疾控中心微生物实验室质量控制影响因素及解决对策

陈世坤 许颖颖

疾控中心微生物检验在传染性疾病的预防、分析、诊疗过程中发挥着重要作用，其涉及到分子生物学、微生物学、细胞学等多门学科[1-2]，在面对重大传染性疾病时，一份及时准确的微生物检验报告是遏制事态进展，挽救患者生命的关键前提。随着微生物检验技术的不断进步，各类先进的检验仪器和技术在疾控中心实验室中得到了应用，但微生物检验除了要具备必要的仪器设备和技术外，送检标本质量、检验人员操作技术和环境因素也是关键因素[3-4]，由于病原微生物检验程序十分复杂，容易出现较多的失误环节，从而可能对检验结果的可靠性和准确性造成影响，耽误患者抢救时机，而微生物实验室检验结果与实验室质量控制有密切关联，对检验过程中影响到实验室质量控制的因素进行分析，并采取必要的对应措施减少质量问题，提高检验结果的准确性是目前疾控中心研究的重要问题。本次研究以上述问题为论点，采取回顾性分析法对本疾控中心实验室2016年9月—2018年12月580份微生物标本检验结果进行探讨，并统计质量问题的影响因素和强化质控前后的质量问题发生率，希望能为实验室检验工作提供参考。

1 对象与方法

1.1 分组对象

回顾性分析本疾控中心实验室2016年9月—2018年12月检验的580份微生物标本，2017年11月本疾控中心采取微生物标本检验质量强化控制措施，按照时间分为控制前（2016年9月—2017年10月）和控制后（2017年11月—2018年12月）各290份标本，控制前包括43份消毒餐饮具标本、52份公共卫生用品用具标本、54份空气标本、79份一次性消毒卫生用品标本、62份饮用水标本；控制后包括45份消毒餐饮具标本、51份公共卫生用品用具标本、55份空气标本、78份一次性消毒卫生用品标本、61份饮用水标本。

1.2 质量管理方法

微生物标本检验均由工作3～15年的4名实验室工作人员负责，室内划分有标本储存区、标本置备区，检验项目包括霉菌、大肠杆菌、沙门氏菌、溶血性链球菌、抗体检测等。观察实验室检验过程中出现的质量问题，并探讨其影响因素。2016年9月—2017年10月采取常规质量管理，包括：（1）做好无菌操作。采血时必须遵循一人一针一管的操作标准，操作结束后需及时洗手，毛巾专人专用，每日消毒避免交叉感染，检验结束后及时清洗容器和器材，干燥灭菌后放回原处，存在传染风险的标本，需经灭菌处理后方能废弃。每日打扫地面，以消毒剂擦拭地板和台面，保持室内整洁。（2）标本分区制备检验。一律凭单采集标本，做好科室、床号、姓名、性别、检验项目的核对工作，将实验室分为缓冲间、操作间、无菌间三个区域，缓冲间负责培养基配制和试剂储藏，禁止将细菌检验标本带入。操作间需与其他区域区分开来，人员进入时需更换防护衣和防护鞋，运送标本的人员严禁进入操作间。无菌间负责保存不同的标本，并在安全柜中做好标识。（3）控制好检验时间。加入促凝剂的标本需在采血后5～15 min尽早处理，加入抗凝剂的标本则可立即离心，从标本收集开始，在2 h内需分离血清和血浆，尽可能缩短采集到分离血清和血浆的时间，标本制备完成后需转入2～8℃的冰箱保存，所有标本均在48 h完成检验。（4）按标准流程处理废弃物。按照损伤性废弃物、化学性废弃物、感染性废弃物的标准对废弃物进行分类放置，由专人登记收集，按照规定的路线和时间送至医疗废弃物贮存房，移交给医疗垃圾处理人员回收处理。

