产细菌素益生菌——枯草芽孢杆菌HJD.A32生物学特性研究

贾丽艳 高娟娟 荆 旭 田宇敏 郭晋田 郝 林

（1 山西农业大学食品科学与工程学院 山西太谷030801 2 山西省白酒生物工程研究生教育创新中心 山西太谷030801）

益生菌具有改善机体胃、肠道微生态菌群，抑制胃、肠道致病菌的入侵，调节免疫，提高食物利用率和促进生长等生物学功能[1]。作为益生菌一般具备以下条件：对宿主有益，无毒副作用，无致病性；对胃酸和胆盐具有耐受性，能存活于消化道；可定植于消化道表面，能够产生有用的酶类和代谢物；在加工和贮存过程中能保持活性[2]。枯草芽孢杆菌是一类食品级安全的益生菌，存在于多种传统酿造食品（传统山西醋、豆瓣酱）的发酵过程中，并发挥着重要的作用[3-4]。与其它益生菌相比，具有耐高温、耐干燥以及稳定、便于运输和保存的特性，具有研究和开发的价值。

山西老陈醋是我国四大名醋之一，具有悠久的发展史，其食用安全，风味独特[5]。微生物对山西老陈醋的发酵生产及品质具有重要的作用，挖掘山西老陈醋醋醅中的微生物菌种资源，对促进山西食醋及相关微生态制剂的发展具有重要意义。

山西老陈醋醋醅中含有多种功能性微生物，枯草芽孢杆菌是其中的一类主要的功能性菌株[6-7]，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HJD.A32 是从山西老陈醋醋醅中筛选出的一株能产广谱抑菌细菌素的菌株，可抑制多种食源性有害微生物的生长，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等[8]，具有优化生物个体内微生物菌群结构的潜能，以及作为益生菌开发的价值。本研究采用酶学方法、分光光度法和牛津杯法对分离自山西老陈醋新鲜醋醅的产细菌素枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生物学特性进行研究，为该菌株作为益生菌微生态制剂的开发和利用奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 枯草芽孢杆菌HJD.A32，分离自山西老陈醋的新鲜醋醅。

1.1.2 主要试剂和仪器 试剂：胰蛋白酶（2 000～5 000 U/mg）、胃蛋白酶（3 000～3 500 U/mg），北京solarbio 公司。其它化学试剂均为分析纯级。

设备与仪器：高速低温离心机（Centrifuge5417 R），德国Eppendorf 公司；电热恒温鼓风干燥箱（GZX-GF101-3-BS-Π/H），上海跃进医疗器械有限公司；pH 计（PHS-4A），上海精密科学有限公司；电热恒温培养箱（HPX-9272MBE），上海博讯；可见分光光度计（722G），上海精密科学仪器有限公司。

1.1.3 培养基

1）发酵培养液[8]葡萄糖10 g，酵母浸膏10 g，蒸馏水1 000 mL。

2）牛肉膏蛋白胨培养基[9]NaCl 5 g，蛋白胨10 g，牛肉膏5 g，琼脂15 g，蒸馏水1 000 mL，pH7.2～7.4。

3）麸皮固态培养基 将20 g 麸皮、20 mL 水加入到250 mL 的三角瓶中，混匀后，将其置于121 ℃、0.1 MPa 条件下，灭菌20 min，冷却至室温，备用[10]。

1.2 方法

1.2.1 枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长曲线的建立按4%接种量将活化的枯草芽孢杆菌HJD.A32 接种于发酵培养液中，分别在30，37，40，45，50，55℃条件下培养枯草芽孢杆菌HJD.A32，每隔6 h 测定发酵液的OD600值。

