中国道地药材研究近况系列(21)道地药材铁皮石斛的研究近况*

严雪梅 杨建宇 李 杨 范竹雯 郑绍明 柳越冬 祝庆明 陆锦锐 张朝杰 张德鸿 祝之友※

铁皮石斛，是兰科石斛属植物铁皮石斛的茎，于安徽、广东、广西均有分布，性微寒、味甘，中医将其归为肾、胃、肺经，清热滋阴、益胃生津、名目强腰，可治口干食少、阴伤虚热等证候[1]。铁皮石斛的药用历史悠久，古人常将其用于滋养肝肺，亦或用于泡酒，制茶，今学者经研究发现其还有治疗糖尿病、高血压、提高免疫力、促进毛发生长等作用。

1 铁皮石斛的历史沿革

铁皮石斛是我国传统的道地药材。《神农本草经》首次提及石斛并将其列为上品言：“味甘，主伤中，除痹，下气，强阴，补五脏虚劳赢弱，久服厚肠胃”，《名医别录》言：“无毒，益精，补内绝不足，平胃气，长肌肉，逐皮肤邪热气，脚膝疼冷痹弱，定志除痉”，后隋唐《药性论》记载：“主治男子腰脚软弱，健阳，逐皮肌风痹、骨中久冷、虚损，补肾积精，腰痛”，铁皮石斛对生长环境要求极为严苛；《雁荡山志》有记载：“石斛产岩壁，山间人以巨绠束腰际，悬崖采之，为状绝险，往往有失事者”；古书籍对其道地产区的记载有些许出入，且一直未达成统一，梁朝《本草经集注》记载：“今用石斛出始兴”，学者考证，始兴即今广东韶关一带，唐朝《新修本草》载：“始安亦产，今荆襄及江左又有二种”，《雁山志》记载明朝万历年间，雁荡(即今大荆和雁荡山)所产铁皮石斛已上贡皇室，因此可将广东、广西、安徽霍山均认为其道地产区[2,3]。

2 铁皮石斛炮制与品鉴方式

自古代石斛炮制就已有多种方法，《本草经集注》记载有水制法：“惟可为酒渍、煮汤用尔”，还有火制法，包括炒、炙、焙等方法，炒又包括酒炒、清炒、盐水炒，酒炒于《圣济总录》中有记载：“石斛(去根，锉，酒炒)”，清炒于《评注产科心法》中有记载：“钗石斛(炒)”，盐水炒于《得配本草》中有记载：“盐水拌炒，补肾兼清肾火、清胃火”，《黄帝素问宣明论方》中记载有酒炙法：“石斛(去根酒炙)”，《古今医彻》中记载有盐水焙：“石斛(盐水焙)”，另外还有煮制和蒸制等方法[4]。而今，石斛的炮制方法都是在古代传统炮制法的基础之上优化而来，韦志厚等[5]发明了一种铁皮石斛炮制方法，以铁皮石斛的茎作原料，将传统酒炙工艺运用到铁皮石斛干条生产中，克服了铁皮石斛必须宽汤久煎的技术难题，所得铁皮石斛多糖(DCP)、氨基酸总量、甘露糖含量与铁皮石斛枫斗相同，但溶出率显著提高，香甜味浓郁，可用于临床配方、直接食用或加工生产铁皮石斛食品、药品等。

铁皮石斛因药效良好、不易栽培，价格较昂贵，现市场上出现许多铁皮石斛假冒现象，因此鉴别铁皮石斛与其他品种显得尤为重要。鉴别铁皮石斛的方法可从外部形态和理化鉴别，铁皮石斛最显著的外部特征是其表皮呈现铁绿色，且存在铁锈色斑点[6]。理化鉴定常用的有光谱、显微、分子生物学及色谱等技术，魏刚等[7]采用高效液相色谱(HPLC)特征图谱法对共10批不同产地种源铁皮石斛相似度进行对比，运用色谱相似度评价系统软件(2004A版)生成对照图谱并进行分析，结果发现以浙江本地对照图谱作对照，10批丹霞种源样品的相似度为0.907～0.972，并标示出37个共有峰，10批样品铁皮石斛间相似度达到0.907～0.972，说明丹霞种与浙江本地种铁皮石斛主成分基本一致，丹霞种铁皮石斛内成分稳定，但不同种源的铁皮石斛成分及少数特征峰又存在差异，此分析方法可靠、准确、重复性好，为区别不同种源铁皮石斛提供一种借鉴和依据。张蕾等[8]通过分析8个不同种源铁皮石斛及其易混淆品的rDNA ITS区序列，计算遗传距离并用邻接法构建NJ系统树，结果发现，铁皮石斛与其易混品的ITS序列长度范围在636～641 bp之间，其中不包括5.8S的ITS区片段长483 bp，其中含60个信息位点，185个变异位点，各样品间的遗传距离范围在1.108%～2.594%之间，且NJ系统树亦表明铁皮石斛与其易混淆品间亲缘关系较远，此种鉴别方法能简便、快速的鉴别不同种源铁皮石斛与易混品，为铁皮石斛的品鉴提供借鉴。

