丹七胶囊对血小板聚集功能影响的临床研究*

2020-04-20凌莉琴刘超男

国际检验医学杂志 2020年7期

陈思，凌莉琴，刘超男，江虹，周静△

(1.四川大学华西医院实验医学科，四川成都 610041；2.四川大学华西临床医学院，四川成都 610041)

血小板被活化后可发生黏附和聚集，这在动静脉血栓的形成过程中发挥了重要作用[1]。丹七胶囊的主要成分为何首乌、丹参、三七粉，具有活血化瘀，理气止痛之效，临床上用于预防和治疗冠心病、心绞痛、高血脂及心脑血管循环功能障碍引起的头晕、心肌缺血等[2-3]。有动物实验报道丹七片能抑制血小板聚集功能[4]，本文拟通过研究丹七胶囊对不同类型诱导剂诱导的血小板聚集功能的影响，进一步探讨丹七胶囊影响血小板功能的生理机制，为该药的临床应用提供一定的药理学依据。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2012年2—3月年龄为20～28岁健康志愿者32例，其中男性16例，女性16例。排除冠心病、静脉血栓、严重心律失常和肝、肾、血液系统疾病患者。

1.2仪器与试剂血常规检测所用仪器为Sysmex XE-5000全自动血液细胞分析仪，凝血常规采用Sysmex CS-5100全自动血凝分析仪检测，肝肾功指标采用Roche Cobas 8000全自动生化分析仪检测，血小板聚集功能采用 Chrono-log 700血小板聚集分析仪进行检测。血小板激活剂二磷酸腺苷(ADP)、肾上腺素(EPI)、花生四烯酸(AA)和瑞斯托霉素(RIS)均购自Hyphen Biomed公司。

1.3给药方式将健康志愿者随机分为空白对照组(安慰剂2 g/次)、低剂量组(丹七胶囊1 g/次)、高剂量组(丹七胶囊2 g/次)、超高剂量组(丹七胶囊3 g/次)，连续服用1周，每天3次。各组性别、年龄等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.4指标检测方法于服药后1周后采集受试者空腹静脉血标本，除检测血常规[红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、大血小板比率(P-LCR)、血小板压积(PCT)]、凝血常规[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)]、肝肾功能指标[总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、三酰甘油(TG)、胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]，另用光散射比浊法对不同诱导剂ADP、EPI、AA和RIS诱导的血小板聚集功能进行测定。

2 结果

2.1各组间常规检查结果比较服用丹七胶囊1周后，3个剂量组的血常规、凝血常规和肝肾功指标，与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2各组间AA和RIS诱导的血小板最大聚集率(MA)比较服用丹七胶囊1周后，3个剂量组和空白对照组相比，AA和RIS诱导的MA比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3各组间ADP和EPI诱导的MA比较服用丹七胶囊1周后，3个剂量组和空白对照组相比，3个剂量组ADP和EPI诱导的MA下降，低剂量组MA与空白对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量组和超高剂量组的ADP和EPI诱导的MA与空白对照组和低剂量组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，但超高剂量组与高剂量组之间MA比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。ADP和EPI诱导的MA有一定相关性(r=0.321，P=0.013)。

表1 服药1周后各组常规检查结果比较

续表1 服药1周后各组常规检查结果比较

表2 服药1周后不同诱导剂后各组MA比较

注:*P<0.05,与空白对照组、低剂量组比较。

3 讨论

血小板聚集功能改变是血栓形成过程中重要的启动因素之一[5]，与心脑血管疾病、深静脉血栓、肺栓塞等临床常见病或危重病的发病有一定联系。丹七胶囊对血小板聚集功能的影响可能为血栓性疾病的防治提供新思路。

不同诱导剂通过不同途径诱导血小板聚集，ADP和EPI均可通过影响血小板内腺苷酸活化酶水平介导血小板聚集过程。ADP是临床上最常用的血小板聚集诱导剂之一，可结合血小板膜上ADP受体抑制血小板腺苷酸环化酶的活化，继而通过降低血小板中环磷酸腺苷(cAMP)水平，促进Ca2+内流，诱发血小板聚集[6-8]。EPI与血小板表面肾上腺素能受体α2A结合，影响ATP依赖的CI-通道，降低腺苷酸环化酶活性，减少血小板内cAMP，从而诱导血小板聚集[9-11]。AA在环氧化酶作用下产生前列腺素G2、前列腺素H2，并通过一系列反应形成大量血栓素A2(TXA2) 。TXA2使血小板内cAMP减少，胞内游离Ca2+增多，因而有很强的聚集血小板的作用[12-13]。 ADP、AA和EPI通过不同途径降低血小板内cAMP水平，促使钙离子内流进而诱导血小板聚集。磷酸二酯酶抑制剂类药物通过抑制细胞内cAMP的水解过程，抑制ADP、AA、EPI诱导的血小板聚集[14]。在本研究中，健康志愿者连续服用丹七胶囊1周后，ADP和EPI诱导的MA下降，表明丹七胶囊具有抑制血小板聚集的作用。AA诱导的MA未见明显变化，提示丹七胶囊可能作用于ADP和EPI诱导血小板聚集的共同途径即通过抑制或降低血小板腺苷酸环化酶的活性发挥其抑制血小板聚集的功能。

本研究发现服用不同剂量丹七胶囊后，ADP和EPI诱导的MA明显下降。与空白对照组比较，高剂量和超高剂量组受试者 ADP和EPI诱导的MA下降，差异均有统计学意义(P<0.05)，但高剂量组与超高剂量组之间MA比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示可能丹七胶囊对血小板聚集的抑制作用与服用药物剂量有关。在一定药物浓度范围内，增大口服丹七胶囊的剂量无明显不良反应且能更好地抑制血小板聚集，但继续增大丹七胶囊剂量不能增强抑制效果。

有研究报道，在动脉粥样硬化家兔模型中丹七下调动物血脂水平[15]，但本研究中丹七胶囊未影响健康人血脂水平，其可能原因：(1)健康人脂蛋白代谢不同于病理状态；(2)不同研究中丹七胶囊剂量不同；(3)动物实验与人体实验存在差异。