1.2.2 固态发酵枯草芽孢杆菌HJD.A32 产酶性能的测定 将枯草芽孢杆菌HJD.A32 接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，活化培养24 h，挑取单菌落于发酵培养液中，30 ℃培养24 h，然后以4%的接种量转接到麸皮固态培养基上，混匀，分别于30，35，40，45，50 ℃和55 ℃的条件下培养48 h，测定酶活力。液化酶活力的测定采用碘量法[11]。液化酶活力单位定义：1 g 绝干重发酵麸皮固态培养基制备成的粗酶液，在35 ℃、pH 4.6 的条件下，1 h 液化1 g可溶性淀粉，为1 个液化酶活力单位，以U/g 表示。糖化酶活力的测定采用DNS 法[12]。酶活力单位定义：1 g 绝干重发酵麸皮固态培养基制备成的粗酶液，在40 ℃，pH 4.6 条件下，1 h 分解可溶性淀粉，产生1 mg 葡萄糖的酶量，为1 个糖化酶活力单位，以U/g 表示。蛋白酶活力的测定采用福林-酚法[13]。酶活力单位定义：1 g 绝干重发酵麸皮固态培养基制备成的粗酶液，在40 ℃下每分钟水解酪蛋白产生1 μg 酪氨酸，定义为1 个蛋白酶活力，单位以U/g 表示。

1.2.3 液态发酵枯草芽孢杆菌HJD.A32 产酶性能的测定 将枯草芽孢杆菌HJD.A32 接种于牛肉膏蛋白胨培养基，活化培养24 h，挑取单菌落于发酵培养液中，30 ℃培养24 h，然后以4%的接种量转接到发酵培养液中，分别在30，35，40，45 ℃和50℃的条件下培养48 h，取发酵液上清液，测定酶活力。液化酶活力的测定采用碘量法[11]。酶活力单位定义：1 g 发酵液上清液，在35 ℃、pH 4.6 的条件下，1 h 液化1 g 可溶性淀粉，定义为1 个液化酶活力单位，以U/g 表示。糖化酶活力的测定采用DNS 法[12]。酶活力单位定义：1 g 发酵液上清液，在40 ℃，pH 4.6 条件下，1 h 分解可溶性淀粉，产生1 mg 葡萄糖的酶量，定义为1 个糖化酶活力单位，以U/g 表示。蛋白酶活力的测定采用福林-酚法[13]。酶活力单位定义：1 g 发酵液上清液，在40 ℃下每分钟水解酪蛋白产生1 μg 酪氨酸，定义为1个蛋白酶活力，单位以U/g 表示。

1.2.4 枯草芽孢杆菌HJD.A32 盐耐受性的测定将NaCl 分别加入发酵培养液中，使其质量分数分别为0%，1%，2%，4%，5%，7%，8%，10%，121 ℃，0.1 MPa 灭菌20 min。将活化后的枯草芽孢杆菌HJD.A32 按4%接种量接种于发酵培养液中，30℃，147 r/min 条件下培养24 h 后，测定发酵液的OD600值。

1.2.5 枯草芽孢杆菌HJD.A32 胆盐耐受性的测定将猪胆盐加入发酵培养液中，使其质量分数为0%，0.2%，0.4%，0.6%，0.8%，1%，121 ℃，0.1 MPa灭菌20 min。将活化的枯草芽孢杆菌HJD.A32 按4%接种量接种于发酵培养液中，30 ℃，147 r/min条件下培养24 h，测定发酵液的OD600值。

1.2.6 枯草芽孢杆菌HJD.A32 表面活性剂耐受性的测定 将表面活性剂分别加入发酵培养液中，使其终质量分数分别为0.2%，0.4%、，0.6%，0.8%，1.0%。将活化的枯草芽孢杆菌HJD.A32 按4% 接种量接种于发酵培养液中，30 ℃，147 r/min 条件下培养24 h，测定发酵液的OD600值。表面活性剂包括脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠（AES）、十二烷基硫酸钠（SDS）、吐温20、吐温80、十二烷基苯磺酸钠（LAS）。

1.2.7 枯草芽孢杆菌HJD.A32 热耐受性的测定将活化的枯草芽孢杆菌HJD.A32 按4%接种量接种于发酵培养液中，分别于60，70，80，90，100 ℃条件下水浴5 min，在30 ℃，147 r/min 条件下培养72 h，每隔6 h 测定发酵液的OD600值。

