延边地区大米中黄曲霉毒素B1的采样检测分析
2020-03-27白龙律武伦鹏姚蕴恒陶晓杰,朱传翔朴文香
白龙律 武伦鹏 姚蕴恒 陶晓杰,朱传翔 朴文香
摘 要:目的:分析延边大米黄曲霉毒素B1含量水平。方法:采用酶联免疫吸附法测定204个样本大米中黄曲霉毒素B1含量,运用统计学方法分别对2016-2018年和4类抽样地点进行单因素方差分析。结果:2016-2018年,黄曲霉毒素B1含量均值分别为1.325、1.203、1.139 μg·kg-1,远低于国家标准限量
10 μg·kg-1,无超标样品;4类不同抽样地点黄曲霉毒素B1含量均值分别为:市场和小散粮油店2.583 μg·kg-1、
中小超市1.305 μg·kg-1、大超市0.576 μg·kg-1、企业0.459 μg·kg-1。通过方差分析发现,黄曲霉毒素B1在年份之间差异不显著,在抽检地点之间差异显著。结论:延边大米总体情况良好。
关键词:黄曲霉毒素B1;大米;酶联免疫吸附法;统计学分析
Abstract:Objective: Analyzed the content of aflatoxin B1 in Yanbian rice. Methods: A total of 204 rice samples by using ELISA determination of aflatoxin B1 content in rice samples, using the single factor ANOVA test in statistical method respectively to 2016—2018 and 4 sites of sampling sites. Results: The mean value of aflatoxin B1 was 1.325 μg·kg-1,
1.203 μg·kg-1, 1.139 μg·kg-1, which was well below the national standard limit of 10 μg·kg-1. 4 sites of aflatoxin B1 content mean different sampling sites: markets and small grain stores 2.583 μg·kg-1, small and medium-sized markets 1.305 μg·kg-1, supermarket 0.576 μg·kg-1, rice enterprises 0.459 μg·kg-1. According to variance analysis, aflatoxin B1 showed no significant difference between years, but significant difference between sampling sites. Conclusion: The rice in Yanbian is generally in good condition.
Key words:Aflatoxin B1; Rice; ELISA; Statistical analysis
中图分类号:TS213.3
黄曲霉毒素是由真菌属产生的次生代谢物,属于霉菌毒素,其中黄曲霉和黑曲霉这两种霉菌易在食物和饲料中被检测到[1]。黄曲霉毒素被国际癌症研究机构(IARC)列为第一类致癌物[2],其中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素(OTA)在所有黄曲霉毒素中毒性最高[3]。由于黄曲霉毒素危害人类健康,所以规定了黄曲霉毒素含量在食品和饲料中的限定范围。目前,世界不同国家的黄曲霉毒素B1的限定值都被设定在范围1~20 μg·kg-1[4]。欧洲联邦法规规定谷物及其衍生品的黄曲霉毒素B1最高限量分别为2 μg·kg-1和4 μg·kg-1,婴儿食品为0.1 μg·kg[5]。
而我国GB 2761-2017《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》中规定,大米中黄曲霉毒素B1最高限量为10 μg·kg-1[6]。大米作为谷物中的一种,在加工后,由于运输或存储不当,易滋生霉菌产生霉菌毒素[7]。
延边大米是中国优质大米之一,大米颗粒饱满、晶莹如玉,米饭柔软适口、醇香绵长、黏性适度,2006年,延边大米被列入国家地理标志产品保护名录[8]。本研究对延边朝鲜族自治州各地区生产的大米进行检测,通过对不同年度和不同抽样来源的大米中黄曲霉毒素B1含量综合分析,客观地分析评价延边大米黄曲霉毒素B1含量总体情况。
1 材料与方法
1.1 样品来源
政府监管部门抽样送检,抽样情况见表1。
1.2 主要仪器和试剂
酶标仪(BioTek-Epoch);黄曲霉毒素B1酶联免疫定量测试盒(ELISA kit)购自江苏省苏微微生物研究有限公司;甲醛;纯化水。
1.3 检测方法
采用酶联免疫吸附法。
