来曲唑改善体外受精-胚胎移植中卵巢慢反应患者的效果及机制研究

杨素娟 许月明 张杰 姚朝辉 王会霞 王少卿 郝桂敏

卵巢储备功能低的患者对促排卵治疗方案不是很敏感。体外受精-胚胎移植的方法比较多，目的是为了改善妊娠结局，但最后的结果并不是很满意。相关研究显示，卵巢中的雄激素可以提高卵泡颗粒细胞受体的表达水平，从而可以提高卵泡对卵泡雌激素受体的敏感[1]。来曲唑在临床上属于一种芳香化酶抑制剂类药物，它可以抑制对卵巢雄激转化为雌激素的过程，增加卵巢内雄激素的水平等。在此基础上，临床学者在卵巢慢反应患者的促排卵方案中加入了来曲唑，发现可以有效提高着床率、增加获卵数、降低周期取消率[2]。但是相关方面的报道较少，结果也不尽相同。因此，研究来曲唑改善体外受精-胚胎移中卵巢慢反应患者的临床效果及机制很有意义，可为临床用药提供科学依据。本研究在体外受精-胚胎移中卵巢慢反应患者治疗中，使用来曲唑进行治疗，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年7月至2017年2月河北医科大学第二医院收治的使用常规长方案进行IVF/ICSI采卵周期并出现卵巢慢反应的患者40例，根据临床治疗方案不同将其分为来曲唑组和rLH组，每组20例。来曲唑组年龄20～38岁，平均年龄(33.3±1.1)岁；rLH组20例，年龄20～40岁，平均年龄(34.1±0.8)岁；2组资料有一定的可比性(P>0.05)，本研究由医院伦理委员会审批。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：(1)年龄20～40岁，月经较规律，基础FSH<10 U/L；(2)在降调节后应用重组FSH(rFSH)的第7～8天，有>6个的卵泡，每个直径<10 mm；(3)最近3个月未接受过卵巢刺激；(4)均知晓同意此次研究。排除标准：(1)存在子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征(PCOS)的患者；(2)存在自身免疫性疾病或内分泌疾病、染色体异常疾病的患者；(3)以往接受过授精/卵胞浆内单精子注射治疗>2次的患者。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法：长方案组(GnRH-a降调)：黄体中期除外，患者妊娠后使用0.1 mg/d GnRH激动剂，连续使用14 d后对雌二醇、LH、FSH水平进行检测，同时进行阴道B超，确定垂体降调节达到目标后开始使用Gn，在促排卵第7～8天发生卵泡慢反应的患者分为来曲唑组与rLH组。曲唑组在原促排卵基础上使用2.5 mg/d的来曲唑(国药准字：H20123186，杭州中美华东公司生产)进行促排卵[3]。rLH组患者使用rLH继续进行排卵。

1.3.2 标本收集：患者在使用来曲唑、rLH、HCG的当天、取卵当天抽取静脉血5 ml放置到抗凝生化管中，用2 000 r/min的速度进行离心，时间为10 min，分别取上清液后冷冻收存[4]。通过阴道B超取卵时留取清亮无血污染的卵泡液10 ml(有卵子的卵泡腔)，将其中的5 ml用2 000 r/min的速度进行离心，时间为10 min，去除上清液后将细胞沉淀物使用PBS配备成悬液,另准备淋巴细胞分离液，根据1∶1的比例将细胞悬液加入淋巴细胞分离液中[5]。后用2 000 r/min的速度进行离心，时间为30 min，对颗粒细胞层吸取后用1∶10的比例加入PBS配置成悬液，用2 000 r/min的速度进行离心，时间为10 min。使用红细胞裂解液对其进行洗涤与溶解，后用2 000 r/min的速度进行离心，时间15 min[6]。最后加入PBS后用2 000 r/min的速度进行离心，时间为10 min，将上清液去除。另外，取5 ml卵泡液后用2 000 r/min的速度进行离心，时间为10 min，收集上清液。颗粒细胞与卵泡液均放置到-80℃的条件下进行保存。

1.4 观察指标 (1)比较2组患者Gn用药数、用药时间、促排卵治疗反应情况。(2)对2组患者进行随访，比较2组妊娠情况。(3)比较2组患者雄烯二酮、睾酮、孕激素、雌二醇水平，使用化学发光法对血与卵泡液中的雄烯二酮、睾酮、孕激素、雌二醇水平进行检测。

2 结果

2.1 2组Gn用药数、用药时间、促排卵治疗反应情况比较 来曲唑组Gn用药数、用药时间均少于rLH组，差异有统计学意义(P<0.05)，促排卵治疗效果优于rLH组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 Gn用药数、用药时间、促排卵治疗反应情况比较

2.2 2组妊娠情况比较 来曲唑组周期取消率

表2 妊娠情况比较 n=20

2.3 2组雄烯二酮、睾酮、孕激素、雌二醇水平比较 来曲唑组雄烯二酮、睾酮、孕激素水平高于rLH组，差异有统计学意义(P<0.05)，但雌二醇水平却低于rLH组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 雄烯二酮、睾酮、孕激素、雌二醇水平比较

3 讨论

体外受精技术由于本身的价值与潜在优势，近年在临床上得到了广泛的发展。来曲唑在临床上属于芳香化酶抑制剂(第三代，高度特异性)，该药物可以对雄激素转换为雌激素的过程进行抑制，且可以降低血浆中雌激素含量[7,8]。它对降低雌激素的水平有专一性，不会受到其他甾体激素的影响，在临床治疗雌激素依赖性肿瘤方面发挥了重要的作用[9,10]。2000年有学者开始将来曲唑用于促排卵，随着对来曲唑改善体外受精-胚胎移中卵巢慢反应患者的临床效果及机制研究，它在体外受精-胚胎移中逐渐得到了广泛的关注，希望可以成为改善体外受精-胚胎移卵巢慢反应患者的首选药物[11,12]。

研究显示，来曲唑组Gn用药数、用药时间

研究显示，来曲唑组周期取消率

综上所述，体外受精-胚胎移植中卵巢慢反应患者治疗中，来曲挫的效果显著，值得推广应用。