1.2.8 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对胃液耐受性的测定 分别取pH 2.5，3.0，3.5 的盐酸溶液50 mL 于三角瓶中，121 ℃灭菌20 min。冷却至50 ℃以下加入1%的胃蛋白酶，混匀，备用。将过夜培养的枯草芽孢杆菌HJD.A32 溶液离心，取沉淀菌体于三角瓶中，培养，每间隔30 min 测定培养液OD600值。

1.2.9 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对肠液耐受性的测定 取100 mL 0.68% KH2PO4溶 液，121 ℃，0.1 MPa 灭菌20 min，冷却至30 ℃，加入1%胰蛋白酶，混匀，备用。将过夜培养的枯草芽孢杆菌HJD.A32 离心后，取其沉淀菌体于三角瓶中，培养，每隔30 min 测定培养液OD600值[14]。

1.2.10 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对抗生素类药物耐受性的测定 采用双层牛津杯法[15]测定枯草芽孢杆菌HJD.A32 对抗生素类药物的耐受性。将15 mL 融化的牛肉高蛋白胨培养基倒入培养皿内，待其凝固。将融化的牛肉高蛋白胨培养基冷却到50℃，按0.8%接种量加入活化的枯草芽孢杆菌HJD.A32，混匀，倒于已凝固的培养基上，将培养皿半敞口，静置于超净台上，待其凝固40 min 后盖上皿盖。在培养基表面垂直放上已灭菌的牛津杯，轻轻按压，向牛津杯中加入200 μL 无菌抗生素溶液，4℃，静置12 h，30 ℃培养24 h，测定抑菌圈的大小。

2 结果与讨论

2.1 枯草芽孢杆菌HJD.A32 的产酶性能

2.1.1 枯草芽孢杆菌HJD.A32 产液化酶的能力不同的发酵方式对枯草芽孢杆菌HJD.A32 产酶性能有一定的影响。由图1可知，枯草芽孢杆菌HJD.A32 麸皮固态发酵比液态发酵产液化酶能力强。当30 ℃培养时，枯草芽孢杆菌HJD.A32 固态发酵产液化酶活力高达4.43 U/g。培养基的营养条件影响枯草芽孢杆菌的代谢，麸皮中含有≥12%的淀粉，促使枯草芽孢杆菌产生液化酶。液态培养基中淀粉含量低，使得枯草芽孢杆菌HJD.A32 产酶能力不高。此外，温度对枯草芽孢杆菌产液化酶能力也有一定的影响，随着培养温度的升高，枯草芽孢杆菌HJD.A32 产液化酶的能力降低。

2.1.2 枯草芽孢杆菌HJD.A32 产糖化酶的能力由图2可知，枯草芽孢杆菌HJD.A32 麸皮固态发酵比液态发酵产糖化酶能力强。当30 ℃培养时，枯草芽孢杆菌HJD.A32 固态发酵产糖化酶活力高达1 874.23 U/g。此外，温度对枯草芽孢杆菌产糖化酶能力也有一定的影响，随着培养条件的升高，枯草芽孢杆菌HJD.A32 产糖化酶的能力降低。

图1 固态和液态发酵条件下枯草芽孢杆菌HJD.A32 产液化酶的活力Fig.1 The ability of liquefaction produced by B.subtilis HJD.A32 in the solid fermentation or the liquid fermentation

图2 固态和液态发酵条件下枯草芽孢杆菌HJD.A32 产糖化酶活力Fig.2 The activity of glucoamylase produced by B.subtilis HJD.A32 in the solid fermentation or the liquid fermentation

2.1.3 枯草芽孢杆菌HJD.A32 产蛋白酶的能力由图3可知，枯草芽孢杆菌HJD.A32 固态发酵比液态发酵产蛋白酶的能力强，最高产蛋白酶活力达181.91 U/g。发酵温度对枯草芽孢杆菌HJD.A32产蛋白酶的能力有一定的影响。当温度30～45 ℃时，随着培养温度的升高，蛋白酶活力基本不变；当培养温度45～55 ℃时，随着培养温度的升高产蛋白酶能力逐渐降低。

