食管癌患者的SCC、CEA、CYFRA21-1水平及其临床意义研究

华星, 李从进, 荆成宝

肿瘤蛋白的检测能够在食管癌的诊疗过程中发挥定量化的参考依据作用。鳞状细胞癌抗原(SCC)是鳞状细胞癌特异性抗原,在鳞状上皮细胞异常病变的过程中,癌细胞异常分裂导致的细胞膜碎片能够显著促进SCC水平升高[1];癌胚抗原(CEA)是非特异性的肿瘤标志物,在胚胎组织或者未分化成熟的组织中,CEA的表达水平明显升高[2];细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)是细胞骨架蛋白成分,其主要表达于癌细胞器或细胞质中,在癌细胞少量凋亡的过程中,CYFRA21-1可释放入血[3]。本研究通过分析SCC、CEA、CYFRA21-1的表达与食管癌患者病情的关系,以期为食管癌的临床诊疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年5月至2018年5月在安康市中心医院接受治疗的食管癌患者100例,其中男55例,女45例;年龄52～79(63.9±4.2)岁,临床分期:Ⅱ期40例,Ⅲ期30例,Ⅳ期30例。纳入标准:①年龄≥50周岁;②经病理检查确诊为食管癌;③无其他系统严重疾病。排除标准:①临床资料不全;②合并其他消化道疾病;③合并其他原发肿瘤疾病。选取同期在我院接受体检的健康成年人100例为对照组，年龄51～78(63.9±3.6)岁,男52例,女48例。两组的年龄(t=0.218)、性别(χ2=0.501)比较差异无统计学意义,具有可比性。本研究经本院伦理委员会评审通过。

1.2 研究方法 采用一次性静脉血采集器取研究对象肘正中静脉血5 ml,取血清进行检测。利用安图2000PLUS和配套试剂盒,采用夹心法检测SCC和CYFRA21-1水平。用SCC抗体或CYFRA21-1抗体包备磁微粒,辣根过氧化物酶标记SCC抗体或CYFRA21-1抗体制备酶结合物。通过免疫反应形成抗体-抗原-抗体-酶复合物,该复合物催化发光底物液发出光子,发光强度与SCC抗体或CYFRA21-1抗体的含量呈正比。SCC与CYFRA21-1测试步骤相同:在反应孔内依次加入定标校准品和样本50 μl;每孔分别加入磁微粒混悬液20 μl;混匀后37 ℃温育15 min;清洗液洗涤5次;每孔加入酶结合物50 μl;混匀后37 ℃温育17 min;清洗液洗涤5次;每孔加入发光底物液A和B各50 μl;混匀后1～5 min检测发光强度;通过定标曲线及样本测试的信号值自动计算样本测试结果。

采用西门子XP直接化学发光法检测CEA。此检测采用两种抗体;第一种抗体在标记试剂中,是用吖啶酯标记的纯化多克隆兔抗CEA抗体。第二种抗体在固相试剂中,与顺磁性颗粒共价耦合的单克隆鼠抗CEA抗体。由全自动系统执行以下步骤:将50 μl样品加入到比色杯内;加入50 μl标记试剂和250 μl固相试剂,并在37 ℃下孵育7.5 min;分离,吸出,并用试剂水冲洗比色杯;加入酸性试剂和碱性试剂各300 μl,激发化学发光反应。

2 结果

2.1 两组血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平的比较

食管癌组患者的血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001,表1)。

表1 两组血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平的比较

2.2 不同临床病理特征食管癌患者血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平的比较 分化程度为中低分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者的血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平较高，不同年龄、性别食管癌患者的血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平差异无统计学意义，见表2。

表2 不同临床病理特征食管癌患者血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平的比较

2.3 影响食管癌患者SCC、CEA、CRFRA21-1水平的因素分析 以食管癌患者血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平为因变量,以单因素分析有意义的因素(分化程度、淋巴结转移、TNM分期)为自变量,进行线性回归分析,结果显示，分化程度和TNM分期是影响食管癌患者SCC、CEA、CYFRA21-1水平的因素,见表3。

表3 影响食管癌患者SCC、CEA、CYFRA21-1水平的因素分析

3 讨论

临床上对于食管癌患者整体性病情的评估,能够在指导食管癌的早期诊断、治疗方案的制定及临床预后随访评估方面发挥作用。影像学检查对于食管癌患者的病情评估具有一定的作用,但有些影像学检查如CT检查对于食管癌患者癌细胞的分化程度和组织学分级等病理特征的评估仍具有一定的局限性。通过血清中SCC的表达虽然能够评估食管癌患者鳞状上皮细胞癌异常病变风险,但单纯依靠SCC评估食管癌患者病情的假阳性率较高,其对于食管癌患者临床病理特征评估的特异性仍然较低。

SCC是鳞状上皮细胞抗原,其主要表达于鳞状上皮细胞膜糖蛋白结构中,在鳞状上皮癌细胞异常增殖的过程中,部分凋亡分解的鳞状上皮细胞能够显著促进SCC的释放;CEA主要表达于未分化成熟的胚胎组织中,在癌细胞分化调控障碍的过程中,CEA对于肿瘤细胞的非定向诱导作用能够进一步加剧癌细胞生物学特征的恶化[4];CYFRA21-1是细胞角蛋白成分,其对于癌细胞骨架结构的维持作用能够提高癌细胞的浸润和黏附风险[5]。

本研究结果显示,食管癌患者的血清SCC、CEA、CYFRA21-1蛋白表达水平明显高于健康对照成年人。SCC、CEA、CYFRA21-1的高表达对于食管癌病情的影响,一方面由于食管黏膜上皮癌变细胞异常增殖、浸润导致的癌细胞表面糖蛋白的释放增加；另一方面是由于癌细胞内肿瘤信号通路的激活,导致下游肿瘤效应因子的显著激活和释放,最终促进了SCC、CEA、CYFRA21-1蛋白的合成增加。有研究发现在食管癌患者血清中CYFRA21-1的水平上升30%以上,在具有较高的临床病情进展率或肿瘤负荷表现的患者中,CYFRA21-1蛋白的表达可随着患者病情的进展进一步升高[6-7]。

本研究发现在癌细胞分化程度较低、发生了明显的淋巴结转移或者临床分期Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者中,其血清中SCC、CEA、CRFRA21-1蛋白的表达浓度较高,表明在食管癌患者中SCC、CEA、CYFRA21-1的表达能够显著影响临床病情的整体性进展。SCC、CEA、CYFRA21-1对于临床病理特征进展的影响,主要是因为SCC、CEA能够反映癌细胞的浸润和黏附能力,提高癌细胞对于食管壁下肌层及食管引流淋巴结组织的浸润风险,最终促进临床分期的进展和淋巴结转移的发生;CYFRA21-1对于临床病理特征的影响,在于其能够提高肿瘤细胞的上皮-间质转换的风险,加剧肿瘤细胞生物学特征的恶化。本研究的单因素分析可见肿瘤细胞分化程度越低和临床分期越高是影响SCC、CEA、CYFRA21-1表达的危险因素,提示相关临床特征对于SCC、CEA、CYFRA21-1的表达有一定影响。

综上所述,食管癌患者血清SCC、CEA、CYFRA21-1水平较高,且受肿瘤细胞分化程度和TNM分期的影响。