老年阿尔茨海默病病情分级与氧化应激程度关系探讨

黄澈

阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的神经系统退行性病变，发病较为隐匿，早期常无特异性临床表现，疾病发展到一定程度可表现为记忆障碍、人格和行为改变等[1]。AD是导致老年人患痴呆的最常见病因之一，占比50%～70%，其中＜65岁发病称早老性痴呆；≥65岁发病称老年性痴呆。从流行病学数据上来看，＞65岁者AD发病率约为5%，＞85岁者发病率高达20%[2]。目前，医学界对于AD的发病机制尚未完全明确，各个学说所阐述的发病机制也不尽相同，如Aβ毒性假说、胆碱能神经元假说、Tau 蛋白假说和自由基损伤假说等[3]。而近年来研究显示，氧化应激在AD自然病程进展中发挥重要作用，氧化应激损伤可出现在临床症状及分子水平改变前，即β淀粉样蛋白沉积及神经纤维缠结的形成之前造成组织损伤[4]。然而，有关病情分级与氧化应激程度关系的研究并不多见，因此本研究旨在对二者之间的关系进行探讨。现报告如下。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象 收集我院2014—2018年收治的老年AD患者149例作为观察组，诊断参照《神经病学》相关标准[5]。入组条件：年龄≥65 岁；临床痴呆评定量表(CDR)评分≥1.0分；未合并其他中枢神经系统器质性疾病；未合并其他能改变机体氧化应激状态的疾病；无重要脏器，如心、肾等疾病；自愿参与研究并签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准后开展。同时，选择同期于我院进行健康体检的健康老年人64例作为对照组。两组各项基线资料差异均无统计学意义(P＞0.05，表1)。

表1 观察组与对照组各项基线资料比较(±s)

表1 观察组与对照组各项基线资料比较(±s)

注：1 mmHg＝0.133 kPa

组别 例数 性别 年龄/岁 收缩压/mmHg男 女舒张压/mmHg空腹血糖/(mmol·L-1)甘油三酯/(mmol·L-1)总胆固醇/(mmol·L-1)观察组 149 62 87 71.54±4.80 142.34±8.13 91.25±6.27 5.34±0.51 3.11±0.14 4.86±0.62对照组 64 27 37 70.31±5.02 143.28±8.22 90.45±6.38 5.27±0.57 3.09±0.13 4.81±0.59 t值/χ2值 0.006 0.347 0.419 0.164 0.082 0.079 0.111 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05

1.2 方法

1.2.1 检测方法 于清晨空腹状态下抽取外周肘静脉血20 mL，3 000 r/min离心5 min后，分离上层血清，分装后保存于-80 ℃深冻冰箱待测。检测指标包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、铜蓝蛋白(CP)、活性氧(ROS)、4- 羟基壬烯酸(4-HNE)、同型半胱氨酸(Hcy)、尿酸(SUA)、硫醇(Mercaptan)和氧化蛋白产物(AOPP)。其中，SOD检测采用黄嘌呤氧化酶法；MDA检测采用硫代巴比妥酸比色法；CP检测采用联大茴香胺比色法；GSH-Px、ROS和4-HNE检测采用酶联免疫吸附法；Hcy、SUA、Mercaptan 和AOPP检测采用分光光度法[6-8]。

1.2.2 研究方法 首先，比较观察组和对照组各氧化应激指标水平差异；然后，依据CDR评分情况对观察组进一步分组，比较不同亚组之间各氧化应激指标水平差异；最后，对氧化应激指标与AD病情分级进行相关性分析。CDR包括记忆力、定向力、判断并解决问题能力、社会事务、家庭爱好、个人料理6个方面，以总分作为判定依据，结果将0分、0.5分、1.0分、2.0分和3.0分划分为正常、可以、轻度、中度及重度痴呆5级[9]。本研究入组病例均为CDR评分≥1.0分，亚组分为轻度痴呆亚组67例、中度痴呆亚组51例和重度痴呆亚组31例。

1.2.3 统计学分析 采用SAS 9.2软件建立数据库，以SPSS 21.0软件进行汇总分析，计量资料以(±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析；计数资料以率表示，组间比较采用四格表χ2检验；相关性分析采用Spearman等级相关分析法，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

与对照组相比，观察组MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy和SUA水平较高，差异均有统计学意义(P＜0.05)；而SOD和GSH-Px水平较低，差异均有统计学意义(P＜0.05)。两组Mercaptan和AOPP水平差异无统计学意义(P＞0.05)。亚组分析显示，随着痴呆程度的加重，MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy和SUA水平呈上升趋势；而SOD和GSH-Px水平呈下降趋势，各亚组间差异有统计学意义(P＜0.05)。Mercaptan和AOPP在各亚组间差异无统计学意义(P＞0.05)。MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy和SUA水平与痴呆程度呈正相关关系；而与SOD和GSH-Px水平呈负相关关系(P＜0.05)。Mercaptan和AOPP水平与痴呆程度之间无相关性(P＞0.05)(表2～4)。