2.2 枯草芽孢杆菌HJD.A32 的环境耐受性

2.2.1 温度对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长曲线的影响

由图4可知，当温度30～50 ℃时，菌体生长繁殖曲线趋势相似，即在0～24 h 时，菌体生长缓慢，处于延缓期；在24～48 h 时，菌体生长速率最快；在48 h 时，菌体生长速率放缓，而生物量还在增加，处于稳定期；48 h 后生物量开始下降，进入衰亡期。随着温度的升高，最高OD600值逐渐变低，表明菌株的生长繁殖速度受到温度的影响。当温度55 ℃时，生长曲线趋于一条直线，表明55 ℃时枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长繁殖完全被抑制。

图3 固态和液态发酵条件下枯草芽孢杆菌HJD.A32 产蛋白酶活力Fig.3 The activity of protease produced by B.subtilis HJD.A32 in the solid fermentation or the liquid fermentation

图4 温度对枯草芽孢杆菌HJD.A32生长曲线的影响Fig.4 The growth curve of B.subtilis HJD.A32 at different culture temperatures

2.2.2 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对盐的耐受性 渗透压影响微生物的生长、繁殖，渗透压过高时，使微生物发生质壁分离而死亡。NaCl 溶于水会引起溶液渗透性升高，抑制菌体的生长，具有抑菌、杀菌的功能[16]。由图5可知，随着NaCl 含量的增加，枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长受到不同程度的抑制。当氯化钠质量分数为6%时，OD600值为0.06；当NaCl 质量分数为8%～10%时，OD600值为0.02，表明菌体几乎不生长，由此推断，菌体最高耐受NaCl 质量分数为6%，具有较强的盐耐受性。

2.2.3 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对胆盐的耐受性由图6可知，随着胆盐浓度的增长，枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长繁殖受到不同程度的抑制。当胆盐质量分数为1.0%时，OD600值为0.039，说明菌体生长受到较大的抑制，菌体最高可耐受的胆盐浓度为1.0%。益生菌在肠道发挥益生作用，需经受住小肠液对它的破坏才能在动物胃、肠道中存活和增殖，十二指肠中的胆汁酸盐对外源细菌有抑制作用，菌体只有具备较高的胆盐耐受性才能保持足够的活菌数，从而发挥益生作用[17]。一般情况下，肠道胆盐质量分数为0.3%左右。为此，枯草芽孢杆菌HJD.A32 能够适应肠道胆盐环境，可在其中生长繁殖。

图5 NaCl 对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的影响Fig.5 Effect on NaCl to B.subtilis HJD.A32

图6 胆盐对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的影响Fig.6 Effect on bile salt to B.subtilis HJD.A32

2.2.4 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对表面活性剂的耐受性 为了保证微生态制剂的品质，在微生态制剂的制备过程中，往往需要添加一些乳化剂或表面活性剂，如吐温20、吐温80、司本80、SDS 等，研究菌株对这些化学试剂的耐受性，对微生态制剂的开发利用具有重要意义。由图7可知，不同种类和浓度的表面活性剂或乳化剂对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长有不同的影响，当表面活性剂或乳化剂质量分数为0.2%时，LAS 和AES 促进枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长，吐温80 和吐温20 对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长无影响，SDS 抑制枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长；当表面活性剂或乳化剂质量分数在0.4%～0.6%时，LAS 和AES 对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长的促进作用逐渐降低，吐温80、吐温20 和SDS 对枯草芽孢杆菌HJD.A32生长的抑制作用增强；当表面活性剂或乳化剂浓度≥0.8%时，表面活性剂对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长均表现为抑制作用。总之，表面活性剂或乳化剂对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长，在一定浓度范围内有抑制作用，抑制效果依次为SDS＞吐温20＞吐温80＞LAS＞AES。

2.2.5 枯草芽孢杆菌HJD.A32 的高温耐受性 微生物制剂制备过程中往往需要干燥处理，以防杂菌污染和便于保存，然而，不同的干燥温度影响微生物制剂活菌存活率。由图8可知，随着处理温度的升高，枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长受到一定程度的抑制，100 ℃处理5 min，菌体仍可生长繁殖，达到较高的OD600值，表明其对高温具有一定的耐受性。

图7 表面活性剂或乳化剂对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的影响Fig.7 Effect on different surfactants or emulsifier to B.subtilis HJD.A32