(1)样品制备。称取已粉碎的样品于100 mL具塞三角瓶中,准确加入适量体积的甲醇-水(1+1)溶液,振摇15 min,过滤,弃去1/4初滤液,收集试样滤液,此液位样品提取液。根据样品的国家允许量标准(大米中AFB1含量≤10 μg·kg-1),取0.1 mL样品提取液和0.1 mL A试剂(样品稀释液),此液为待测样液。
(2)样品测定。将试剂盒平衡至室温,依次加入不同浓度的黄曲霉毒素B1标准溶液及待测样液,轻轻振摇,使各孔中的反应物混匀。将反应板放入37 ℃恒温培养箱中孵育30 min后,取出反应板,甩掉反应液,拍干,洗板4次。加入显色剂37 ℃恒温培养箱中显色15 min,加入终止液,摇匀后用酶标测定仪在450 nm波长处测定各孔的吸光度。
1.4 統计学分析
运用IBM Statistics SPSS 20.0对检验数据进行分析,分别对2016-2018年3年4类抽样地点采用单因素方差分析。
2 结果与分析
2.1 不同年度大米样品中黄曲霉毒素B1含量比较
由表2知,2016年、2017年、2018年这3年的黄曲霉毒素B1含量均值分别为1.325 μg·kg-1、1.203 μg·kg-1、
1.139 μg·kg-1,数据间相差不大,经SPSS软件方差分析得到显著性水平P=0.45>0.05,见表3。说明黄曲霉毒素B1含量在不同年份间无显著性差异。
2.2 4类抽样地点大米样品中黄曲霉毒素B1含量比较
由表4知,4类地点抽取的样品的均值相差较大,其中,市场和散粮油店2.583 μg·kg-1、中小超市1.305 μg·kg-1、
大超市0.576 μg·kg-1、大米企业0.459 μg·kg-1。经ANOVA分析得到显著性水平P<0.05,说明4组样品间存在显著性差异,具有统计学意义。如表5所示直观看出4者之间的差异。
3 结论
2016-2018连续3年204个大米样品进行检测,结果发现,黄曲霉毒素B1含量均值分别为1.325 μg·kg-1、
1.203 μg·kg-1、1.139 μg·kg-1,远低于国家标准GB 2761-
2017《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》中规定的国家标准限量10 μg·kg-1,黄曲霉毒素B1含量均值在年份之间差异不显著,且没有发现超標样品。对4类不同地点抽样检测发现,黄曲霉毒素B1含量均值由高到低分别为:市场和散粮油店2.583 μg·kg-1、中小超市
1.305 μg·kg-1、大超市0.576 μg·kg-1、企业0.459 μg·kg-1。
抽检地点之间差异显著,其中市场和散粮油店黄曲霉毒素B1含量均值明显高于其他3类抽样地点,可能是由于储存不当,使大米处于阴湿环境易受黄曲霉污染[9]。综上所述,延边地区大米黄曲霉毒素B1污染程度较低,总体情况良好。
参考文献:
[1]Desjardins A. Mycotoxins:Risks in Plant,Animal,and Human Systems[J]. AAHE-ERIC/Higher Education Research Report,2003,9(7):48-50.
[2]International Agency for Research on Cancer (IARC).Some Traditional Herbal Medicines Some Mycotoxins, Naphthalene and Styrene[J].Iarc Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans,2002,82:1-556.
[3]Rodríguez A,Rodríguez M,Martín A,et al.Evaluation of hazard of the aflatoxin B1, ochratoxin A and patulin production in dry-cured ham and early detection of producing moulds by qPCR[J].Food Control,2012,27(1):118–126.
[4]FAO.Worldwide Regulations for Mycotoxins in Food and Feed in 2003[Z].2004.
[5]The European Commission Regulation for maximum levels of aflatoxins in foodstuffs[Z].2010.
[6]国家卫生和计划生育委员会,国家食品药品监督管理总局.GB 2761-2017食品安全国家标准食品中真菌毒素限量[S].北京:中国标准出版社,2017.
[7]唐 笑,任文洁,陈 波,等.江西省大米中黄曲霉毒素B1分析及膳食暴露评估[J].食品科技,2015,40(3):315-319.
[8]国家质量监督检验检疫总局.关于批准对延边大米实施地理标志产品保护的公告[Z].2006-12-31.
[9]孙有娥,吴培慧,郝媛媛,等.不同的储存条件对大米中黄曲霉毒素B1的影响[J].池州学院学报,2014,28(3):37-38.