沙门氏菌快速检测板在食品检测中的应用

常晓萌 陈芳园 王俊华 王玉霞

社会不断推进发展的进程中，使人们对于生活质量的要求逐渐增加。尤其是在食品安全领域，为食品检测技术提出了更加复杂的要求。由此，也使食品检测方法成为了相关科研人员研究的重点方向。为了高效完成食品中的沙门氏菌检测任务，应对检测方法进行拓展研究，并对沙门氏菌快速检测板的技术原理，进行系统性的分析，以便为技术条件的应用奠定基础。本文以食品检测为研究对象，对沙门氏菌的快速检测板应用方法进行分析。在介绍其检测技术的基础上，通过材料备制、仪器准备、菌株培养、标准检测方法、3M沙门氏菌快速检测板法的内容讨论，介绍具体的操作方法，为相关研究与实践工作提供参阅材料。

沙门氏菌快速检测板技术

沙门氏菌是典型的肠杆菌，带有较强的致病性，可诱发人类的伤寒、腹泻等病状，严重时甚至会引发食物中毒。在病菌传播的过程中，沙门氏菌主要将家禽、蛋类、肉类等日常生活中常见的食物作为媒介，完成传播。统计数据显示，我国每年产生的食物中毒事件，有70%都是由沙门氏菌引起的。因此，必须通过研究，找到快速甄别沙门氏菌的检测办法，提高食品检测效率与质量。

当前的科研技术条件下，沙门氏菌的检测可以通过沙门氏菌快速测试片的方法完成，这其中又以3M沙门氏菌快速测试最为典型。在试验原理上，将温度与时间作为执行检验的单位，针对不同类型的食品，完成沙门氏菌检验工作。这种检测方法较为简便，并能够高效率的完成检验任务，精确判定食品中是否带有沙门氏菌。

沙门氏菌快速检测在食品检测中的应用方法

材料、仪器准备。沙门氏菌快速检测的食品检测应用试验中，要准备实验材料与基本仪器设备。在灭菌设备的准备上，可以根据实际情况，选择干热或是湿热设备。备至恒温培养箱3个，温度参数分别设定在 36℃、42℃、41.5℃，培养箱的允许温度误差保持在±1℃。移液管的规格型号，应选用0.1mL或1mL，并保证精准度参数为±5%，培养皿的直径为90mm，天平的感量级别为0.01g。

备至材料的过程中，需准备适量的BPW缓冲蛋白胨水、SC增菌液、TTB增菌液、BS亚硫酸铋琼脂平板以及A至F的多价血清。同时，从美国3M公司处购得专业的测试片与确认片，并获得用于试验的3M沙门氏菌。准备试验的过程中，还需培植3株标准株，并对成品菌株进行贮藏，在使用前，将其制成104CFU/mL的肉汤。

标准检测过程。在无菌化的操作条件下，获取25mL的试验样品，将其放置在220mL的缓冲蛋白胨水中培养。培养过程中，需将配制好的培养对象放置在36℃的恒温培养箱中，放置8- 18小时。在完成培养后，将培养对象取出恒温箱，轻轻的对经过培养的混合物样品进行摇晃，并提取其中的1mL。然后，将提取的1mL混合物转放到10mL的TTB样本中，再使用42℃的恒温箱培养18- 24小时。当完成培养时，再次按照之前的工序提取1mL二次混合物，转放到10mL的SC样本中，并将这经过两次提取与混合的溶液，再次放置在36℃的恒温箱中，完成18- 24小时的培养。

完成这一阶段的三次培养与混合后，应分别从接种环中提取增菌液1环，并以划线接种的方法，分别放置在BS琼脂板与XLD琼脂上，以此完成快速检测板的制作。将两个检测板放入36℃的恒温箱中进行分别培养，维持18小时后，就基本可以观察出检测板中的菌落生成情况。而为了进一步扩大沙门氏菌的显示效果，也可以适当的延长检测板在恒温箱中的培养时间，使其保持40- 48小时的培养状态。这种快速检测方法，是我国制定的标准化检测方法，可以作为执行沙门氏菌快速测试板食品检测的规范化方法，也能作为新型检测方法的具体参照。

3M沙门氏菌的快速测试板法。3M沙门氏菌快速测试板方法下，也需在无菌条件下进行操作，将3M沙门氏菌与增菌补充物质放置在无菌培养基中，然后，将待检测食物按照一定比例稀释，并放置在无菌的容器中。在进行测试培养之前，应对食物的带菌量进行预估，如果其带菌量较低，可以适当的延长培养时间（最低18小时）。反之如果预估带菌量较高，则可转移到特定的R- V R10溶液中進行相对时间较少（最低8小时）的培养。注意，此项培养过程中，应使用41.5℃的恒温箱，且保证培养的时间不超出24小时。

在完成培养后，应备至3M沙门氏菌测试片，使其平放在实验台上，并使用移液器向测试片滴放2mL的无菌水，然后再放置上层膜，并在操作中避免出现气泡。把3M压板放在测试片的中心位置，并施加较轻的压力，使无菌水充分的覆盖在试片的表面。注意，不能在膜上发生压板的滑动，以免实验效果受到影响。完成处理后，需将制成的试片放置在温度为20℃- 25℃的避光位置，保持1小时。完成水化的试片，应在8小时之内进行使用，以免影响试验效果。

当完成试片的水化后，需进行接种处理，对于菌量较低的试验样品，可以采用10μL的灭菌接种环，蘸取相应的增菌液。如果预估的菌量较高，则需使用R- V R10溶液，并蘸取满10μL完成接种。在完成接种后，应根据待检测的食品情况进行排列，且在清晰的划线条件下，区分不同食品的品类，以便更加清晰的观测到试验的结果信息。此时，应使用41.5℃的恒温箱，进行24小时的培养。注意，单次的培养不应使被检测叠片数量超过20。

完成接种以及其后续培养处理后，应根据试片的表现形式，对食品样品的带菌情况进行初步判定。当被测试对象出现黄色晕圈、并带有红色菌落，可将其定义为阳性菌落，同时仅带有红色菌落的测试片，也可以定义为阳性菌落。然后，将判定为阳性菌落的测试片单独进行标记，并执行后续的确认判断。确认判断中，需掀起3M沙门氏菌上膜片，并使用确认膜片进行替换。在保证凝胶层与确认膜片完全贴合，且没有气泡的条件下，完成测试片的闭合。闭合后，还需对膜片的贴合效果进行再次确认，并将其放置在41.5℃的恒温箱中，维持4- 5小时。如果待确定的试片中，发生蓝色沉淀或是黑色菌落，则可确定该膜片的测试食物中沙门氏菌为阳性。

综上所述，沙门氏菌快速测试板法，可以快速定位食品中所携带的沙门氏菌，完成食品检测的客观需要。在检测方法上，又可明显的区分为国家标准法与3M沙门氏菌快速检测法，在食品检测活动中，有较为突出的应用价值。而对此项技术的研究分析，不仅可以巩固技术应用效果，也可加快食品检测的技术发展，为保卫社会食品安全创造科学条件。但日后有关研究人员仍需对这一方法展开深入的探究，通过不断的尝试与探索，进一步完善该方法，提升其检测效果。