图8 高温对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的影响Fig.8 Effect on high temperature to B.subtilis HJD.A32

2.2.6 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对胃液的耐受性人体胃液的pH 值一般在3 左右，具有很强的杀菌能力。它是益生微生态制剂进入肠道发挥功能必经的一道屏障。本试验模拟胃液环境，建立了不同pH 值的人工胃液，研究胃液环境对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长的影响，结果见图9。随着pH 值的降低，OD600值越来越低，表明胃液环境对枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长有一定的抑制作用。OD600值较初始值升高，表明在低酸胃液环境下芽孢杆菌能生长，具有一定的耐受性。

2.3.7 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对肠液的耐受性小肠是益生菌发挥功能的场所，小肠内含有保持一定数量的活菌数是益生菌发挥作用的必要条件。小肠液是影响益生菌数量的主要因素。本试验模拟肠液的条件，研究枯草芽孢杆菌HJD.A32 对肠液的耐受性，结果见图10。小肠液对枯草芽孢杆菌HJD.A32 的生长有促进作用。这与郭小华等[18]对两株益生芽孢杆菌的研究相似。芽孢杆菌在模拟肠液中，随着培养时间的延长，芽孢杆菌能够适应并在这种环境中繁殖，

图9 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对胃液的耐受性Fig.9 Tolerance on gastric juice to B.subtilis HJD.A32

图10 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对肠液的耐受性Fig.10 Tolerance on intestinal juice to B.subtilis HJD.A32

2.2.8 枯草芽孢杆菌HJD.A32 对抗生素的耐受性

由表1可知，枯草芽孢杆菌HJD.A32 在不同的抗生素中表现不同的敏感性。当抗生素质量浓度为1 mg/mL 时，枯草芽孢杆菌HJD.A32 对β-内酰胺类中的阿莫西林和氨苄青霉素、四环素类中四环素、酰胺醇类中氯霉素和甲砜霉素、大环内酯类、硝基咪唑类和磺胺类表现出极敏感；对酰胺醇类中氟苯尼考表现出高敏感；对β-内酰胺类中青霉素、氨基糖苷类表现出中度敏感；对喹诺酮类中氧氟沙星表现为不敏感。当抗生素质量浓度为10-1mg/mL 时，枯草芽孢杆菌HJD.A32 对喹诺酮类中氧氟沙星、硝基咪唑类中甲硝唑表现出极敏感；对β-内酰胺类中阿莫西林和氨苄青霉素、四环素类中四环素、酰胺醇类中氯霉素、大环内酯类中红霉素表现出高敏感；对氨基糖苷类中链霉素、氨基糖苷类中庆大霉素和新霉素、四环素类中土霉素、酰胺醇类中甲砜霉素表现出中度敏感；对β-内酰胺类中青霉素、酰胺醇类中氟苯尼考、硝基咪唑类中替硝唑和磺胺类表现出低敏感。当抗生素质量浓度为10-2mg/mL 时，对β-内酰胺类中阿莫西林和氨苄青霉素、四环素类中四环素、酰胺醇类中氯霉素、大环内酯类中红霉素、硝基咪唑类中甲硝唑表现出中度敏感，对β-内酰胺类中青霉素、氨基糖苷类中链霉素、四环素类中土霉素、酰胺醇类中甲砜霉素、喹诺酮类中氧氟沙星、硝基咪唑类中替硝唑表现出低敏感。当抗生素质量浓度为10-3mg/mL 时，枯草芽孢杆菌HJD.A32 对四环素类、喹诺酮类中氧氟沙星、硝基咪唑类中替硝唑表现出低敏感。当抗生素质量浓度为10-4mg/mL和10-5mg/mL 时，硝基咪唑类中替硝唑表现出低敏感。总之，枯草芽孢杆菌HJD.A32 除对喹诺酮类中的诺氟沙星不敏感外，对其它抗生素都敏感。随着抗生素浓度的升高，表现为很敏感，表明该菌体不具有耐药性，作为益生微生态制剂可以放心使用。

