妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织Akt 和GLUT-1 的表达与新生儿体重的相关性

杨小燕， 文丽， 张桂丽

（深圳市龙华区人民医院 妇产科， 广东 深圳518109）

妊娠期糖尿病 （GDM） 是指孕妇孕前糖代谢正常， 孕期发生糖耐量异常的综合性疾病［1］。 GDM 一般无显著的临床症状，血糖升高程度也较低， 但子宫内的高血糖环境会使孕妇发生产后出血、 子痫等并发症［2］， 还会导致胎儿发育过度、 体重增加。 导致GDM 的主要因素是产妇年龄过高、 孕前身体质量过高、 不良孕育史及糖尿病家族史［3］， 但与此有关的机制研究却很少。 本研究探讨GDM 孕妇胎盘组织Akt 和GLUT-1 的表达与新生儿体重的相关性， 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取我院2017 年9 月至2018 年2 月收治的40例GDM 孕妇为研究组， 平均年龄 （30.16 ± 4.36） 岁， 体重56.5 ～78.0 kg， 平均体重 （69.8 ± 5.3） kg。 另选取40 例同期分娩的健康孕妇作为对照组， 平均年龄 （28.36 ± 4.12） 岁， 体重54.5 ～75.0 kg， 平均体重 （67.7 ± 5.6） kg。 两组的一般资料比较无统计学差异 （P ＞0.05）。 两组孕妇均知情同意， 孕24 ～28 周行OGTT 实验。

1.2入选标准 纳入标准： ①符合国际妊娠糖尿病研究协会（IADPSG） 推荐的GDM 诊断标准［4］； ②单胎； ③待产天数正常。 排除标准： ①孕前心、 肺、 肾等功能不全； ②死胎或巨大儿病史； ③备孕或怀孕期间服用过干扰糖代谢药物， 代谢性疾病； ④子痫等并发症。

1.3 方法①孕期基本体征： 以迈瑞Mindray BS-220 全自动生化分析仪检测两组孕妇的空腹血糖 （FPG）、 空腹胰岛素（FINS）； 检测糖化血红蛋白 （HbA1c）， 记录孕期增重， 计算其身体质量指数 （BMI）， BMI ＝体重 （kg） ／身高的平方 （m2）。②检测两组胎盘组织中Akt、 GLUT-1 的表达： 采用免疫组化法检测胎盘组织中的Akt、 GLUT-1 的表达水平， 取分娩后1.0 cm × 1.0 cm × 1.0 cm 母体胎盘组织进行固定、 包埋、 切片、 切片脱蜡水化、 抗原修复、 脱水等操作， 透明后进行封片， 镜检。 以Image J 分析免疫组化结果， 计算平均光密度值。 ③Western blot 检测Akt 磷酸化水平及GLUT-1 蛋白的表达： 取胎盘组织60 mg， 通过Western 细胞裂解液离心获得上清液， 按照BCA 试剂盒所示步骤进行， 检测Akt 和GLUT-1 蛋白表达，然后采用BandScan 5.0 分析获得的目的蛋白条带。

1.4 统计学方法采用SPSS 24.0 统计软件处理数据， 计量资料以±s 表示， 比较采用t 检验， 以Pearson 法进行相关性分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组孕妇的基本资料比较研究组的孕期BMI、 孕期增重、FPG、 FINS、 HbA1c 水平均高于对照组 （P＜0.05）。 见表1。

表1 两组孕妇的基本资料比较 （±s）

表1 两组孕妇的基本资料比较 （±s）

注： 与对照组比较， *P ＜0.05。

HbA1c（%）研究组 40 24.59±4.23* 8.71±1.08* 4.49±0.71* 22.45±1.58* 7.23±2.16*对照组 40 22.49±4.72 7.01±0.99 3.54±0.62 10.31±1.06 5.19±1.58组别 n 孕期BMI（kg／m2）孕期增重（kg）FPG（mmol／L）FINS（μIU／mL）