表2 观察组与对照组各氧化应激指标比较(±s)

表2 观察组与对照组各氧化应激指标比较(±s)

组别 例数 SOD/(U·mL-1) GSH-Px/(μmol·L-1) MDA/(nmol·mL-1) CP/(U·L-1) ROS/(ng·mL-1)观察组 149 61.32±9.38 142.36±13.20 4.79±0.87 48.61±9.14 26.38±6.20对照组 64 87.34±10.65 193.25±21.47 3.91±0.74 40.52±8.66 12.54±3.11 t值 3.742 3.982 2.871 3.027 4.213 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05组别 例数 4-HNE/(pg·mL-1) Hcy/(μmol·L-1) SUA/(μmol·L-1) Mercaptan/(μmol·L-1) AOPP/(μmol·L-1)观察组 149 14.32±3.59 19.21±4.11 370.28±41.65 149.80±29.37 71.35±8.54对照组 64 7.12±1.60 11.33±3.60 312.54±33.47 151.42±30.09 70.33±8.61 t值 4.034 3.692 2.915 0.347 0.281 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05

表3 各亚组氧化应激指标比较(±s)

表3 各亚组氧化应激指标比较(±s)

ROS/(ng·mL-1)14.38±3.06 25.39±4.17 32.64±5.47 9.980＜0.05

续表3 各亚组氧化应激指标比较(±s)

续表3 各亚组氧化应激指标比较(±s)

组别 例数 4-HNE/(pg·mL-1) Hcy/(μmol·L-1) SUA/(μmol·L-1) Mercaptan/(μmol·L-1) AOPP(μmol·L-1)轻度痴呆亚组 31 8.54±2.14 13.37±3.26 336.79±37.64 149.57±29.38 72.37±8.55中度痴呆亚组 51 13.69±3.77 18.88±5.47 375.47±42.88 148.64±29.94 70.69±8.40重度痴呆亚组 67 18.50±4.15 25.16±6.39 397.60±51.35 151.33±31.02 73.52±8.77 F值 8.937 12.571 11.381 1.213 1.066 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05

表4 各氧化应激指标与痴呆等级相关系数

3 讨论

AD是一种中枢神经系统退行性疾病，俗称老年痴呆症，是我国老年人群常见疾病之一，随着老龄化趋势加重，发病率呈上升趋势。

相关资料[10]显示，氧化应激在AD的自然病程中扮演重要角色。生理情况下，氧化应激广泛参与人体多个代谢过程，与衰老、炎症和肿瘤发生发展有一定关系。从人体氧代谢来看，脑组织耗氧占比约20%，因此脑组织极易受氧化代谢影响，在缺氧持续时间达到5 min时即可导致中枢神经系统不可逆损伤。正常情况下，人体氧化及抗氧化代谢是一个动态平衡过程，二者共同维持着人体氧化代谢功能。然而，当机体处于病理情况下，这种动态平衡遭到破坏，及体内抗氧化能力下降，且在缺氧和(或)缺血应激状态下，人体将产生较多氧自由基。氧自由基可以直接破坏细胞内遗传物质，甚至是线粒体、内质网等细胞结构也会一并受累。大脑组织中的神经元，对这种自由基导致的损伤尤其敏感。当神经元细胞线粒体氧代谢链遭到破坏时，神经传导功能受到影响，出现各种临床表现。

由于氧化应激是一个复杂的病理生理过程，因此与氧化应激有关的指标多种多样。本研究中，我们选择了包括SOD、GSH-Px、MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy、SUA、Mercaptan和AOPP在内的观察体系，并且依据痴呆程度进行分组，进一步评估氧化应激与AD病情之间的关系。结果显示，AD患者于健康人之间SOD、GSH-Px、MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy、SUA差异具有统计学意义；且MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy和SUA水平与痴呆程度呈正相关关系，而与SOD和GSH-Px水平呈负相关关系。这一结果可以有如下提示：AD患者体内存在着较高的氧化应激水平；氧化应激程度与AD并且关系密切，及病情越重往往氧化应激水平越高；SOD、GSH-Px、MDA、CP、ROS、4-HNE、Hcy、SUA这些指标可作为客观判断氧化应激水平的依据，为评估疗效和判断预后提供一定程度的依据。

综上所述，临床应重视氧化应激在AD自然病程中的作用，应该从临床角度出发探寻针对氧化应激的干预方法，以期改善老年AD患者的预后。