3 结论

1）枯草芽孢杆菌HJD.A32 具有良好的产酶性能，在麸皮固态培养基上30 ℃培养48 h，液化酶、糖化酶和蛋白酶活力达4.43，1 874.23 U/g 和181.91 U/g，具有促进胃、肠道蛋白类物质及淀粉类物质消化的功能。

2）枯草芽孢杆菌HJD.A32 生长曲线的变化趋势在30～50 ℃之间保持生长，而生长繁殖速度随着温度的升高逐渐降低。当温度在55 ℃以上时，生长繁殖可受到抑制。

3）枯草芽孢杆菌HJD.A32 对氯化钠和胆盐有一定的耐受性，最高耐氯化钠、胆盐质量分数分别为6%，1%；对表面活性剂或乳化剂（SDS、LAS、AES、吐温20、吐温80）具有一定的耐受性；具有高温耐受性，经高温100 ℃处理5 min 仍可以生长繁殖；对模拟人工胃液和肠液有一定的耐受性，随着培养时间的延长，该菌可以适应这种环境并生长繁殖；枯草芽孢杆菌HJD.A32 除对喹诺酮类中的诺氟沙星不敏感外，对其它多种抗生素都敏感。以上研究为产细菌素枯草芽孢杆菌HJD.A32 微生态制剂的开发奠定了理论和应用基础。

性感----------------+-敏-5 10 /mm圈菌抑 性感敏0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-2.01±0.19+0.00±0.00-。＞20 mm圈菌，抑性感敏的素生抗 对HJD.A32菌杆孢芽草枯 1表Sensitivityof B.subtiilis HJD.A32 to antibiotics Table 1 -1·mL /mg度浓量质素生抗-4 10-3 10-2 10-1 10 1 /mm圈菌抑 性感敏 /mm圈菌抑 性感敏 /mm圈菌抑 性感敏 /mm圈菌抑 性感敏 /mm圈菌抑0.00±0.00-0.00±0.00++11.18±0.24+++19.18±0.10++++ 23.10±0.16 林西0.00±0.00-0.00±0.00+2.03±0.10+5.02±0.11++12.20±0.23素0.00±0.00-0.00±0.00++10.07±0.13+++15.01±0.22++++ 20.19±0.15 素霉青0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00+9.19±0.09++13.01±0.11素霉0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00+4.24±0.18++11.03±0.17素0.00±0.00-0.00±0.00+9.34±0.21++10.21±0.11++12.04±0.13素0.00±0.00+5.01±0.14++11.18±0.12+++16.19±0.17++++ 21.06±0.10 素0.00±0.00+2.19±0.34+6.34±0.23++13.31±0.31+++18.14±0.2素0.00±0.00-0.00±0.00++13.19±0.2+++17.04±0.24++++ 26.16±0.19 素0.00±0.00-0.00±0.00+5.17±0.16++13.16±0.32++++ 20.14±0.30 素霉0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00+9.07±0.20+++18.18±0.16考尼0.00±0.00-0.00±0.00++11.31±0.24+++15.20±0.18++++ 25.13±0.14 素0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00++++22.31±0.21 素霉0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00星沙0.00±0.00+2.06±0.14+9.01±0.31++++20.19±0.18 ++++ 22.03±0.23 星沙0.00±0.00-0.00±0.00++12.34±0.21++++ 20.14±0.15 ++++ 24.07±0.24 唑3.15±0.24+4.51±0.26+5.15±0.15+6.18±0.21++++20.16±0.24 唑0.00±0.00-0.00±0.00-0.00±0.00+4.57±0.15++++21.17±0.34 感敏极示”表；“++++圈＜20 mm菌，抑感敏高示”表；“+++＜15 mm圈菌，抑感敏中示”表；“++＜10 mm圈菌，抑感敏低示”表；“+圈＜0 mm菌素生抗莫阿类胺酰内β-霉青苄氨大庆类苷糖基氨霉新霉链环四类素环四霉土霉氯类醇胺酰砜甲苯氟霉红类酯内环大奇阿氟诺类酮诺喹氟氧硝甲类唑咪基硝硝替胺磺类胺磺，抑感敏不示”表：“-注