蛋黄油和豆油的提取工艺及成分对比分析

朱慧蒙，黎 敏，韦能丹,曹晓琴

（江汉大学医学院药学系，湖北 武汉 430056）

蛋黄油是鸡蛋黄中脂溶性物质的总称，其含有的脂肪类成分主要有磷脂类(32.8%)、脂肪酸类(62.3%)、少量的固醇(4.9%)和微量脑磷脂[1]，具有清热解毒、收敛、止血、止痛等功效，多用于烧伤、湿疹、耳脓、疮疡等症，还具有杀菌、消炎、止痛和修复表皮细胞的功能。因此，对蛋黄油的开发利用一直是国内外学者研究的热点[2]。

大豆油中含棕榈酸7%～10%，硬脂酸2%～5%，油 酸22%～30%，亚 油 酸50%～60%，亚 麻 油 酸5%～9%，脂肪酸构成较好。豆油含有丰富的亚油酸，有显著降低血清胆固醇含量、预防心血管疾病的功效，此外还含有大量的维生素E、维生素D 及丰富的卵磷脂，对人体健康非常有益。大豆油的人体消化吸收率高达98%，是一种营养价值很高的优良食用油，具有研究价值[3]。

文献检索表明，对蛋黄油成分含量的研究甚少，故笔者以蛋黄油和豆油为材料，采用正交实验法，探究蛋黄油萃取的最佳工艺，再对蛋黄油和大豆油中的脂肪酸成分进行分析对比，以期能够优化蛋黄油的萃取方法，提高蛋黄油中脂肪酸成分的含量，为蛋黄油在临床的实际利用以及良好剂型制备提供一定的实验数据。

1 实验部分

1.1 材料与试剂

蛋黄，豆油（外购）。

乙酸乙酯、正己烷、氢氧化钠、无水甲醇、醋酸（均为分析纯）。超纯水（自制）。

1.2 仪器设备

圆底烧瓶、水浴锅、冷凝管、布氏漏斗、抽滤瓶、旋转蒸发仪、锥形瓶（若干）、ME104E 电子天平、气相色谱仪。

1.3 实验方法

1.3.1 蛋黄油的萃取

参照文献[4]的方法，将蛋黄干燥处理后得到蛋黄粉，按蛋黄粉∶萃取剂=1∶4 的比例，分别称取蛋黄粉10g，乙酸乙酯40mL 于圆底烧瓶中，水浴1h，控制温度为50℃。反应结束后立即抽滤2 次，合并2 次萃取液进行减压蒸馏，水浴温度50～60℃，转速120r·min-1，至冷凝出口没有萃取剂滴出，即为蒸馏终点。取出装瓶，密封，0℃储藏，备用。

1.3.2 油样组分分析

按照1.3.1 的方法制得油样，将油样进行甲酯化处理。称取蛋黄油样品0.05g，加入1.0g·L-1的甲醇钠溶液0.5mL，室温下静置反应0.5h，然后加入10%乙酸溶液和2mL 正己烷。混合均匀后，溶液3000r·min-1离心10min，取上清液过滤，再取1μL上机检测，记录色谱峰。

豆油同法处理后，取1μL 上机检测，记录色谱峰。

色谱条件：HP-5MS 弹性石英毛细管柱，5% phenylmethyl siloxane，30m×0.25mm，0.25μm；气化室温度260℃。程序升温：初始温度40℃，保持1min，然后以5℃·min-1的速率升至210℃，保持2min后再以5℃·min-1的速率升至240℃，保持1min，检测结束。载气氦气流量为1.0mL·min-1，进样量1μL，分流比15∶1。

2 结果与讨论

2.1 蛋黄油的萃取工艺优化

经查阅相关文献，蛋黄油的萃取工艺分为传统制备工艺和现代化制备工艺[6]。传统工艺多采用干馏法、烘焙法和减压蒸馏法；现代化制备工艺多采用溶剂萃取法、超临界CO2萃取法和酶法。各工艺的具体出油率见表1。根据表1 的总结及实验操作的可行性，综合考虑后，本次实验采用有机溶剂萃取法，并通过正交实验找出最佳实验条件。

表1 不同制备方法蛋黄油的出油率比较Table 1 comparison of oil yield of egg butter by different preparation methods

2.2 萃取条件的确定

2.2.1 不同萃取剂对蛋黄油提取率的影响

分别选取95%乙醇、环己烷、乙酸乙酯为萃取剂，按照1∶4 的比例，在50℃、1h 的条件下，按照

表2 不同萃取剂下蛋黄油的出油率Table 2 oil yield of egg butter with different extractants

1.3.1 的步骤进行提取，结果见表2。由表2 可知，各萃取剂的出油率大小为：乙酸乙酯＞环己烷＞95%乙醇，表明乙酸乙酯为最佳萃取剂。

2.2.2 不同萃取温度对蛋黄油提取率的影响

按照蛋黄粉∶乙酸乙酯=1∶4的比例，按照1.3.1的步骤，分别在40℃、50℃、60℃下萃取1h，结果见表3。由表3 可知，出油率的大小为50℃＞40℃＞60℃，表明50℃为最佳萃取温度。