2.2 两组孕妇胎盘组织中Akt 和GLUT-1的表达情况与新生儿出生体重比较两组孕妇胎盘组织中Akt 和GLUT-1 均有呈棕黄色颗粒的阳性细胞。 研究组阳性颗粒着色较浅且颗粒小， 平均光密度值均显著低于对照组 （P＜0.05）。 研究组的新生儿出生体重高于对照组 （P＜0.05）。 见表2。

表2 两组孕妇胎盘组织中Akt 和GLUT-1 的表达情况与新生儿出生体重比较 （±s）

表2 两组孕妇胎盘组织中Akt 和GLUT-1 的表达情况与新生儿出生体重比较 （±s）

注： 与对照组比较， *P ＜0.05。

组别 n Akt 平均光密度值 GLUT-1 平均光密度值 新生儿出生体重（kg）研究组 40 79.65±3.15* 112.16±2.64* 3.89±0.42*对照组 40 94.86±2.49 135.47±3.26 2.79±0.61

2.3 两组孕妇胎盘组织中Akt、 GLUT-1与新生儿体重的相关性Pearson 相关性分析显示， Akt 表达与新生儿体重呈负相关（r ＝-0.697， P ＝0.035）， GLUT-1 表达与新生儿体重也呈负相关性 （r ＝-0.768， P ＝0.029）。 见表3。

表3 两组孕妇胎盘组织中Akt、 GLUT-1 与新生儿体重的相关性

3 讨论

胰岛素抵抗是GDM 的标志性特征， 胰岛素信号通路改变及葡萄糖转运异常是胰岛素抵抗的原因［5］。 研究［6］表明，GLUT 异常表达与GDM 的发生具有紧密的联系， miR-518d 可能通过抑制GLUT1、 GLUT4 表达使葡萄糖转运发生变化， 从而产生胰岛素敏感性。 张莉等［7］的研究表明， AKT-mTOR 信号通路可影响蛋白质转运功能， 从而影响胎儿生长发育， 宫内高血糖环境可能通过抑制AKT-mTOR 信号通路改变胎儿发育轨迹。 胎盘是母亲和婴儿之间进行物质传递的主要通道， 而葡萄糖是胎儿发育过程中不可或缺的一类营养物质［8］。 作为胰岛素信号通路中的关键因子， Akt 和GLUT-1 在机体信号转导和葡萄糖转运方面发挥极大的作用［9］。 Akt 又称为PKB， 是机体内一种极其重要的信号转导途径， 其能在胰岛素刺激下磷酸化，并在一系列生化反应下激活GLUT， 进行葡萄糖转运［10］。 作为参与葡萄糖转运的GLUT-1， 在GLUT 中具有最丰富的表达量且分布最为广泛， 主要存在于微绒毛侧的细胞滋养细胞、 合体滋养细胞［11］， 是胎盘中最主要的葡萄糖转运载体， 在葡萄糖转运中发挥最主要的作用［12］。 GDM 孕妇血糖升高会影响这两种信号因子的合成， 造成表达水平降低， 从而导致其对胰岛素敏感性降低， 引发胰岛素抵抗。 本研究结果显示， 与对照组比较， 研究组的孕期BMI、 孕期增重、 FPG、 FINS、 HbA1c、 新生儿体重较高， Akt、 GLUT-1 表达较低， 且Akt 和GLUT-1 表达均与新生儿体重呈负相关， 表明Akt 和GLUT-1 表达水平的下降可能是新生儿体重上升的原因。

综上所述， 妊娠期孕妇胎盘组织中Akt 和GLUT-1 表达水平的下降可能是造成新生儿体重上升的原因， 其机制可能是GDM 孕妇出现胰岛素抵抗， 从而影响Akt 和GLUT-1 的表达，使胎儿蛋白质及脂肪的合成过量， 体重上升。