可溶性CD14亚型检测作为脓毒血症标志物的探讨

赵元明,陆书华,申爱华,李晓哲,山凤莲

(济宁医学院附属医院 检验科,山东 济宁272029)

脓毒症是一种由感染诱发的以全身炎症反应和器官功能损害为特征的复杂临床综合征，已成为重症监护病房(ICU)患者的主要死亡原因，病死率可达30-50%[1,2]。根据新的脓毒血症治疗指南，早期诊断脓毒血症对临床医疗救治ICU 患者至关重要[3]。本研究通过对89例血培养阳性的脓毒症患者进行血清降钙素原、C反应蛋白、可溶性CD14亚型检测，探讨可溶性CD14亚型与血培养的相关性及其对脓毒症早期诊断的临床价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2016年6月至2017年12月本院住院患者，阳性病例组：临床诊断为脓毒症且血培养阳性患者89例，诊断标准符合2012年国际脓毒症会议诊断标准[4]；阴性对照组：同期住院的非感染SISR患者且血培养阴性259例。两组临床资料见表1。

表1 两组临床资料

1.2 方法所有患者应用抗生素前空腹采血,采集静脉血 3-5 ml于真空采血管中，3 000 r/min 离心10 min ，分离血清后置于-80℃保存用于检测 sCD14-ST、PCT、CRP。同时无菌操作采集患者静脉血 15-20 ml，分别注入需氧培养瓶和厌氧培养瓶中。sCD14-ST的测定：采用ELISA法检测患者血清内sCD14-ST水平(试剂来源abbexa)；采用全自动生化分析仪(Cobas c702)免疫比浊法检测血清CRP 的水平；Roche Cobas e601化学发光分析仪检测降钙素原(PCT)；血培养检测方法：血培养瓶置于 Bact-ALTERT 3D 血培养仪中进行培养，鉴定仪器为法国生物梅里埃公司生产的 VITEKⅡ，以上均采用设备配套试剂，所有操作严格按照使用说明书要求进行。

1.3 观察指标

血培养以培养出致病细菌为阳性，sCD14-ST>365 pg/mL为阳性；CRP>10 mg/ml为阳性；PCT>0.5 μg/L为阳性。

1.4 统计学方法

采用 SPSS 18.0 统计软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P<0.05 为差异有统计学意义。绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积来评价各指标的诊断价值。

2 结果

2.1 阳性组与阴性对照组各检测指标结果比较阳性组与阴性对照组血清 sCD14-ST、PCT、CRP结果见表2，阳性组患者血清sCD14-ST、PCT、CRP结果均显著高于阴性对照组(P<0.01)。

表2 阳性组与阴性对照组sCD14-ST 、PCT、CRP结果比较

与阴性对照组比较：※P<0.01差别有显著统计学意义。

2.2 可溶性CD14亚型、PCT、CRP与血培养结果对比以血培养为诊断脓毒血症的金标准，sCD14-ST、PCT、CRP与血培养结果比较见表3。将分析结果进行一致性分析，表明可溶性CD14-ST检测结果与金标准血培养相比，两种检测方法高度一致，Kappa值为0.835；PCT检测结果与血培养相比，两种检测方法基本一致，Kappa值为0.612；CRP检测结果与血培养相比，两种检测方法一致性较差，Kappa值为0.412，表明CRP并不是脓毒症的理想标志物。

表3 sCD14-ST、PCT、CRP检测结果与血培养结果分析

2.3 sCD14-ST与PCT、CRP预测脓毒症的ROC曲线及AUC值sCD14-ST与PCT、CRP预测脓毒症的ROC曲线见图1，sCD14亚型AUC值最大，说明sCD14亚型在诊断败血症的准确性方面高于PCT、CRP(见表4)。

3 讨论

脓毒症可导致SIRS，但并不是所有的SIRS是有脓毒症所致，因此,如何鉴别非炎症性SIRS和脓毒症性SIRS、早期识别感染性疾病成了近年来多学科讨论的热点和研究的方向。血培养是诊断脓毒血症的金标准已为临床共识[5,6]，但由于各种原因如采血部位、时间、采血量，抗菌素的应用等造成阳性率低，并且检测周期需48-72小时，耗时长，延误病情。

图1 sCD14亚型、PCT、CRP预测脓毒症的ROC曲线

表4 sCD14亚型、PCT、CRP水平诊断脓毒症ROC曲线的AUC评价

2004 年 Shirakawa K发现了一种新型的生物标记物即可溶性 CD14 亚型(soluble CD14 subtype，sCD14-ST)[7]，研究显示可溶性 CD14 亚型在感染患者中明显升高，其血清浓度明显高于非感染患者，认为 Presepsin 是机体应对细菌感染产生的，对脓毒血症诊断的敏感性、特异性均为较好的生物标记物[8]。本文研究结果表1显示：血培养阳性患者组血清可溶性CD14亚型浓度明显高于血培养阴性患者组(P<0.01)，表明可溶性CD14亚型可作为脓毒症诊断的标志物。

表4结果显示sCD14亚型诊断脓毒症敏感度为82.0%、特异度为98.1%、准确性为94.0%，将sCD14亚型结果与血培养结果进行一致性检验(表3)，Kappa=0.835，表明sCD14亚型结果与血培养阳性结果有高度的一致性，提示sCD14亚型对脓毒症的诊断有一定的优势。PCT诊断脓毒症敏感度为77.5%、特异度为86.9%、准确性为84.5%，将PCT结果与血培养结果进行一致性检验，Kappa=0.612，通过对比分析两者间不同的结果，可溶性CD14亚型的检测结果更符合血培养检测结果(金标准)。表明可溶性CD14亚型作为脓毒症标志物优于PCT，与Liu等[9]研究的结果：sCD14-st较PCT和CRP更能准确地判断脓毒症相同。

比较sCD14亚型与降钙素原、C反应蛋白的AUC值，sCD14亚型的AUC值最大，说明可溶性CD14亚型检测在诊断脓毒症的准确性方面高于降钙素原、C反应蛋白。综上所述：可溶性CD14亚型检测结果与血培养阳性结果高度相关性、总符合率高，为提供了一个依靠血培养检查来判断脓毒症的又一指标，为基层医院或不具备血培养条件的医院提供简单、易行的检测手段，且将诊断时间可提前 48-72 h，有助于临床对脓毒症的早期诊断提供有价值指标。