γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73及甲胎蛋白检测对早期原发性肝癌的诊断价值

郭鸿雁，刘庆峰

1首都医科大学附属北京佑安医院临检中心，北京100069

2中国中医科学院广安门医院检验科，北京1000530

原发性肝癌是临床中常见的恶性肿瘤，严重威胁患者的生命健康。肝癌的发病机制尚不清楚，可能与环境、遗传、病毒感染等多种因素有关，任何年龄段均可发生肝癌，若不接受治疗，患者的5年生存率小于5%[1]。肝癌患者的早期临床症状并不明显，大多数患者在确诊时已处于中晚期，错过了最佳治疗时期，增加了临床治疗难度，且治愈率极低[2-3]。因此，提高肝癌的早期诊断率，并给予患者适当的治疗是延长其生存时间的有效方法[4]。甲胎蛋白是目前临床诊断原发性肝癌最有效的肿瘤标志物，也是最普遍的肿瘤标志物之一，但其灵敏度和特异度欠佳，导致早期原发性肝癌的确诊率较低，易出现漏诊或误诊[5]。随着医疗水平的不断进步，蛋白质组学技术不断提高，新的肿瘤标志物也相继被发现，高尔基体蛋白73、γ-谷氨酰转肽酶均被认为是有价值的肝癌血清标志物，对提高早期原发性肝癌的诊断率具有积极作用[6]。本研究对早期原发性肝癌患者、肝硬化患者及健康体检者的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73及甲胎蛋白水平进行检测，旨在探讨上述指标单独及联合检测对早期原发性肝癌的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年7月至2016年8月于首都医科大学附属北京佑安医院接受治疗的肝病患者。纳入标准：经病理学检查确诊为早期原发性肝癌，或符合2010年版《慢性乙型肝炎防治指南》[7]中肝硬化的诊断标准。排除标准：①合并严重心、肾功能障碍；②合并免疫系统功能障碍；③合并凝血功能障碍。根据纳入和排除标准，本研究共纳入94例肝病患者，其中早期原发性肝癌患者48例（肝癌组），肝硬化患者46例（肝硬化组）。另选择同期于首都医科大学附属北京佑安医院进行体检的45例健康体检者作为对照组。肝癌组中，男25例，女23例；年龄32～58岁，平均（45.89±4.57）岁。肝硬化组中，男24例，女22例；年龄31～57岁，平均（45.62±4.60）岁；对照组中，男22例，女23例；年龄32～57岁，平均（45.71±4.52）岁。3组研究对象的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

抽取3组研究对象的清晨空腹外周静脉血4 ml，离心后分离血清，置于-20℃冰箱中备用。采用电化学发光法检测血清甲胎蛋白水平，采用生化分析仪检测血清γ-谷氨酰转肽酶水平，采用免疫层析法检测血清高尔基体蛋白73水平。联合检测时，任意一个指标为阳性即诊断为阳性。血清γ-谷氨酰转肽酶的正常值为3～50 U/L，高尔基体蛋白73的正常值为24.9～43.4 ng/ml，甲胎蛋白的正常值为＜25 ng/ml。

1.3 观察指标及评价方法

比较肝癌组、肝硬化组及对照组的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平。以病理诊断结果为“金标准”，计算血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73、甲胎蛋白单独及联合检测诊断早期原发性肝癌的灵敏度、特异度和准确度。灵敏度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数/（真阴性+假阳性）例数×100%，准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数×100%。其中，肝癌组48例患者均进行了病理检查；肝硬化组患者中，29例患者进行了病理检查；对照组未进行病理检查。

1.4 统计学分析

采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组比较采用方差分析，多组内两两比较采用LSD-t检验，计数资料以例数和率（%）表示。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清 γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平的比较

肝癌组、肝硬化组和对照组的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）。肝癌组患者的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平均高于肝硬化组和对照组，肝硬化组患者的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 3组研究对象血清 γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平的比较（±s）

表1 3组研究对象血清 γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平的比较（±s）

注：a与对照组比较，P<0.05；b与肝硬化组比较，P<0.05

组别肝癌组（n=48）肝硬化组（n=46）对照组（n=45）F值P值γ-谷氨酰转肽酶（U/L）95.8±5.5a b 65.2±6.2a 17.8±3.3 2675.935 0.000高尔基体蛋白73（ng/ml）256.3±31.3a b 142.1±20.1a 43.5±3.5 1108.368 0.000甲胎蛋白（ng/ml）196.0±24.3a b 125.6±12.1a 6.0±1.8 1681.512 0.000

