不同产地、采收期及加工方法金银花中木犀草苷含量分析

郑国成，李汉天，庞丽华，刘铁军，周明霞，李 哲，蔡向杰，屈云萍，李 菲

(神威药业集团有限公司，河北 石家庄 051430)

金银花为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初开的花。其味甘，性寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、疏散风热的功效，临床用于痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热的治疗[1]。金银花在我国主产于山东、河南、河北[2]。2015版《中国药典》规定，金银花的标志性成分为绿原酸和木犀草苷，而是否含有木犀草苷是区别金银花和同科植物山银花、忍冬藤的主要化学指标，也是金银花与山银花等同科植物在疗效上存在差异的主要原因[3]。以木犀草素及木犀草苷为代表的黄酮类化合物具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗癌等多种药理作用[4-6]。本试验对河南封丘、河北巨鹿和山东平邑收集的14批金银花药材进行木犀草苷含量测定，分析比较不同产地、采收期及加工方法金银花药材中木犀草苷的含量，以期筛选出符合《中国药典》要求的优质金银花药材，为其质量评价提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

电子天平(赛多利斯 CP225D，十万分之一)；昆山禾创超声仪器有限公司KH-3200 E超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司KH-3200 E)；戴安U3000 高效液相色谱仪；药典筛。

1.2 试剂

乙腈为色谱纯，乙醇为分析纯；木犀草苷对照品由中国食品药品检定研究院提供(批号111720-201609)。

1.3 材料

2018年6-7月分别从河南封丘、河北巨鹿、山东平邑3个产地收集金银花样品共计14批，经鉴定均为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初开的花。样品信息见表2。

2 方法

2.1木犀草苷含量测定[1]

2.1.1 色谱条件 色谱柱以苯基硅烷健合硅胶为填充剂(月旭 UltimateR·RXB-Penyl 4.6 mm×250 mm，5 μm)；以乙腈为流动相A，以0.5%冰醋酸溶液为流动相B，按表1进行梯度洗脱；检测波长为350 nm；柱温为30 ℃。

2.1.2 对照品溶液制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1 mL含40μg木犀草苷的溶液，即得。

表1 梯度洗脱程序

2.1.3 供试品溶液制备 取金银花粉末(过四号筛)约2 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50 mL，称定重量，超声处理(功率250 W，频率35 kHz)1 h，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10 mL，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。

2.1.4 测定方法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。见图1。

图1 木犀草苷对照品(A)和金银花药材(B)HPLC色谱

3 结果

结果显示，14批次金银花药材中有4批次木犀草苷含量达不到0.05%，不符合《中国药典》标准。收集的3个产地的金银花药材木犀草苷含量基本接近；同一产地金银花中炕干较晒干的木犀草苷含量高；不同采收期中，头茬金银花中木犀草苷含量略高于二茬花。

表2 金银花样品来源情况及木犀草苷含量 (%)

续表2 金银花样品来源情况及木犀草苷含量 (%)

4 讨论

三个产地但相同采收期、相同干燥方式的金银花药材木犀草苷含量相差不大。炕干干燥方式明显优于晒干，收集的14批金银花样品中，炕干金银花木犀草苷含量均符合中国药典规定的≥0.05%，4批次晒干金银花木犀草苷含量<0.5%，不符合《中国药典》规定。此外，头茬花的木犀草苷含量高于二茬花。

金银花具有很高的药用价值，所含化学成分复杂，主要包括挥发油、黄酮类、有机酸和三萜皂苷类物质，其标志性成分为绿原酸和木犀草苷[7]，根据2015版《中国药典》规定，金银花的质量控制项目为绿原酸和木犀草苷含量，并常以是否含有木犀草苷区别金银花和山银花。测定的14批金银花药材中木犀草苷含量最高为0.063%，大部分合格批次金银花木犀草苷含量与合格线接近，这就要求金银花的种植、采收及加工过程各环节要严格控制，在实施金银花的GAP生产及采收加工过程中，应充分考虑这些影响因素，以提高金银花的质量和产量，为临床提供优质高效的金银花药材。