辣木叶提取物对2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体表达的影响

赵灿 刘翠翠 隋月林 朱建忠

【摘要】目的：分析辣木叶提取物对2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体表达影响情况。方法：选择60只雄性SD大鼠为实验样本。将其分为辣木叶提取物干预组、糖尿病组以及正常对照组3组，每组各20只。全面探究辣木叶提取物对2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体表达的影响情况。结果：糖尿病小鼠血糖以及血脂平明显比辣木叶提取物干预组、正常组要高;糖尿病组大鼠的脂肪变性同时合并较为明显的肝细胞坏死、炎细胞浸润。另外，其肝脏GR mRNA表达量与蛋白表达水平明显上升。与之相比，辣木叶提取物干预组大鼠血生化指标更为接近正常水平，其炎细胞浸润现象以及肝细胞脂肪变性、肝细胞坏死情况明显比糖尿病组大鼠要好。结论：通过辣木叶干预以后，糖尿病大鼠肝脏内GR基因mRNA表达量和蛋白表达量显著下降。辣木叶提取物能够发挥出减少2型糖尿病大鼠肝脏 GR mRNA表达以及蛋白表达的效用。

【关键词】辣木叶提取物;2型糖尿病;肝脏;受体;糖皮质激素;基因表达

【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6525（2020）03-0-01

最近几年，辣木叶提取物凭借着有效的抗氧化以及清除自由基效用，进而受到学术界的重视[1]。结合实际情况，本文全面探究辣木叶提取物针对于2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体表达影响情况，现报告如下。

1 资料与方法

1.1实验材料

选择60只雄性SD大鼠为实验样本。体重为150-180g。将其分为辣木叶提取物干预组、糖尿病组以及正常对照组3组，每组各20只。针对于辣木叶提取物干预组以及糖尿病组，均喂养高脂饲料，时间为一个月。目的在于全面诱发大鼠胰岛素抵抗。针对于辣木叶提取物干预组以及糖尿病组，在对其禁食12h之后为其腹腔内注射剂量为30mg/kg的链脲佐菌素。完毕之后72h，测定其空腹血糖情况。倘若该值8mmol/L以上，表明模型制作成功。

对照组大鼠于腹腔内注射等容积的枸橼酸缓冲液。针对于辣木叶提取物干预组实施剂量为50mg. Kg-1.d-1辣木叶提取物连续灌胃，时间为12周。糖尿病组以及对照组使用等容积的0.9%NS溶液，时间相同。在开展相关实验期间，辣木叶干预组以及2型糖尿病组均继续给予高脂饮食。而正常对照组，则实施普通饮食。所有动物均自由饮水和进食，完成实验之后禁食12h，人道处死实验动物。

1.2方法

完成上述处理之后取血，对上述样本的血液开展生化检验，测定血脂、血糖水平。利用放免法对血液样本内的胰岛素水平加以检测;同时HE染色光镜下查看肝脏组织形态学变化。利用RT-PCR测定实验样本肝脏组织GR mRNA表达情况。针对于实验样本肝组织蛋白表达情况，则利用免疫组化法完成检测工作。

1.3统计学原理

实验利用SPSS20.0统计学软件，对数据内的计量资料开展多组比较单因素方差分析LSD法完成计算，若方差不齐时，则开展秩和检验，当p<0.05时，证实相关数据存在统计学差异。

2 结果

2.1实验样本各项血生化指标改变详情

详细情况见表1。

2.2实验样本肝脏病理改变情况

通过肝脏组织HE染色切片表明，对照组大鼠没有出现脂肪变性与炎细胞浸润现象;糖尿病组大鼠肝细胞存在脂肪变性、肝小叶结构异常，同时存在多灶区肝细胞点样坏死。同时合并肝脏内单核細胞、淋巴细胞、中性粒细胞、浆细胞浸润与汇管区域混合炎性细胞浸润。辣木叶提取物干预组大鼠的肝细胞脂肪变性情况好于糖尿病组。

2.3肝脏组织GR mRNA表达情况

正常组大鼠GR mRNA表达情况为0.43±0.30;糖尿病大鼠GR mRNA表达情况为0.91±0.50。2组相比，P<0.05。干预组GR mRNA达情况为0.49±0.31，相较于糖尿病组，p<0.05。

2.4 GR免疫组化结果情况

正常组内，绝大部分肝细胞和中度表达GR，肝细胞为棕黄色;糖尿病组所有肝细胞核均呈现出了GR表达现象，表达量显著加强，核呈纤维棕黑色。辣木叶提取物干预组肝细胞核GR表达量减弱，接近与正常组水平。

3 讨论

本组实验研究表明，糖尿病小鼠血糖以及血脂平明显比辣木叶提取物干预组、正常组要高;糖尿病组大鼠的脂肪变性同时合并较为明显的肝细胞坏死、炎细胞浸润。另外，其肝脏GR mRNA表达量与蛋白表达水平明显上升。这也在根本上表明了糖尿病小鼠存在血脂血糖代谢紊乱与脂肪性肝炎症状。与之相比，辣木叶提取物干预组大鼠血生化指标更为接近正常水平，其炎细胞浸润现象以及肝细胞脂肪变性、肝细胞坏死情况明显比糖尿病组大鼠要好。

通过辣木叶干预以后，糖尿病大鼠肝脏内GR基因mRNA表达量和蛋白表达量显著下降。这也证实了辣木叶提取物能够发挥出减少2型糖尿病大鼠肝脏 GR mRNA表达以及蛋白表达的效用。其可能为减少2型糖尿病实验样本血脂、血糖值与减少肝内脂肪堆积量的重要性机制。

参考文献：

[1]董笑克，刘铜华，常青， 等.辣木叶醇提物对自发型肥胖型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病的影响[J].环球中医药，2019，12（8）：1149-1153.

[2]贺敏， 李雅萍， 黄仁彬. 抗糖尿病黄酮类活性成分的研究进展[J]. 中国医院药学杂志， 2009， 029（017）：1481-1483.