南宁市4307例妇女宫颈HPV感染状况及基因型分析

韦淑玉 黄卫彤 李筱瑜

南宁市妇幼保健院检验科，广西南宁 530011

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一种致病性很强的 DNA 病毒，根据其致病能力大小可分为高危和低危2个亚型[1]。研究证实低危型主要引起皮肤疣等良性病变，而高危型的持续感染在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变、宫颈小细胞神经内分泌癌等肿瘤的发展中起到了关键的作用[2-3]。从HPV感染到宫颈癌形成需要10～15年的时间[4]，因此及时熟知本地区HPV分型特征，尽早进行HPV感染防治对降低宫颈癌的发生率具有重大意义。越来越多的研究发现，HPV在不同地理区域的感染率及型别分布均存在一定差异[5-6]，本研究通过分析南宁市4307例妇女宫颈分泌物HPV的感染率及分型结果，旨在探讨感染的地域差异，为指导疫苗的研制及接种提供实验室依据，为降低HPV感染率，指导本市宫颈癌的预防及早期发现提供可靠依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象

采集2017年1月～2019年9月在本院妇科门诊就诊并参加分型检测的女性患者4307例，年龄16～78岁。合格的受检者条件：近期未怀孕、未来月经且7d内未有性生活、未经子宫切除术、48h内未服用阴道治疗药物。所收集的数据均为合格患者初次进行基因分型检测的结果，剔除二次复查数据。

1.2 样本采集

宫颈分泌物样本由妇科医生使用专用样本采集器采集，随后将采集器置于加有专用细胞保存液的取样管中盖紧并作好标记，4℃保存，一周内检测完毕。

1.3 主要试剂及检测仪器

深圳亚能生物技术有限公司试剂盒、黑马9600扩增仪、亚能YN-H16恒温杂交仪。

1.4 检测方法

按照试剂说明书操作步骤提取DNA后，使用基因扩增仪对提取的DNA进行扩增，扩增产物通过DNA反向点杂交结合法，与包被23种基因型目的片段（包含 17 种高危亚型：-16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82；6 种低危亚型：-6，11，42，43，81，83）的分型探针杂交，通过杂交信号的有无来判断是否存在基因型的感染。

1.5 统计学方法

应用SPSS23.0统计软件，计数资料感染率以%表示，组间比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究结果及亚型检出情况

本研究共检测23个亚型，所有亚型均被检出。4307例女性中共检出阳性病例1143例，总感染率为26.54%（1143/4307），其中单一感染833例，多重感染310例。感染以高危型为主，高危亚型阳性数860例，高危型感染率为19.97%（860/4307），检出率为75.24%（860/1143）。多重感染中高危+高危阳性数164例，感染率为3.81%（164/4307）；高危+低危阳性数141例，感染率为3.27%（141/4307），低危+低危阳性数5例，感染率为0.12%（5/4307）。23种亚型共检出1616次，高危型感染频度前六位依次为：52、16、58、51、53、18，检出率依次为：17.14%、11.88%、8.66%、7.37%、6.00%、4.33%。低危亚型中6型、42型、11型检出率较高，分别占5.51%、4.39%、3.59%。见表1。

2.2 本地区52、16、58、18亚型检出率与国内其他城市比较

将本地区52亚型的检出率与山东[7]、上海[8]、贵州[9]比较，差异有统计学意义（χ2=9.86、4.99、9.11，P＜0.05 ），与珠海[10]、武汉[11]比较差异无统计学意义（P＞0.05）；16亚型的检出率与山东[7]、上海[8]、贵州[9]比较，差异有统计学意义（χ2=32.92、3.96、155.67，P＜0.05 ），与珠海[10]、武汉[11]比较差异无统计学意义（P＞0.05）。58亚型的检出率与贵州[9]比较，差异有统计学意义（χ2=20.99，P＜0.05 ），与山东[7]、上海[8]、珠海[10]、武汉[11]比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。18亚型的检出率与山东[7]比较，差异有统计学意义（χ2=5.89，P＜0.05 ），与另外四个地区比较无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表1 各亚型的检出情况

3 讨论

宫颈癌是威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一[12]，其发病率在女性恶性肿瘤中位居第二[13]，发病率仅次于乳腺癌，每年约有25万人死于宫颈癌[14]。大量流行病学调查发现，持续性高危型HPV感染是宫颈癌及宫颈病变发生、发展的重要致病因素[2-3]。研究认为，HPV检测可明显降低后续宫颈上皮内瘤变的发生率，可作为宫颈癌主要筛查方法[15]，同时，我院就诊的人群中有一部分有生育需求，对孕前妇女进行检测有利于保障母婴健康和安全，因此及时了解本地区人群中人乳头瘤病毒的感染状况、感染分布特征具有重要流行病学意义。

表2 52、16、58、18亚型检出率与其他城市比较结果[n（%）]

本研究回顾性分析了4307例妇女宫颈HPV感染状况，结果显示南宁市妇女HPV感染率为26.54% ，与国内报道[16-17]的感染率基本一致，比袁艳等[11]报道的感染率略低，但也有研究显示部分地区感染率低于本研究[18-19]。调查发现，本地区HPV感染以高危型为主，高危型感染率为19.97%（860/4307），高于魏菁菁[20]等报道的高危型感染率。所有检出的亚型中，检出率最高的亚型是HPV52型（17.14%），其他常见亚型分别为16、58、51、53、6、42、18，与李霓等[13]报道的亚洲地区HPV16 、18 型的感染率显著高于 58、33、52 型不一致。有文献报道，HPV感染的高危型别在不同的地理区域存在一定差异[5-6]，我国长江以南常见型别依次为 16、18、58、52，长江以北地区以 16、58、53 亚型为主[21]，将本研究结果与同为长江以南的杨丹球等[22]报道的广西沿海地区常见高危亚型基本一致。将本市高危52、16、58、18亚型的检出率与山东[7]、上海[8]、贵州[9]、珠海[10]、武汉[11]比较，结果显示，差异有统计学意义。本市低危亚型以6型、42型、11型常见，也与裴蕴锋等[23]报道不一致。上述结果显示，本地区HPV亚型分布有明显地域性差异。这种差异可能与标本量、检测方法、地域、种族、叶酸摄入[24]、人口迁移等有关。

有研究显示，16、18、52、58 亚型是引起女性宫颈癌的重要优势型别[25]，对中国女性有特异性致癌作用[13]，本研究中门诊患者的HPV感染的优势亚型覆盖了宫颈癌的重要优势型别，进一步提示其为主要防控对象。

综上所述，南宁市妇女HPV感染率与国内报道基本一致，以高危型感染为主。与国内其他城市地区比较，HPV亚型分布具有明显地域差异。高危型感染以 52、16、58、51、53、18 亚型为主，在本地区宫颈癌筛查中，对上述亚型阳性的高风险妇女应给予持续跟踪关注，必要时早期采取阻断性治疗。结合本研究结果，将为指导南宁市HPV感染的监测、治疗与宫颈癌的防控提供重要科学数据和理论依据。