表3 不同萃取温度下蛋黄油的出油率Table 3 oil yield of egg butter at different extraction temperatures

2.2.3 不同萃取时间对蛋黄油提取率的影响

按照蛋黄粉∶乙酸乙酯=1∶4 的比例，按照1.3.1的步骤，在50℃下分别萃取50min、60min、70min，结果见表4。由表4 可知，出油率的大小为60min ＞70min ＞50min，表明最佳萃取时间为60min。

表4 不同萃取时间下蛋黄油的出油率Table 4 oil yield of egg butter at different extraction times

2.2.4 正交实验优化提取工艺

选取萃取剂、萃取时间、萃取温度为因素，以各单因素实验最优取值点为中心，上下区域各取1 个水平值作为正交实验设计水平，以出油率（%）为评价指标，设计三因素三水平的正交分析，进行优化组合[13]，实验方案的因素及水平见表5 所示，实验结果见表6。

表5 因素水平表Table 5 Factor level table

由表6 可以看出最优组合为A2B2C2,且该组合在正交实验中的蛋黄油萃取率最高，由此确定蛋黄油萃取的最佳条件为：萃取剂为乙酸乙酯，萃取温度为50℃，萃取时间为60min。

2.3 油样分析结果

将在最佳实验条件下获得的蛋黄油和豆油甲酯化后，在最佳色谱条件下，测定蛋黄油和豆油中脂肪油的组成，结果见图1、图2。

表6 提取蛋黄油的正交试验结果Table 6 orthogonal test results of extracting golden egg butter

图1 蛋黄油脂肪酸组成谱图Fig.1 Fatty acid composition spectra of egg butter

图2 豆油脂肪酸组成谱图Fig.2 Fatty acid composition spectra of soybean oil

将蛋黄油和豆油甲酯化后，对蛋黄油与豆油的成分进行比较。得到的气相色谱图，经计算机检索并与标准图谱对照后，得到两者的主成分，结果见表7、表8。

由表7、表8 可知，蛋黄油中，亚油酸＞油酸＞棕榈酸＞硬脂酸＞亚麻酸；豆油中，油酸＞亚油酸＞棕榈酸＞亚麻酸＞硬脂酸。在相同的实验条件下，蛋黄油中油酸的占比最大，豆油中亚油酸的占比最大。蛋黄油中的油酸比豆油高18.9%，棕榈酸比豆油高6.75%，硬脂酸比豆油高3.66%，亚油酸比豆油高27.21%，亚麻酸比豆油低4.94%。

表7 蛋黄油中各脂肪酸的相对含量Table 7 The relative amount of fatty acids in egg butter

表 8 豆油中所含脂肪酸相对含量Table 8 The relative amount of fatty acids in soybean oil

2.4 方法学考察

2.4.1 方法的精密度

用蛋黄油做6 个平行样品处理，进行6 次重复性检测，以硬脂酸、棕榈酸、油酸、亚油酸、棕榈油酸的峰面积结果为代表，分析各组数据之间的变异系数。经计算，棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和棕榈油酸的6次测量结果的变异系数分别为1.58%、1.28%、1.00%、0.21%、1.31%，表明本实验的精密度良好[14]。

2.4.2 理论塔板数n

在本实验的色谱条件下，注入处理后的油样，记录色谱图，测出油样主成分峰的保留时间tR（以min或长度计，但应取相同单位）和半高峰宽（Wh/2），得到结果分别为：棕榈酸24×103，硬脂酸22×103，油酸22×103，亚油酸 22×103、亚麻酸21×103，均符合规定[15]。

2.4.3 分离度R

按上述方法检测，记录保留时间及面积，经计算，棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸能够良好分离，相邻峰的分离度分别为40.4、4.83、8.65、13.65，均大于2.0，符合要求。

2.4.4 重复性

取同一样品重复测定 5 次，测得各个组分的 RSD 值分别为2.04%、1.90%、2.59%、2.32%、2.78%，均符合规定。

3 结论

本实验采用正交实验法，确定蛋黄油的最佳提取工艺，以乙酸乙酯为萃取剂，在萃取温度50℃、萃取时间60min 的实验条件下提取蛋黄油。对蛋黄油及豆油进行衍生化提取后，用GC 检测出蛋黄油及豆油中的脂肪酸含量，对结果进行比较，发现蛋黄油主要含有油酸，且含量明显高于豆油。油酸在人和动物的新陈代谢过程中起着重要作用，但人体自身合成的油酸不能满足需要，要从食物中摄取，故食用油酸含量较高的蛋黄油有益健康，因此蛋黄油具有很好的应用发展前景。