2.2 γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73、甲胎蛋白单独及联合检测对早期原发性肝癌的诊断效能

γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白单独检测诊断早期原发性肝癌的灵敏度分别为56.25%（27/48）、58.33%（28/48）和 54.17%（26/48），均低于3项指标联合检测的87.50%（42/48）。γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白单独检测诊断早期原发性肝癌的准确度分别为67.53%（52/77）、67.53%（52/77）和63.64%（49/77），均低于3项指标联合检测的80.52%（62/77）。γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73、甲胎蛋白单独及联合检测诊断早期原发性肝癌的特异度分别为86.21%（25/29）、82.76%（24/29）、79.31%（23/29）、68.97%（20/29）。（表2）

表2 3种血清肿瘤标志物单独及联合诊断早期原发性肝癌与病理诊断结果的对照

3 讨论

原发性肝癌是临床中最常见的恶性肿瘤之一，由于确诊时间较晚，治疗效果差，导致病死率较高。早期诊断对提高原发性肝癌的治疗效果尤为关键。研究表明，肝癌的恶性程度较高，病情进展快，预后差，临床诊断主要依靠影像学检查和肿瘤标志物检测，而影像学检查无法确定肿瘤的良恶性[4]。甲胎蛋白是既往临床诊断原发性肝癌的最常用的指标，但数据统计表明，大约30%的肝癌患者甲胎蛋白水平正常，其灵敏度较低[8]。另有研究证实，甲胎蛋白与其他肿瘤标志物联合检测可提高早期原发性肝癌的诊断率[9]。

高尔基体蛋白73属于高尔基体中的一种跨膜蛋白，在正常机体组织中，高尔基体蛋白73主要在胆管上皮细胞中表达，在肝细胞中表达较少甚至不表达，但在肝细胞受到病毒感染，或出现肝癌、肝硬化时，高尔基体蛋白73表达异常升高，高尔基体蛋白73表达可能与维持高尔基体结构的完整性有关，而细胞结构的改变与肿瘤的发生具有密切关系[10-11]。研究表明，肝细胞中高尔基体蛋白73表达的增量调节是肝癌患者血清高尔基体蛋白73升高的主要原因，表明高尔基体蛋白73可能成为诊断早期原发性肝癌的血清标志物[12]。另有研究指出，原发性肝癌患者的γ-谷氨酰转肽酶表达水平异常升高，其诊断原发性肝癌的灵敏度和特异度均较高，可作为诊断早期原发性肝癌的肿瘤标志物[13]。本研究结果表明，肝癌组患者的血清γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白水平均高于肝硬化组和对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。说明以上3项指标在原发性肝癌患者血清中的表达水平较高，可作为临床辅助诊断早期原发性肝癌的重要血清标志物。

甲胎蛋白对肝癌的早期诊断具有良好的临床应用价值，高尔基体蛋白73、γ-谷氨酰转肽酶在肝癌的临床检测和诊断中也有一定的应用，但迄今为止并未发现一种血清肿瘤标志物能够100%地检测出早期肝癌。本研究结果表明，γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白联合检测诊断早期原发性肝癌的灵敏度和准确度分别为87.50%和80.52%，均高于3项指标单独检测的结果。分析原因可能是多种血清肿瘤标志物联合检测可减少单一肿瘤标志物检测导致的误诊、漏诊，提高诊断准确度，弥补单一肿瘤标志物检测的不足[14-15]。研究表明，多种肿瘤标志物联合检测可提高早期原发性肝癌的检出率，对提高患者的生存率具有重要作用[16-17]。本研究结果与上述研究结果基本一致，证明了γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白联合检测的有效性，对评估患者病情具有重要作用，是诊断早期原发性肝癌的有效方法。

综上所述，γ-谷氨酰转肽酶、高尔基体蛋白73和甲胎蛋白联合检测对早期原发性肝癌具有较高的诊断价值，是临床诊断肝癌的有效方法，对原发性肝癌高危人群的筛查具有重要意义。