与 DM 组比较，2）＜0.05；与DNI组比较，3）＜0.05；与 DNII组比较，4）＜0.05。

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3 讨论

目前认为糖尿病（DM）发病与环境、自身免疫、遗传等因素有关，发病后，若得不到有效控制，机体长时间处于高血糖症状，血小板受血糖刺激，释放量增高，激活血小板，对血小板生理功能有促进作用[3]。同时，因DM病情发展，多合并脂代谢异常，高脂血症会加大血液黏稠度，会并发微血管病变。机体中部分毛细血管处于细小病变或破损中，存在血小板黏附和聚集；且内皮组织、凝血过程中分泌的ATP血小板活化剂、凝血酶，对血小板活化有促进作用，肺泡表面活性物质（pulmonary surfactant，PS）、溶酶体蛋白GP53、血小板表面的α颗粒膜糖蛋白（GMP～140）附着在胞浆膜表面，加大纤维蛋白原暴露量，增高血小板膜糖蛋白IIb/IIIa（Gp IIb/IIIa）复合物[4]。活化血小板时，释放细胞内容物到细胞外，参与组织修复、炎症、凝血、止血过程，间接或直接对血管壁基质和血管壁细胞，导致内皮细胞紊乱，血管内出现血栓和斑块[5]。

血CD62p属于黏附分子，主要因血管内皮细胞、血小板合成，储存在血管内皮细胞和血小板小颗粒中，当刺激到内皮或血小板活化时，血小板质膜蛋白与颗粒膜两者融合，出现在血小板表面。以往认为，导致尿毒症者出血的主要原因为凝血因子和血小板指标降低，损伤到血管内皮；近年报告称，尿毒症者出血原因为血小板功能异常，血CD62p可敏感且早期的评估血小板聚集、黏附功能[6]。本研究结果显示，DM者血、尿CD62p阳性表达率高于对照组，DNII组高于DNI组且均组高于DM组（＜0.05）；同时DNII组血CD62p阳性表达率高于DNI组（＜0.05），说明且因病变的逐步发展，血小板活化有一定增高。本研究还表明，DN病变至尿毒症时，尿毒症组血CD62p阳性表达率低于对照组、DM组、DNI组、DNII组，表明病变发展至尿毒症时，机体血小板活性降低，但仍需进一步探讨相关机制。

综上，尿毒症患者机体中血小板活化降低，糖尿病者、糖尿病并微血管病变者随病情变化体内血小板活化均出现一定增强，临床通过测定其血CD62p、尿CD62p指标，利于早期监测和诊断糖尿病并微血管病变。