3 铁皮石斛的栽培与资源现状

铁皮石斛是一种自然繁殖率低、生长周期长的药用植物，生长于海拔1 600 m左右的山地岩石上，喜湿润、凉爽、空气畅通的地带，因其是加工枫斗的唯一药物，而被视为石斛中最珍贵的品种，又因为其自然条件下不易萌芽生长，现今已被国家列为重点保护药用植物，属濒危物种，因此大量学者对铁皮石斛的栽培进行了大量研究[9]。斯金平等[10]通过实验发现铁皮石斛在85°～90°的悬崖表面，于生长季节喷水1～2 h/d的条件下，即使不施肥，不用基质也能生长良好，铁皮石斛的产量较高，其形态与野生铁皮石斛一致;醇溶性浸出物与DCP含量显著高于普通基质栽培，且逆境有助于铁皮石斛醇溶性浸出物等主要成分的积累。研究表明[11]，铁皮石斛之所以不易人工栽培，是因为其自然生长环境中存在大量有助于其生长的真菌。侯晓强等[12]采用内生真菌和铁皮石斛组培苗进行共生培养，筛选能够促进铁皮石斛组培苗生长的内生真菌，并采用分子鉴定、形态鉴定等方法对促进铁皮石斛生长的内生真菌进行形态鉴定，结果显示，8株对铁皮石斛苗有促生长作用的内生真菌中，有2株能产孢子真菌属于散囊菌(Eurotium)和拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)，6株不产孢真菌，分别属于鬼伞属(Coprinellus)，链格孢属(Alternaria)，棘壳孢属(Pyrenochaeta)，柔膜菌目(Helotiales)，鳞伞属(Pholiota)等，此研究结果对于增加铁皮石斛资源具有指导意义。

4 铁皮石斛药理作用和应用效果

铁皮石斛中含有多糖、菲酚类、倍半萜类、生物碱、芴酮类及双苄酚类等化学成分[13]。周佳等[14]通过硅胶色谱法、反相硅胶色谱以及半制备高效液相色谱法对铁皮石斛70%乙醇提取物进行分离纯化，用现代波谱技术鉴定所得化合物的结构，结果分离得到14个化合物，其中异鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖基(1→2)-p-D-吡喃葡萄糖苷、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3, 4, 5-三甲氧基苯-l-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、conicaoside、4-(3 '-羟丙基)-2, 6-二甲氧基苯酚-3'-O-β-D-葡萄糖苷和2, 6-二甲氧基-4-羟基苯酚-1-O-β-葡萄糖苷6种化合物首次从铁皮石斛中分离得到。邱现创等[15]通过采用响应面法优化DCP提取工艺，在低超声波功率为250 W的条件下，对提取液料比、超声波、温度及处理时间进行中心组合试验，结果表明，DCP的最佳提取工艺为料液比50.26∶1(ml：g)、超声波处理28.65 min、温度41.74℃，此条件下DCP的提取率为25.4%，此工艺比传统工艺的DCP提取率提高18%，时间也缩减了3/4，而且超声波辅助法不会抑制DCP清除羟自由基、1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力。关于铁皮石斛抗氧化能力。黄琴等[16]以Vc作阳性对照，采用溶剂提取法制备4个不同极性的铁皮石斛提取物(EE、CE、EAE、NBE)，结果发现，CE中黄酮总量为104.48 mg/g、酚类总量为40.96 mg/g，是4种样品中最高的，且CE浓度为375 μg/ml时对2, 2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率达100%，CE浓度为1 500 μg/ml时对自由基1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率达78.45%。相关研究显示各提取物对ABTS、DPPH清除能力以及还原性与黄酮含量相关性较强，相关系数分别为0.845、0.902和0.994。而各提取物的还原能力及对羟自由基的清除能力与样品中的多酚含量明显相关，其相关系数为0.521，表明铁皮石斛各提取物的抗氧化性与黄酮和总酚含量间存在明显的相关性，说明酚类或黄酮类成分可能就是铁皮石斛抗氧化活性的物质基础。