2017年11月—2018年12月针对性实验室微生物标本检验强化质量管控措施：（1）提高检验人员综合素质。要求检验人员不断提高操作技术，并掌握新的知识和技能，了解国家出台的检验法规与标准，熟悉基础医学、微生物学理论知识并将其运用到检验过程中。实验室多开展培训活动，邀请工作经验丰富的技术人员开展现场教学指导，保证每一位检验人员均能熟练掌握检验技能，同时加强质量控制意识教育，让检验人员意识到工作的重要性，以严谨认真、富有责任心的态度开展工作，避免人为操作导致的检验误差。（2）样本和试剂的质量控制。对样本采集时间、数量、方法、采集环境进行严格控制，要求样本具有代表性，采集后进行低温密封保存，及时送检，避免样本变质。同时需对试剂的种类、浓度、配置时间、失效日期做好标记，按照试剂存放要求避光保存或冷藏，检验前先进行阳性和阴性菌株对照检验[5]，符合质控标准后方能使用。（3）保持无菌环境。检验场地需远离洗手间、垃圾桶等污染区域，并保持无菌室通风和采光条件，所用物品需能耐受每天的消毒和清洗，室内墙壁天花板不能留有缝隙和死角，操作间不得安装下水道，在操作间和缓冲间配置样本传递箱，缓冲间内需具备洗手盆、无菌衣物、毛巾等物品，禁止将无菌培养箱放在缓冲间。定期检查无菌室内紫外线消毒灯辐射强度，若低于空气消毒标准则立即更换[6]。工作人员必须在穿戴工作服的前提下才能进行检验操作，严格落实无菌操作标准。（4）仪器管理。检验前先对仪器进行鉴定，保证校准精确。不同仪器需打上不同的标识、操作规程、使用和维保记录，定期维护高压灭菌器、培养箱和冰箱等设备，保持显微镜和配套器皿的清洁度，生物安全柜、天平则需定期进行外观清洁、防潮、防震处理[7]。

1.3 观察方法

对比强化质量控制前后两个时间段内的质量问题发生率和影响因素。质量问题包括菌落总数检验误差率、总大肠菌群检验误差率、霉菌检验误差率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0对数据进行统计分析，计数资料以“n（%）”表示，采用χ2检验，P≤0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 质量问题发生率

控制前共有52例标本检验过程中出现质量问题，控制后质量问题发生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 微生物实验室检验质量的影响因素

操作因素、样本因素、环境因素、仪器因素、人员因素是导致微生物实验室检验质量问题的主要因素，占比分别为19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%；控制后各因素导致的质量问题均少于控制前，且操作因素、样本因素、人员因素导致的质量问题对比差异有统计学意义（P＜0.05），环境、仪器因素导致的质量问题对比无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

3 讨论

3.1 影响因素探讨

本次研究结果显示：控制前共有52例标本检验过程中出现质量问题；操作因素、样本因素、环境因素、仪器因素、人员因素是导致微生物实验室检验质量问题的主要因素，占比分别为19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%。因素分析为：（1）操作因素和人员因素均与检验工作人员的专业水准、法律意识、责任心等综合素养有关，若实验室工作人员对质量管理的依从性差，则可能导致检验结果出现较大的误差，对质量控制水平造成直接影响。（2）样本因素。微生物样本是检验的重要组成部分，样本采集时间、方法、采集量、保存和运输方法均会对其质量造成影响，且试剂质量也会对检验结果造成影响[8-9]。（3）环境和仪器因素。检验过程中温湿度、空气洁净程度会导致环境污染，无法真正实现无菌检测，且实验室日常工作中对实验环境的实时监控和管理不够全面，导致检验结果失真[10]。而设备因素则是因设备老旧或不合格，无法满足个别复杂的检验，或因检验操作期间设备故障、损坏导致操作时间延长[11-12]，从而对检验质量造成影响。

表1 质量控制前后微生物检验质量问题发生率对比[例（%）；n＝290]

表2 微生物检验质量影响因素统计和质量控制前后因素导致的质量问题对比[例（%）；n＝290]

3.2 处理结果

根据以上分析，本次研究于2017年11月—2018年12月根据影响因素采取针对性实验室微生物标本检验强化质量管控措施，结果显示控制后质量问题发生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差异有统计学意义（P＜0.05）；控制后各因素导致的质量问题均少于控制前，且操作因素、样本因素、人员因素导致的质量问题对比差异有统计学意义（P＜0.05）。说明强化质量管控能减少疾控中心微生物实验室工作人员操作因素、样本因素、人员因素对检验质量造成的影响，从而提高检验的准确性。

综上所述，疾控中心微生物实验室检验过程中容易受操作因素、样本因素、环境因素等多种影响，导致质量问题，采取全方位、针对性的质量强化控制措施能有效减少质量问题，提高微生物标本检验的准确性。