赵佩等[17]通过实验发现服用不同剂量铁皮石斛的大鼠结肠长度比溃疡性结肠炎模型大鼠的要长，且大鼠疾病活动指数(DAI)及组织学损伤评分降低、血清干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量降低;结肠组织中的IFN-γ mRNA表达水平及过氧化物酶(MPO)表达量也明显下降，说明铁皮石斛提取物对溃疡性结肠炎小鼠有较好的治疗效果。陈健等[18]采用水提醇沉法提取DCP，并将其应用于脱发模型大鼠身上，发现应用DCP模型大鼠的毛发生长质量、得分、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达水平及人永生化角质形成细胞(HaCaT)的成活率均显著高于涂抹超纯水的模型大鼠，说明了DCP能够有效促进毛发生长。张贝贝等[19]通过优化提取工艺提取得到的DCP能够增强B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达、抑制高糖诱导的血管内皮细胞兔抗人单克隆抗体(Bax)表达，进而抑制人血管内皮细胞的凋亡，达到防止糖尿病血管病变的目的。宋燕华等[20]用普通饲料喂养的大鼠作对照组，不同剂量的铁皮石斛叶喂养雌性大鼠作观察组，实验发现，高剂量铁皮石斛叶组大鼠的自然杀伤细胞(NK)的细胞活性显著高于对照组，且2组大鼠左后足跖厚度、淋巴细胞的增殖能力均有较大差异;不同剂量铁皮石斛叶组大鼠的脾脏/体质量、胸腺/体质量比值差异不显著，说明了铁皮石斛叶能够在一定程度上提高雌性大鼠的免疫力。

铁皮石斛的临床应用历史悠久。《本草正义》等古籍记载生石斛是治疗肺胃火炽等症的良药；也有古书记载将其熬成膏能够强筋健骨、补虚滋阴[21]。吕圭源等[22]通过给饮酒型高血压模型小鼠服用铁皮枫斗冲剂，服用32周，期间定期测量模型小鼠的体征、体质量等指标，观察指标的变化情况，发现①小鼠服药后体重、自主活动次数、食量及抓力显著升高，眩晕时间缩短，②模型小鼠服药8周后血压显著下降，③模型小鼠服药的第28、32周，小鼠血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、肌酐、尿酸及甘油三酯水平均显著下降。结果说明了铁皮枫斗冲剂能够有效改善因长期饮酒引起的高血压、肝肾功能及血脂生化指标异常等症状。常景芝等[23]通过给糖尿病大鼠服用不同剂量的铁皮枫斗颗粒，观察其肾脏病理学等指标的变化，结果显示，与不服用药物的糖尿病大鼠相比，服用铁皮枫斗颗粒的糖尿病大鼠血肌酐、肾重指数、尿素氮、VEGF及24 h尿蛋白、肾皮质葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达量显著降低，并呈现剂量依赖性，且肾脏组织病理变化情况明显改善，结果说明了铁皮枫斗颗粒能够通过调节GLUT-1、VEGF、CTGF的表达进而延缓糖尿病的进展，从而达到保护肾脏的效果。

郭静[24]选取慢性胃阴虚型胃炎患者，将其分为观察组和对照组，对照组患者给予常规西医治疗，观察组患者在对照组基础上加用石斛益胃汤治疗，治疗6个月后显示，观察组患者血清TNF-α和超敏C反应蛋白水平均低于对照组，观察组患者的不良反应发生率及主、次症中医证候积分和总积分均显著低于对照组，临床疗效总有效率显著高于对照组，结果说明了服用石斛益胃汤能够明显减轻慢性胃阴虚型胃炎患者的症状，控制炎症反应，降低复发率，增强疗效。李祥云等[25]研制了一种膏方，该膏方由铁皮枫斗、山楂等制成，可滋阴养生、抗衰延寿，还有治疗子宫肌瘤的作用，侧面说明铁皮石斛具有滋润肾肺、延年益寿、抗肿瘤的功效。

5 结语

本文对铁皮石斛在本草中的历史沿革、炮制、品鉴、栽培等情况进行了简要描述，着重分析了铁皮石斛的药理及临床应用，并指出了铁皮石斛资源匮乏、濒临灭绝的资源现状，旨在汇总铁皮石斛的药用价值，并研究铁皮石斛当前的一些近况，应引起人们的重视，不要大肆滥采，以保证铁皮石斛品质优良、资源稳定、合理应用于疾病治疗中，有效改善患者治疗效果。